目的:探討5-甲氧基黃酮（5-methoxyflavone）對基因無義突變的通讀活性,研究該化合物對無義突變所導致的腫瘤及其它疾病治療的藥物潛力。方法:通過本課題組已經(jīng)建立的無義突變蟲熒光酶細胞模型,初步篩選出了能夠進行無義突變蟲熒光素酶通讀的陽性通讀劑黃酮類化合物5-甲氧基黃酮。接著用5-甲氧基黃酮處理含有無義突變蟲熒光素酶的HEK293MUT細胞,化學發(fā)光法檢測蟲熒光素酶活性,Western blot檢測蟲熒光素酶蛋白水平;最后用5-甲氧基黃酮處理含有無義突變APC基因的人結(jié)腸癌細胞HT-29,Western blot檢測APC蛋白及下游蛋白β-連環(huán)蛋白表達;CCK-8實驗分析5-甲氧基黃酮的細胞毒性;利用相同方法對與5-甲氧基黃酮擁有相似結(jié)構的化合物進行實驗分析。結(jié)果:在初步確認5-甲氧基黃酮具有無義突變通讀活性后,進一步進行化合物的檢測和分析,發(fā)現(xiàn)5-甲氧基黃酮在HEK293MUT細胞中表現(xiàn)出的通讀效率相比G418更高（P<0.05）。在HT-29細胞中,隨著劑量升高,5-甲氧基黃酮對無義突變APC基因蛋白的表達恢復也逐漸增強。并且,5-甲氧基黃酮對無義突變APC基因的通... 

【文章來源】：武漢科技大學湖北省

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

藥物處理HEK293MUT細胞后熒光素酶相對發(fā)光值

武漢科技大學碩士學位論文10時，5-甲氧基黃酮對無義突變熒光素酶蛋白的表達恢復能力也同樣要優(yōu)于參照物G418。圖2藥物處理HEK293MUT細胞后熒光素酶蛋白表達恢復結(jié)果2.3不同濃度5-甲氧基黃酮對HT-29細胞無義突變APC基因蛋白表達的影響實驗結(jié)果如圖3所示，不同濃度5-甲氧基黃酮處理過后的HT-29細胞均表達APC蛋白，而且隨著濃度的升高，HT-29細胞APC蛋白表達也有所提升。這表明5-甲氧基黃酮對HT-29細胞無義突變APC基因蛋白表達恢復產(chǎn)生了影響。同時還發(fā)現(xiàn)，5-甲氧基黃酮對HCT-116細胞內(nèi)正常APC基因表達無明顯作用。圖3不同濃度5-甲氧基黃酮對HT-29細胞無義突變APC基因蛋白表達的影響

武漢科技大學碩士學位論文10時，5-甲氧基黃酮對無義突變熒光素酶蛋白的表達恢復能力也同樣要優(yōu)于參照物G418。圖2藥物處理HEK293MUT細胞后熒光素酶蛋白表達恢復結(jié)果2.3不同濃度5-甲氧基黃酮對HT-29細胞無義突變APC基因蛋白表達的影響實驗結(jié)果如圖3所示，不同濃度5-甲氧基黃酮處理過后的HT-29細胞均表達APC蛋白，而且隨著濃度的升高，HT-29細胞APC蛋白表達也有所提升。這表明5-甲氧基黃酮對HT-29細胞無義突變APC基因蛋白表達恢復產(chǎn)生了影響。同時還發(fā)現(xiàn)，5-甲氧基黃酮對HCT-116細胞內(nèi)正常APC基因表達無明顯作用。圖3不同濃度5-甲氧基黃酮對HT-29細胞無義突變APC基因蛋白表達的影響


本文編號：3433639