第一部分下調(diào)RbAp48表達(dá)抑制腫瘤細(xì)胞增殖的機(jī)制研究目的:RbAp48屬于WD蛋白家族,是一個(gè)存在于幾乎所有真核生物中高度保守的蛋白。我們前期研究發(fā)現(xiàn),下調(diào)RbAp48表達(dá)可誘導(dǎo)人肺癌、宮頸癌、胃癌、大腸癌等多種腫瘤細(xì)胞發(fā)生周期阻滯并抑制其增殖,然而其作用機(jī)制尚不清楚,為此我們進(jìn)行研究。方法:以RNA干擾技術(shù)下調(diào)目的蛋白的表達(dá);以全基因組測序法檢測下調(diào)RbAp48表達(dá)后對細(xì)胞基因表達(dá)的影響,以GO和KEGG對差異表達(dá)基因進(jìn)行分析;Western blot檢測下調(diào)RbAp48表達(dá)后蛋白的改變;MTT法檢測下調(diào)及過表達(dá)（慢病毒載體構(gòu)建）目的蛋白對siRbAp48抑制細(xì)胞增殖能力的影響。結(jié)果:1.測序顯示以siRbAp48下調(diào)A549細(xì)胞RbAp48的表達(dá)后有468個(gè)基因的表達(dá)發(fā)生改變,其中164個(gè)基因表達(dá)下調(diào),304個(gè)基因表達(dá)上調(diào)。GO分析表明下調(diào)RbAp48表達(dá)后影響最顯著的功能是調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖（P=4.07E-05,校正P=0.035）;KEGG分析顯示與非小細(xì)胞肺癌通路相關(guān)的56個(gè)基因中,CCND1（編碼CyclinD1蛋白）與下調(diào)RbAp48密切相關(guān)。2.Western blot證... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：113 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１質(zhì)粒空載體（左）和含ＣＣＮＤ１基因全載體（右）圖譜

?Ｉ??Ｉ?ＣＣＮＤ１?Ｉ?ＣＭＶ?ｐｒｏｍｏｔｅｒ??圖１－１質(zhì)�？蛰d體（左）和含ＣＣＮＤ１基因全載體（右）圖譜。??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｈｅ?ｍａｐｓ?ｏｆ?ｐｌａｓｍｉｄ?ｅｍｐｔｙ?ｖｅｃｔｏｒ?ａｎｄ?ｆｕｌｌ?ｖｅｃｔｏｒ?ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ?ｗｉｔｈ?ＣＣＮＤ１?ｇｅｎｅ．??３＿６．１．２?ＣｙｃｌｉｎＤｌ過表達(dá)細(xì)胞株Ａ５４９－Ｈ６１０２的構(gòu)建??（１）將處于對數(shù)生長期的Ａ５４９細(xì)胞消化后稀釋制備成單細(xì)胞懸液，并接??１８??

圖１－３?ｓｉＲｂＡｐ４８處理肺癌細(xì)胞Ａ５４９?４８小時(shí)后基因的表達(dá)譜

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]CDC25C基因在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義[J]. 張強(qiáng),張仲富,丁宇,周立軍,蔡志明.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(11)
[2]細(xì)胞周期蛋白E1基因表達(dá)上調(diào)與胃癌發(fā)生的關(guān)系[J]. 顧立強(qiáng),常文軍,韓一芳,蔡慧,馬立業(yè),曹廣文.  第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(05)
[3]cyclinD1的研究進(jìn)展[J]. 王前,鄧晶,蔣永新.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2009(02)
[4]細(xì)胞周期調(diào)控與腫瘤[J]. 鄒向陽,李連宏.  國際遺傳學(xué)雜志. 2006(01)
[5]β-catenin和Cyclin D1在肝癌肝內(nèi)轉(zhuǎn)移中的作用[J]. 蘇小康,趙先明,李錦清,崔學(xué)教,謝曉華,楊海燕,徐發(fā)彬,石明.  世界華人消化雜志. 2003(09)

碩士論文
[1]下調(diào)RbAp48表達(dá)對人宮頸癌細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移的抑制作用及其機(jī)制的研究[D]. 鐘晶晶.南方醫(yī)科大學(xué) 2016
[2]下調(diào)RbAp48表達(dá)抑制人消化道腫瘤細(xì)胞的增殖[D]. 楊旭銳.南方醫(yī)科大學(xué) 2015



本文編號：3424127