發(fā)布時間：2021-08-01 11:58

　　蓖麻毒素是從蓖麻籽中提取的劇毒蛋白質(zhì),是一種異源二聚體糖蛋白,含有A、B兩條鏈,通過一個二硫鍵連接。其中,A鏈（RTA）是毒性鏈,通過不可逆地使真核細胞的核糖體失活而抑制蛋白質(zhì)的合成;B鏈（RTB）是凝集素,能夠結(jié)合細胞膜表面含有半乳糖基的受體,促進蓖麻毒素進入細胞。蓖麻毒素毒性極強,至少是有機磷神經(jīng)毒素的380倍,是氰化物的6000倍。蓖麻毒素在臨床上具有廣譜的抗腫瘤活性,然而由于B鏈對細胞膜上受體的識別是非特異性的,限制了其在靶向抗腫瘤上的應用。因此如何既能保留蓖麻毒素對腫瘤細胞的毒性,又能降低其毒副作用便成為研究的熱點。此外,由于其毒性強、制備簡單的特點,已被美國疾病控制中心（CDC）列為最有可能用于恐怖襲擊的生物戰(zhàn)劑之一。因此,對其進行靈敏的分析檢測無論是在應對恐怖襲擊還是在預防中毒方面都具有非常重要的意義。鑒于此,本論文設(shè)計了基于氧化石墨烯的等溫鏈替換聚合酶反應的方法用于蓖麻毒素的檢測;同時結(jié)合具有靶向高爾基體能力的碳點,核仁素核酸適配體以及光敏劑構(gòu)建基于蓖麻毒素的多功能腫瘤細胞靶向治療體系。具體研究內(nèi)容包括以下兩個方面:（1）設(shè)計了一種簡單、準確、靈敏的基于氧化石墨烯的等溫... 

【文章來源】：西南大學重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

蓖麻毒素脫嘌呤的發(fā)光分析檢測[25]

西南大學碩士學位論文的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，有色產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應的深淺來進行定性或定量分析。由于酶催化的高效性，可使測定方法具有很高的靈敏度。但是目前商用的蓖麻毒素檢測試劑盒僅用于環(huán)境樣品的測定，而 Weng 等[13]開發(fā)了一種 ELISA 法，不僅可以實現(xiàn)對環(huán)境樣品的檢測，還可以實現(xiàn)對生物中毒 4 小時到 5 天后的糞便樣品的靈敏檢測，為臨床醫(yī)師快速診斷和排除蓖麻毒素中毒案例提供了可能。免疫聚合酶鏈反應，即以 PCR 為基礎(chǔ)，以抗體作為靶物的識別單元而建立的檢測方法[30, 31]。如圖 1-3 所示，Zhang 等[31]利用能識別并結(jié)合蓖麻毒素的多克隆抗體功能化的磁珠探針去捕獲靶物，再用蓖麻毒素 A 鏈的抗體和信號 DNA 修飾的金納米粒子探針去識別靶物構(gòu)建三明治結(jié)構(gòu)，磁分洗滌后，通過 DNA 去雜交技術(shù)得到大量的信號 DNA，最后利用 PCR 技術(shù)對 DNA 進行擴增，通過檢測 DNA 的含量實現(xiàn)對蓖麻毒素的檢測。

還可以實現(xiàn)對生物中毒 4 小時到 5 天后的糞便樣品的靈敏檢測，為臨速診斷和排除蓖麻毒素中毒案例提供了可能。免疫聚合酶鏈反應，即以 PCR 為基礎(chǔ)，以抗體作為靶物的識別單元而建方法[30, 31]。如圖 1-3 所示，Zhang 等[31]利用能識別并結(jié)合蓖麻毒素的多功能化的磁珠探針去捕獲靶物，再用蓖麻毒素 A 鏈的抗體和信號 DNA 修米粒子探針去識別靶物構(gòu)建三明治結(jié)構(gòu)，磁分洗滌后，通過 DNA 去雜交大量的信號 DNA，最后利用 PCR 技術(shù)對 DNA 進行擴增，通過檢測 DN實現(xiàn)對蓖麻毒素的檢測。圖 1-3 基于納米粒子的聚合酶鏈反應測定蓖麻毒素原理[31]igure 1-3. A nanoparticle-based bio-barcode polymerase chain reaction assay for ultrasensidetection of ricin toxin

【參考文獻】：
期刊論文
[1]雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法檢測不同樣品中的蓖麻毒素[J]. 郎立偉,王玉霞,王晨宇,趙宇,賈培媛,傅風華.  國際藥學研究雜志. 2009(01)
[2]雙抗體夾心酶聯(lián)免疫檢測法測定蓖麻毒素[J]. 楊運云,牟德海,童朝陽,穆唏惠,郝蘭群.  分析化學. 2007(03)



本文編號：3315484