目的:本文利用小鼠骨髓來源肥大細(xì)胞（bone marrow-derived mast cells,BMMCs）、嗜堿性白血病細(xì)胞【rat basophilic leukemia（RBL）,RBL-2H3】和人肥大細(xì)胞（human mast cell,HMC-1）對三萜類化合物23-乙酰澤瀉醇B（alisol B 23-acetate,AB23A）的體內(nèi)外抗炎作用及機(jī)制進(jìn)行研究,為新型抗炎藥物的開發(fā)提供了理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法:1.利用MTT方法檢測不同濃度AB23A在BMMCs、RBL-2H3和HMC-1中無細(xì)胞毒濃度范圍。2.利用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）測定AB23A對免疫球蛋白E（immunoglobulin E,Ig E）/抗原（antigen,Ag）激活的BMMCs中白三烯C4（leukotriene C4,LTC4）合成、組胺（histamine）釋放、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6,IL-6）生成等的影響。利用免疫熒光法測定AB23A對激活BMMCs內(nèi)Ca2+動(dòng)員的影響。3.利用Weste... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

AB23A抑制IgE/Ag刺激的BMMCs中PLCγ的磷酸化、組胺釋放和Ca2+動(dòng)員

31圖 3. AB23A 通過 Akt/IκB/NF-κB 通路抑制 IL-6 的產(chǎn)生和 COX-2 的表達(dá)。(a)AB23A 對 IgE/Ag 介導(dǎo)的 BMMCs 中 IL-6 產(chǎn)生的影響；(a) AB23A 對 IgE/Ag 介導(dǎo)的 BMMCs 中 COX-2 產(chǎn)生的影響；(c) AB23A 對 IgE/Ag 介導(dǎo)的 BMMCs 中Akt/IκB/NF-κB 中相關(guān)蛋白表達(dá)及磷酸化水平的影響；(d-e) 相關(guān)蛋白灰度統(tǒng)計(jì)。Figure 3. AB23A inhibits the production of IL-6 and the expression of COX-2through part of the Akt/IκB/NF-κB pathway. (a) IgE-sensitized BMMCs werepre-treated with AB23A or Bay 61-3606 for 1 h and stimulated with DNP-HSA for 6h. IL-6 were measured by ELISA. (b) IgE-sensitized BMMCs were pre-incubatedwith aspirin for 2 h to eliminate the activity of COX-1. After washing, the BMMCswere treated for 1 h with the AB23A or Bay 61-3606 and then stimulated withDNP-HSA for another 7 h. Cell lysates were immunoblotted with the antibody for

AB23A抑制Syk相關(guān)通路


本文編號：3430738