發(fā)布時(shí)間：2021-08-04 18:16

　　目的:研究羥喜樹(shù)堿（HCPT）對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞能量代謝影響,檢測(cè)HCPT通過(guò)抑制HIF-1α蛋白表達(dá)對(duì)HepG2細(xì)胞能量代謝影響的作用機(jī)制。方法:采取MTT法測(cè)定HCPT對(duì)HepG2細(xì)胞增殖活力的影響;應(yīng)用Annexin V-FITC/PI染色法檢測(cè)HCPT對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡的影響;分光光度法檢測(cè)細(xì)胞Caspase-3活性;測(cè)定各組細(xì)胞葡萄糖攝取量、能量代謝產(chǎn)物乳酸（LD）、三磷酸腺苷（ATP）的量等相關(guān)能量代謝參數(shù)和糖酵解關(guān)鍵酶己糖激酶（HK）、丙酮酸激酶（PK）、乳酸脫氫酶（LDH）的活性;免疫印跡法測(cè)定Bax、Bc1-2、HIF-1α、GLUT-1、LDH蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:HCPT能夠抑制HepG2細(xì)胞的增殖,隨著藥物劑量的增加,細(xì)胞增殖活力下降。與對(duì)照組相比,給藥組的早期凋亡率有所增加,Caspase-3活性逐漸增加。隨著劑量的增加,HCPT能增加Bax的表達(dá),同時(shí),隨著劑量的增加,Bcl-2的表達(dá)降低。HCPT能夠抑制（降低）ATP生成、LD生成和Glu的攝取,具有劑量依賴性;HCPT能夠抑制HK、LDH的活性,具有劑量依賴性,但對(duì)PK的作用不明顯。低劑量、中劑量、... 

【文章來(lái)源】：延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２肝癌發(fā)生的詳細(xì)機(jī)制??

圖３?ＨＩＦ－ｌａ信號(hào)通路??腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)功能受多種轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控，包括ＨＩＦ－ｌａ轉(zhuǎn)錄因??子，其已被廣泛報(bào)道為在癌細(xì)胞中過(guò)度表達(dá)，并普遍作為癌基因發(fā)揮作??用［５１＿５３］。以往的研究報(bào)道中，ＨＩＦ－ｌｃｔ通過(guò)與ｌｎｃＲＮＡ結(jié)合調(diào)節(jié)糖代謝，從??－６－??

臨床應(yīng)用己得到證實(shí)。ＣＰＴ最早于１９６６年由美國(guó)科學(xué)家Ｍｏｎｏｒｅ?Ｅ．Ｗａｌｌ的??研究團(tuán)隊(duì)％］從喜樹(shù)皮（莖）等部位中發(fā)現(xiàn)并分離提取一種細(xì)胞毒素天然??生物堿，具有顯著的生物活性［８８］，分子式為Ｃ２Ｃ）Ｈ，６Ｎ２〇４（結(jié)構(gòu)式為圖４），??其相對(duì)分子質(zhì)量為３４８．３５，熔點(diǎn)為２６４？２６７°Ｃ，是一種淡黃色針狀結(jié)晶。??在臨床前研宄過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)ＣＰＴ穩(wěn)定性和溶解性差以及不可預(yù)測(cè)的藥物??之間相互作用和不良反應(yīng)等，這些問(wèn)題阻滯了ＣＰＴ研宄的發(fā)展。雖然當(dāng)??時(shí)ＣＰＴ的作用機(jī)制尚不清楚，但它己被＿國(guó)食品和藥物管理局（ＦＤＡ）批準(zhǔn)??用于結(jié)腸癌的初步臨床試驗(yàn)，并通過(guò)臨床試驗(yàn)成為治療癌癥的一種藥物??。雖然ＣＰＴ在胃腸道腫瘤患者中顯示出較強(qiáng)的抗腫瘤活性，但也會(huì)引??起嚴(yán)重且不可預(yù)測(cè)的副作用，如骨髓抑制、嘔吐、腹瀉、嚴(yán)重出血性囊??性疾病等導(dǎo)致了！１９７２年第二階段試驗(yàn)的中止［９（）］。２０世紀(jì)８０年代晚期

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]化濁解毒軟堅(jiān)方對(duì)H22肝癌荷瘤小鼠腫瘤組織中IL-6和STAT3蛋白表達(dá)的影響[J]. 魏美美,毛啟遠(yuǎn),宋夢(mèng)蝶,李曉寧,毛宇湘.  中醫(yī)雜志. 2019(09)
[2]Update on hepatocellular carcinoma: Pathologists’ review[J]. Tony El Jabbour,Stephen M Lagana,Hwajeong Lee.  World Journal of Gastroenterology. 2019(14)
[3]HBx過(guò)表達(dá)對(duì)肝癌HepG2細(xì)胞AKT、PI3K表達(dá)的影響[J]. 張斌,丁慎華,徐春江,許智玲,朱薇珊.  胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志. 2019(02)
[4]黃芪多糖通過(guò)Wnt/β-catenin信號(hào)通路促進(jìn)肝癌細(xì)胞凋亡研究[J]. 呂君,朱鵬飛,劉艷民,曾慶磊,余祖江.  中草藥. 2018(21)
[5]AMPK信號(hào)通路在肝癌中的研究進(jìn)展[J]. 景學(xué)芬,王翠峰,文榮.  中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新. 2018(20)
[6]奧沙利鉑聯(lián)合羥基喜樹(shù)堿治療晚期胃癌臨床分析[J]. 洪光錦.  海峽藥學(xué). 2018(02)
[7]PD-1信號(hào)通路在原發(fā)性肝癌中的研究進(jìn)展[J]. 林志宇,謝勇久,熊飛,賀慶.  西部醫(yī)學(xué). 2017(09)
[8]羥基喜樹(shù)堿臨床抗腫瘤作用研究進(jìn)展[J]. 侯建成,劉洋,魏雪苗,趙容,張巍.  吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào). 2017(04)
[9]羥基喜樹(shù)堿聯(lián)合5-氟尿嘧啶于膀胱癌化療中的療效及安全性研究[J]. 駱莉萍,吳振啟.  實(shí)用腫瘤學(xué)雜志. 2016(04)
[10]喜樹(shù)堿類藥物的研究與開(kāi)發(fā)[J]. 陳夢(mèng)涵,楊鳴華,孔令義.  世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2016(05)

博士論文
[1]黃酮類化合物與羥基喜樹(shù)堿的聯(lián)合抗癌作用及機(jī)理研究[D]. 唐琴.大連理工大學(xué) 2017
[2]聯(lián)合用藥在肺癌抗血管治療中的療效及毒副作用分析[D]. 牛牛.北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所 2013



本文編號(hào)：3322173