目的本研究以孔鰩魚為原材料,探究其中硫酸軟骨素寡糖的提取、分離及純化工藝,并對(duì)各級(jí)產(chǎn)物進(jìn)行了產(chǎn)率、分子量、抗氧化活性等多方面的對(duì)比,響應(yīng)面法確定稀堿酶法最優(yōu)工藝條件,為硫酸軟骨素寡糖的研究發(fā)展提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法先分別用濃堿法、堿鹽法以及稀堿法三種不同提取工藝對(duì)孔鰩魚軟骨進(jìn)行硫酸軟骨素的提取,之后再通過分析產(chǎn)品得率、氨基己糖和氮雜質(zhì)的含量來比對(duì)三種工藝所得成品的質(zhì)量區(qū)別,以尋找最佳的提取工藝。用響應(yīng)面法確定稀堿酶法的最佳工藝條件。此后以堿鹽法所提取到的硫酸軟骨素成品為材料,做進(jìn)一步的降解、分級(jí)分離和純化,以獲得純度較高的單一組分的硫酸軟骨素寡糖。在降解時(shí)采用了酶解和酸解兩種方式,通過對(duì)比降解產(chǎn)物的生物活性來確定酶解產(chǎn)物進(jìn)入下一級(jí)的分離純化。同時(shí)對(duì)酶解時(shí)間進(jìn)行了考察,確定5.5h為最佳酶解時(shí)間。此后以酶解5.5h的硫酸軟骨素寡糖的初級(jí)產(chǎn)物為原料,建立分級(jí)分離純化體系。在逐步經(jīng)過凝膠過濾分離、陰離子交換分離、制備電泳分離和AKTA superdex peptide柱分離后得到組分相對(duì)比較單一的高純度硫酸軟骨素寡糖。在這一過程中,對(duì)每一級(jí)的分離產(chǎn)物都進(jìn)行分子量和抗氧化活性的檢測(cè)。用響應(yīng)面法確定... 

【文章來源】：錦州醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同制備工藝所得硫酸軟骨素成品的產(chǎn)品得率

結(jié)果和討論三種制備工藝所得產(chǎn)品得率結(jié)果如下：圖 1 不同制備工藝所得硫酸軟骨素成品的產(chǎn)品得率如上圖，經(jīng)重復(fù)三次堿鹽法所獲得的硫酸軟骨素成品 B 得率最44.7%。三種制備工藝所得氨基己糖含量比較結(jié)果如下：

圖 3 三種制備工藝所得硫酸軟骨素成品氮含量比較如上圖所示，經(jīng)重復(fù)三次濃堿法所得成品中氮含量最低，說最高，而堿鹽法所得成品 B 的氮含量 2.8%略高于濃堿法的成準(zhǔn)范圍內(nèi)，而且二者差異并不大�？紤]到高濃度的堿溶液對(duì)性影響較大，綜合之下我們認(rèn)為，在三種制備工藝中，堿鹽因此接下去的實(shí)驗(yàn)步驟均使用硫酸軟骨素成品 B。若干份等量的孔鰩魚軟骨原料，分別在不同的堿提時(shí)間下進(jìn)法提取。按照堿提時(shí)間將實(shí)驗(yàn)分成 1h、2h、3h、4h、5h 這鹽法提取 3 次，分別計(jì)算得率后取平均值記錄，結(jié)果如下：

【參考文獻(xiàn)】：
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