癌癥是一種基因病,是嚴(yán)重威脅人類安全的一類惡性疾病。癌癥是惡性的腫瘤的一種,目前臨床上對惡性腫瘤的治療手段仍是以藥物治療為主。本文簡述了納米抗體（nanobody）的結(jié)構(gòu)功能特性,描述了具有主動靶向功能的納米抗體-藥物偶聯(lián)物以及主動靶向的納米診療體系的設(shè)計與功能驗證。對nanobody目前的研究現(xiàn)狀,包括產(chǎn)生、結(jié)構(gòu)特點、應(yīng)用優(yōu)勢等進(jìn)行了綜述。本文描述了兩種基于nanobody的靶向藥物運(yùn)輸體系,在借助nanobody的靶向性的同時,進(jìn)一步發(fā)揮其易于修飾,穩(wěn)定性高,滲透性高的特點。文中創(chuàng)新性地采用廉價易得,高效溫和的TG酶對nanobody進(jìn)行定點PEG化,將PEG化和藥物偶聯(lián)結(jié)合,更好地發(fā)揮抗體靶向藥物體系腫瘤抑制的功效。本文涉及的實驗工作主要包括兩個章節(jié):第二章:對nanobody進(jìn)行分子克隆改造,在其C-terminal加入可修飾標(biāo)簽。設(shè)計制備nanobody-Pt（IV）偶聯(lián)體系,為了增加體系的穩(wěn)定性,對nanobody進(jìn)行了 PEG化。由于nanobody的分子量較小,PEG化后仍易被機(jī)體清除。通過固相合成技術(shù),合成帶有PEG鏈的樹枝狀聚賴氨酸（PEG-DPK）作為底物,制備了... 

【文章來源】：中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
引言
第1章 緒論
    1.1 納米抗體的特性與優(yōu)勢
        1.1.1 納米抗體的發(fā)現(xiàn)與制備
        1.1.2 納米抗體的結(jié)構(gòu)特點
        1.1.3 納米抗體與單克隆抗體性質(zhì)的比較
    1.2 納米抗體的應(yīng)用
        1.2.1 納米抗體藥物偶聯(lián)物
        1.2.2 納米抗體修飾的納米藥物運(yùn)輸體系
        1.2.3 納米抗體藥物
        1.2.4 納米抗體與免疫治療
        1.2.5 納米抗體在腫瘤診斷中的應(yīng)用
        1.2.6 納米抗體在其他領(lǐng)域的應(yīng)用
    1.3 抗體的PEG化修飾
第2章 納米抗體-鉑偶聯(lián)體系用于腫瘤靶向治療
    2.1 前言
    2.2 實驗材料
        2.2.1 主要實驗試劑
    2.3 實驗方法
        2.3.1 納米抗體的改造與表達(dá)、純化
        2.3.2 樹枝狀聚賴氨酸的合成及PEG修飾
        2.3.3 納米抗體的PEG化及提純
        2.3.4 馬來酰亞胺基鉑的合成表征
        2.3.5 納米抗體鉑的制備與表征
        2.3.6 納米抗體鉑的穩(wěn)定性驗證
        2.3.7 納米抗體鉑與DNA的反應(yīng)
        2.3.8 納米抗體鉑的細(xì)胞結(jié)合和內(nèi)在化
        2.3.9 納米抗體鉑的多細(xì)胞球滲透性
        2.3.10 納米抗體鉑的細(xì)胞攝取
        2.3.11 納米抗體鉑的細(xì)胞毒性測定
        2.3.12 納米抗體鉑的藥代動力學(xué)研究
        2.3.13 納米抗體鉑的組織分布
        2.3.14 納米抗體鉑的組織滲透
        2.3.15 腫瘤的生長抑制
        2.3.16 免疫組化分析
        2.3.17 治療后Western blot分析
    2.4 實驗結(jié)果與分析
        2.4.1 納米抗體鉑的制備與表征
        2.4.2 納米抗體鉑的體外穩(wěn)定性
        2.4.3 納米抗體鉑與DNA的結(jié)合
        2.4.4 納米抗體鉑的特異性結(jié)合與內(nèi)在化
        2.4.5 納米抗體鉑的體外穿透性驗證
        2.4.6 納米抗體鉑的細(xì)胞攝取與細(xì)胞毒性
        2.4.7 納米抗體鉑的藥代動力學(xué)研究
        2.4.8 納米抗體鉑的腫瘤組織滲透性
        2.4.9 納米抗體鉑的腫瘤抑制效果
        2.4.10 納米抗體鉑的系統(tǒng)毒性
        2.4.11 納米抗體鉑對腫瘤EGFR水平干擾
        2.4.12 納米抗體鉑在小鼠主要器官中的積累
    2.5 本章小結(jié)
第3章 納米抗體修飾的上轉(zhuǎn)換熒光診療體系
    3.1 前言
    3.2 實驗材料
        3.2.1 主要試劑及材料
        3.2.2 細(xì)胞株
    3.3 實驗方法
        3.3.1 上轉(zhuǎn)換顆粒的合成制備
        3.3.2 HSA包裹上轉(zhuǎn)換顆粒的制備
        3.3.3 Nb_((PEG))/DOX/H SA-UCNPs的制備
        3.3.4 Nb_((PEG))/DOX/HSA-UCNPs形貌表征與粒徑分布
        3.3.5 Nb_((PEG))/DOX/HSA-UCNPs對阿霉素的負(fù)載及釋放
        3.3.6 Nb_((PEG))/DOX/HSA-UCNPs特異性細(xì)胞攝取
        3.3.7 Nb_((PEG))/DOX/HSA-UCNPs的上轉(zhuǎn)換熒光檢測
        3.3.8 細(xì)胞毒性檢測
    3.4 實驗結(jié)果及討論
        3.4.1 Nb_((PEG))/DOX/HSA-UCNPs的制備與表征
        3.4.2 Nb_((PEG))/DOX/HSA-UCNPs的上轉(zhuǎn)換熒光檢測
        3.4.3 Nb_((PEG))/DOX/HSA-UCNPs的藥物釋放
        3.4.4 Nb_((PEG))/DOX/HSA-UCNPs顆粒的體外穩(wěn)定性
        3.4.5 Nb_((PEG))/DOX/HSA-UCNPs的細(xì)胞選擇性攝取
        3.4.6 Nb_((PEG))/DOX/HSA-UCNPs的細(xì)胞毒性
    3.5 本章小結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與取得的其他研究成果



本文編號：3372272