目的研究異丙酚對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的肺泡巨噬細(xì)胞的免疫應(yīng)答影響及相關(guān)機(jī)制進(jìn)行初步探討。方法分離大鼠原代肺泡巨噬細(xì)胞（AMs）,并將細(xì)胞分為4組:對(duì)照組（control組:常規(guī)培養(yǎng)AMs）,脂多糖組（LPS組:加入終質(zhì)量濃度為1 000 ng/L脂多糖）,異丙酚組（P組:加入終濃度為25μmol/L異丙酚）,脂多糖+異丙酚組（LPS+P組:加終質(zhì)量濃度為1 000 ng/L的LPS和25μmol/L異丙酚）。4組細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)24 h后,應(yīng)用ELISA檢測(cè)4組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IL-1β、IL-10、TNF-α的含量;細(xì)胞流式實(shí)驗(yàn)檢測(cè)4組細(xì)胞表面F4/80、CD16/32、CD206分子表型所占比例;免疫磁珠分選F4/80+細(xì)胞,并利用RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞中iNOS、CD206的mRNA表達(dá)變化;最后應(yīng)用RT-PCR及Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)4組細(xì)胞中NLRP3/IL-1β信號(hào)通路中NLRP3、IL-1β及Caspase-1的mRNA及蛋白表達(dá)變化。結(jié)果 ELISA實(shí)驗(yàn)顯示,異丙酚能夠明顯抑制LPS所誘導(dǎo)的AMs對(duì)促炎因子IL-1β、TNF-α的分泌,且促進(jìn)細(xì)胞對(duì)抑炎因子IL-10的分泌;細(xì)... 

【文章來源】：免疫學(xué)雜志. 2020,36(07)北大核心CSCD

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異丙酚抑制LPS誘導(dǎo)的AMs對(duì)促炎因子IL-1β、TNF-α的分泌并促進(jìn)細(xì)胞對(duì)抑炎因子IL-10的分泌

圖1 異丙酚抑制LPS誘導(dǎo)的AMs對(duì)促炎因子IL-1β、TNF-α的分泌并促進(jìn)細(xì)胞對(duì)抑炎因子IL-10的分泌2.3 異丙酚抑制LPS誘導(dǎo)的AMs中NLRP3/IL-1 β信號(hào)通路的表達(dá)

應(yīng)用RT-PCR及Western blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)異丙酚對(duì)LPS誘導(dǎo)的AMs中NLRP3/IL-1β信號(hào)通路的mRNA及蛋白表達(dá)影響。RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示與control組相比，LPS組炎癥小體NLRP3、IL-1β及Caspase-1的mRNA表達(dá)均顯著增加（P<0.01),LPS+P組、P組細(xì)胞中三者mRNA表達(dá)均無明顯變化（P>0.05），與LPS組相比，LPS+P組AMs中NLRP3、IL-1β及Caspase-1的mRNA表達(dá)明顯降低（P<0.05），見圖3a;Westernblot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示與control組相比，LPS組炎癥小體NLRP3、IL-1β及Caspase-1的蛋白表達(dá)均顯著增加（P<0.01),LPS+P組、P組細(xì)胞中三者蛋白表達(dá)均無明顯變化（P>0.05），與LPS組相比，LPS+P組AMs中NLRP3、IL-1β及Caspase-1的蛋白表達(dá)均明顯降低（P<0.05），見圖3b。3 討論


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