目的研究抑制黏著斑激酶（FAK）-蛋白激酶B（Akt）信號通路活化在減輕中心靜脈導(dǎo)管（CVC）聯(lián)合5-氟脲嘧啶（5-FU）誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化性損傷中的作用及其機(jī)制。方法將EA.hy926細(xì)胞隨機(jī)分為3組:正常組、模型組和實(shí)驗(yàn)組,每組3個(gè)時(shí)間點(diǎn):24,48,72 h,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)8個(gè)復(fù)孔。模型組（CVCs+劃痕+5-FU）,細(xì)胞劃痕后,放入截好的CVC節(jié)段3個(gè),再加入5-FU(40μg·mL^-1),建立EA.hy926細(xì)胞氧化損傷模型;實(shí)驗(yàn)組在模型組基礎(chǔ)上加入FAK抑制劑(Y15,50μmol·L^-1)。以噻唑藍(lán)比色法檢測各時(shí)間點(diǎn)（24,48,72 h）細(xì)胞活性（OD值）,以2,7-二乙酸二氯熒光素檢測細(xì)胞活性氧（ROS）水平,硝酸還原酶法測定細(xì)胞培養(yǎng)液中一氧化氮（NO）含量,以蛋白質(zhì)印跡法檢測細(xì)胞中p-FAK Tyr 397和p-Akt Ser 473的表達(dá)水平（灰度值）。結(jié)果干預(yù)72 h后,正常組、模型組和實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞存活率分別為（94.80±3.27）%,（50.20±3.96）%和（71.00±2.92）%;這3組的ROS相對水平分別... 

【文章來源】：中國臨床藥理學(xué)雜志. 2020,36(17)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞模型制備、分組與處置
        2.2 用 DCF 法檢測 EA.hy926 細(xì)胞 ROS 水平
        2.3 以硝酸還原酶法測定細(xì)胞培養(yǎng)液中NO 含量
        2.4 用 MTT 比色法檢測細(xì)胞活性[5]
        2.5 以蛋白質(zhì)印跡法檢測細(xì)胞 p-FAK Tyr 397 和 p-Akt Ser 473 蛋白表達(dá)[6]
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    1 Y15對CVC聯(lián)合5-FU誘導(dǎo)的細(xì)胞存活率的影響
    2 Y15對CVC聯(lián)合5-FU誘導(dǎo)的細(xì)胞ROS相對水平的影響
    3 Y15對CVC聯(lián)合5-FU誘導(dǎo)的細(xì)胞中NO含量的影響
    4 Y15對各組細(xì)胞中p-FAK Tyr 397和p-Akt Ser 473水平的影響
討 論


【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]奧美拉唑和5-氟尿嘧啶合用對人胃癌細(xì)胞的抗增殖、遷移作用研究[D]. 董馨文.山東大學(xué) 2016



本文編號：3323291