蓖麻毒素是從蓖麻籽中提取的劇毒蛋白質(zhì),是一種異源二聚體糖蛋白,含有A、B兩條鏈,通過一個(gè)二硫鍵連接。其中,A鏈（RTA）是毒性鏈,通過不可逆地使真核細(xì)胞的核糖體失活而抑制蛋白質(zhì)的合成;B鏈（RTB）是凝集素,能夠結(jié)合細(xì)胞膜表面含有半乳糖基的受體,促進(jìn)蓖麻毒素進(jìn)入細(xì)胞。蓖麻毒素毒性極強(qiáng),至少是有機(jī)磷神經(jīng)毒素的380倍,是氰化物的6000倍。蓖麻毒素在臨床上具有廣譜的抗腫瘤活性,然而由于B鏈對(duì)細(xì)胞膜上受體的識(shí)別是非特異性的,限制了其在靶向抗腫瘤上的應(yīng)用。因此如何既能保留蓖麻毒素對(duì)腫瘤細(xì)胞的毒性,又能降低其毒副作用便成為研究的熱點(diǎn)。此外,由于其毒性強(qiáng)、制備簡(jiǎn)單的特點(diǎn),已被美國(guó)疾病控制中心（CDC）列為最有可能用于恐怖襲擊的生物戰(zhàn)劑之一。因此,對(duì)其進(jìn)行靈敏的分析檢測(cè)無論是在應(yīng)對(duì)恐怖襲擊還是在預(yù)防中毒方面都具有非常重要的意義。鑒于此,本論文設(shè)計(jì)了基于氧化石墨烯的等溫鏈替換聚合酶反應(yīng)的方法用于蓖麻毒素的檢測(cè);同時(shí)結(jié)合具有靶向高爾基體能力的碳點(diǎn),核仁素核酸適配體以及光敏劑構(gòu)建基于蓖麻毒素的多功能腫瘤細(xì)胞靶向治療體系。具體研究?jī)?nèi)容包括以下兩個(gè)方面:（1）設(shè)計(jì)了一種簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、靈敏的基于氧化石墨烯的等溫... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

蓖麻毒素脫嘌呤的發(fā)光分析檢測(cè)[25]

西南大學(xué)碩士學(xué)位論文的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，有色產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺來進(jìn)行定性或定量分析。由于酶催化的高效性，可使測(cè)定方法具有很高的靈敏度。但是目前商用的蓖麻毒素檢測(cè)試劑盒僅用于環(huán)境樣品的測(cè)定，而 Weng 等[13]開發(fā)了一種 ELISA 法，不僅可以實(shí)現(xiàn)對(duì)環(huán)境樣品的檢測(cè)，還可以實(shí)現(xiàn)對(duì)生物中毒 4 小時(shí)到 5 天后的糞便樣品的靈敏檢測(cè)，為臨床醫(yī)師快速診斷和排除蓖麻毒素中毒案例提供了可能。免疫聚合酶鏈反應(yīng)，即以 PCR 為基礎(chǔ)，以抗體作為靶物的識(shí)別單元而建立的檢測(cè)方法[30, 31]。如圖 1-3 所示，Zhang 等[31]利用能識(shí)別并結(jié)合蓖麻毒素的多克隆抗體功能化的磁珠探針去捕獲靶物，再用蓖麻毒素 A 鏈的抗體和信號(hào) DNA 修飾的金納米粒子探針去識(shí)別靶物構(gòu)建三明治結(jié)構(gòu)，磁分洗滌后，通過 DNA 去雜交技術(shù)得到大量的信號(hào) DNA，最后利用 PCR 技術(shù)對(duì) DNA 進(jìn)行擴(kuò)增，通過檢測(cè) DNA 的含量實(shí)現(xiàn)對(duì)蓖麻毒素的檢測(cè)。

還可以實(shí)現(xiàn)對(duì)生物中毒 4 小時(shí)到 5 天后的糞便樣品的靈敏檢測(cè)，為臨速診斷和排除蓖麻毒素中毒案例提供了可能。免疫聚合酶鏈反應(yīng)，即以 PCR 為基礎(chǔ)，以抗體作為靶物的識(shí)別單元而建方法[30, 31]。如圖 1-3 所示，Zhang 等[31]利用能識(shí)別并結(jié)合蓖麻毒素的多功能化的磁珠探針去捕獲靶物，再用蓖麻毒素 A 鏈的抗體和信號(hào) DNA 修米粒子探針去識(shí)別靶物構(gòu)建三明治結(jié)構(gòu)，磁分洗滌后，通過 DNA 去雜交大量的信號(hào) DNA，最后利用 PCR 技術(shù)對(duì) DNA 進(jìn)行擴(kuò)增，通過檢測(cè) DN實(shí)現(xiàn)對(duì)蓖麻毒素的檢測(cè)。圖 1-3 基于納米粒子的聚合酶鏈反應(yīng)測(cè)定蓖麻毒素原理[31]igure 1-3. A nanoparticle-based bio-barcode polymerase chain reaction assay for ultrasensidetection of ricin toxin

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法檢測(cè)不同樣品中的蓖麻毒素[J]. 郎立偉,王玉霞,王晨宇,趙宇,賈培媛,傅風(fēng)華.  國(guó)際藥學(xué)研究雜志. 2009(01)
[2]雙抗體夾心酶聯(lián)免疫檢測(cè)法測(cè)定蓖麻毒素[J]. 楊運(yùn)云,牟德海,童朝陽,穆唏惠,郝蘭群.  分析化學(xué). 2007(03)



本文編號(hào)：3315484