目的:研究羥喜樹堿（HCPT）對人肝癌HepG2細胞能量代謝影響,檢測HCPT通過抑制HIF-1α蛋白表達對HepG2細胞能量代謝影響的作用機制。方法:采取MTT法測定HCPT對HepG2細胞增殖活力的影響;應用Annexin V-FITC/PI染色法檢測HCPT對HepG2細胞凋亡的影響;分光光度法檢測細胞Caspase-3活性;測定各組細胞葡萄糖攝取量、能量代謝產物乳酸（LD）、三磷酸腺苷（ATP）的量等相關能量代謝參數和糖酵解關鍵酶己糖激酶（HK）、丙酮酸激酶（PK）、乳酸脫氫酶（LDH）的活性;免疫印跡法測定Bax、Bc1-2、HIF-1α、GLUT-1、LDH蛋白表達水平。結果:HCPT能夠抑制HepG2細胞的增殖,隨著藥物劑量的增加,細胞增殖活力下降。與對照組相比,給藥組的早期凋亡率有所增加,Caspase-3活性逐漸增加。隨著劑量的增加,HCPT能增加Bax的表達,同時,隨著劑量的增加,Bcl-2的表達降低。HCPT能夠抑制（降低）ATP生成、LD生成和Glu的攝取,具有劑量依賴性;HCPT能夠抑制HK、LDH的活性,具有劑量依賴性,但對PK的作用不明顯。低劑量、中劑量、... 

【文章來源】：延邊大學吉林省 211工程院校

【文章頁數】：70 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２肝癌發(fā)生的詳細機制??

圖３?ＨＩＦ－ｌａ信號通路??腫瘤細胞的生物學功能受多種轉錄因子的調控，包括ＨＩＦ－ｌａ轉錄因??子，其已被廣泛報道為在癌細胞中過度表達，并普遍作為癌基因發(fā)揮作??用［５１＿５３］。以往的研究報道中，ＨＩＦ－ｌｃｔ通過與ｌｎｃＲＮＡ結合調節(jié)糖代謝，從??－６－??

臨床應用己得到證實。ＣＰＴ最早于１９６６年由美國科學家Ｍｏｎｏｒｅ?Ｅ．Ｗａｌｌ的??研究團隊％］從喜樹皮（莖）等部位中發(fā)現并分離提取一種細胞毒素天然??生物堿，具有顯著的生物活性［８８］，分子式為Ｃ２Ｃ）Ｈ，６Ｎ２〇４（結構式為圖４），??其相對分子質量為３４８．３５，熔點為２６４？２６７°Ｃ，是一種淡黃色針狀結晶。??在臨床前研宄過程中，發(fā)現ＣＰＴ穩(wěn)定性和溶解性差以及不可預測的藥物??之間相互作用和不良反應等，這些問題阻滯了ＣＰＴ研宄的發(fā)展。雖然當??時ＣＰＴ的作用機制尚不清楚，但它己被＿國食品和藥物管理局（ＦＤＡ）批準??用于結腸癌的初步臨床試驗，并通過臨床試驗成為治療癌癥的一種藥物??。雖然ＣＰＴ在胃腸道腫瘤患者中顯示出較強的抗腫瘤活性，但也會引??起嚴重且不可預測的副作用，如骨髓抑制、嘔吐、腹瀉、嚴重出血性囊??性疾病等導致了�。保梗罚材甑诙A段試驗的中止［９（）］。２０世紀８０年代晚期

【參考文獻】：
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博士論文
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本文編號：3322173