目的:采用LC-MS/MS法同時測定奧拉帕尼中的2個遺傳毒性雜質(zhì)（雜質(zhì)A和雜質(zhì)ALPN-1）。方法:采用Phenomenon luna C₁₈（33 mm×4.6 mm,3μm）色譜柱;流動相為0.1%甲酸溶液-0.1%甲酸甲醇溶液（40∶60）;質(zhì)譜離子源采用電噴霧離子源（ESI）,正離子多反應(yīng)監(jiān)測模式（MRM）。結(jié)果:雜質(zhì)A和雜質(zhì)ALPN-1分別在1.01²0.20 ng·m L^-1和0.99¹9.80 ng·m L^-1范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系,r>0.999;平均回收率分別為96.29%和100.14%,RSD為4.16%和2.79%（n=9）;樣品溶液在恒溫進(jìn)樣盤中6 h穩(wěn)定。結(jié)論:該方法靈敏度高,專屬性強,準(zhǔn)確度好,可用于奧拉帕尼中遺傳毒性雜質(zhì)的定量檢測,并為奧拉帕尼產(chǎn)品質(zhì)量提供保證。 

【文章來源】：中國新藥雜志. 2016,25(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

ALPN，A和ALPN-1的結(jié)構(gòu)圖

ChineseJournalofNewDrugs2016,25(8)867中國新藥雜志2016年第25卷第8期圖2LC-MS/MS色譜圖(MＲM檢測)2．2質(zhì)譜條件離子源為ESI源，正離子模式，采用MultipleＲeactionMonitoring(MＲM)模式采集二級質(zhì)譜(圖3);離子噴射電壓為4500V;溫度為400℃;源內(nèi)氣體1流速為40psi;氣體2流速為40psi;氣簾氣體壓力為20psi;其他參數(shù)如表1。表1ALPN，A和ALPN-1的質(zhì)譜參數(shù)名稱母離子/子離子時間/msDP/VFP/VEP/VCE/VCXP/VALPN435．3/281．210050350113711雜質(zhì)A285．4/185．5100153006409雜質(zhì)ALPN-1467．3/367．210074004257圖3ALPN、雜質(zhì)A和雜質(zhì)ALPN-1二級全掃描質(zhì)譜圖及離子對3方法學(xué)考察3．1系統(tǒng)適用性在“2．1”項相色譜條件下，AL-PN、雜質(zhì)A和雜質(zhì)ALPN-1的出峰時間分別為0.97，0．58，2．74min，由圖2得知空白以及樣品中其他雜質(zhì)對雜質(zhì)A和雜質(zhì)ALPN-1測定無干擾，2個雜質(zhì)與ALPN之間分離度良好。3．2線性關(guān)系取雜質(zhì)A和雜質(zhì)ALPN-1儲備液適量，用流動相逐級稀釋得到系列溶液。以濃度(X，ng·mL－1)為橫坐標(biāo)，質(zhì)譜的峰面積(Y)為縱坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。雜質(zhì)A的回歸方程為:Y=7403．1X+414．99，r=0．9998，在1．01～20．20ng·mL－1范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系;雜質(zhì)ALPN-1的回歸方程為:Y=403．66X+29．471，r=1．0000，在0．99～19.80ng·mL－1范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。3．3檢測限和定量限雜質(zhì)A和雜質(zhì)ALPN-1的檢測限分別為0．10和0．49ng·mL－1(信噪比S/N為3)，定量限分別為0．26和0．99ng·mL－1(信噪比S/N為10)。3．4進(jìn)樣精密度考察取濃度為5．05和4．95ng·mL－1的雜質(zhì)A和雜質(zhì)ALPN-1溶液，當(dāng)日連續(xù)進(jìn)樣5次，測定峰面積，其ＲSD分別為0．8%和1．9%。3．5回收率精密稱取奧拉帕尼供試品約30mg置于10mL量瓶中，分別?

ChineseJournalofNewDrugs2016,25(8)867中國新藥雜志2016年第25卷第8期圖2LC-MS/MS色譜圖(MＲM檢測)2．2質(zhì)譜條件離子源為ESI源，正離子模式，采用MultipleＲeactionMonitoring(MＲM)模式采集二級質(zhì)譜(圖3);離子噴射電壓為4500V;溫度為400℃;源內(nèi)氣體1流速為40psi;氣體2流速為40psi;氣簾氣體壓力為20psi;其他參數(shù)如表1。表1ALPN，A和ALPN-1的質(zhì)譜參數(shù)名稱母離子/子離子時間/msDP/VFP/VEP/VCE/VCXP/VALPN435．3/281．210050350113711雜質(zhì)A285．4/185．5100153006409雜質(zhì)ALPN-1467．3/367．210074004257圖3ALPN、雜質(zhì)A和雜質(zhì)ALPN-1二級全掃描質(zhì)譜圖及離子對3方法學(xué)考察3．1系統(tǒng)適用性在“2．1”項相色譜條件下，AL-PN、雜質(zhì)A和雜質(zhì)ALPN-1的出峰時間分別為0.97，0．58，2．74min，由圖2得知空白以及樣品中其他雜質(zhì)對雜質(zhì)A和雜質(zhì)ALPN-1測定無干擾，2個雜質(zhì)與ALPN之間分離度良好。3．2線性關(guān)系取雜質(zhì)A和雜質(zhì)ALPN-1儲備液適量，用流動相逐級稀釋得到系列溶液。以濃度(X，ng·mL－1)為橫坐標(biāo)，質(zhì)譜的峰面積(Y)為縱坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。雜質(zhì)A的回歸方程為:Y=7403．1X+414．99，r=0．9998，在1．01～20．20ng·mL－1范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系;雜質(zhì)ALPN-1的回歸方程為:Y=403．66X+29．471，r=1．0000，在0．99～19.80ng·mL－1范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。3．3檢測限和定量限雜質(zhì)A和雜質(zhì)ALPN-1的檢測限分別為0．10和0．49ng·mL－1(信噪比S/N為3)，定量限分別為0．26和0．99ng·mL－1(信噪比S/N為10)。3．4進(jìn)樣精密度考察取濃度為5．05和4．95ng·mL－1的雜質(zhì)A和雜質(zhì)ALPN-1溶液，當(dāng)日連續(xù)進(jìn)樣5次，測定峰面積，其ＲSD分別為0．8%和1．9%。3．5回收率精密稱取奧拉帕尼供試品約30mg置于10mL量瓶中，分別?


本文編號：3409029