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流行性乙型腦炎病毒的高內(nèi)涵抗病毒藥物篩選

發(fā)布時(shí)間:2021-06-14 03:44
  流行性乙型腦炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是蟲媒病毒的重要成員,屬于黃病毒科(Flaviviridae)黃病毒屬(Flavivirus),是流行性乙型腦炎的致病原。JEV主要流行于亞洲太平洋地區(qū),影響人口高達(dá)30億。雖然疫苗的使用大大降低了流行性乙型腦炎的發(fā)病率,全球每年仍有67000例乙型腦炎發(fā)生。該病致死率高達(dá)30%,且多數(shù)幸存者會(huì)伴隨有嚴(yán)重的神經(jīng)性疾病,對(duì)人們的生命及健康造成了重大的威脅。目前而言,臨床上仍然沒有能夠治療該病癥的藥物及特殊的治療方法。因此對(duì)于抗病毒藥物的篩選及研發(fā)顯得尤為重要。報(bào)告病毒是指帶有報(bào)告基因標(biāo)記的病毒粒子,通過報(bào)告基因的表達(dá)來反映病毒在機(jī)體內(nèi)的復(fù)制及擴(kuò)散情況。報(bào)告病毒具有完整的感染性病毒粒子,與野生型病毒具有相似的理化性質(zhì),因此可用于篩選針對(duì)病毒整個(gè)生命周期的抗病毒藥物。病毒的生長(zhǎng)情況可以通過檢測(cè)報(bào)告基因的表達(dá)水平而反映,因此與傳統(tǒng)的方法相比更加方便、快捷。此外報(bào)告病毒還可用于活體成像觀察病毒在小鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)及擴(kuò)散情況,對(duì)于研究病毒的致病機(jī)制、藥物的評(píng)價(jià)等方面具有重要的作用。本研究中,我們通過融合PCR的方法將e... 

【文章來源】:中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院武漢病毒研究所)湖北省

【文章頁數(shù)】:80 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 JEV病毒的生物學(xué)特性
        1.1.1 JEV病毒的分類
        1.1.2 JEV病毒的流行現(xiàn)狀
        1.1.3 JEV病毒的傳播循環(huán)
        1.1.4 JEV病毒引起的癥狀
        1.1.5 JEV病毒的顆粒形態(tài)
        1.1.6 JEV病毒的基因型
        1.1.7 JEV的基因組結(jié)構(gòu)
        1.1.8 JEV基因組編碼蛋白質(zhì)和功能
        1.1.9 JEV的生命周期
    1.2 黃病毒的反向遺傳學(xué)系統(tǒng)
        1.2.1 全長(zhǎng)感染性克隆
        1.2.2 報(bào)告病毒
    1.3 黃病毒高內(nèi)涵抗病毒藥物篩選近況
        1.3.1 高內(nèi)涵系統(tǒng)簡(jiǎn)介
        1.3.2 靶向病毒蛋白的高內(nèi)涵篩選
        1.3.3 靶向細(xì)胞的高內(nèi)涵篩選
    1.4 本論文的研究?jī)?nèi)容
        1.4.1 課題背景及意義
        1.4.2 課題所要解決的科學(xué)問題
        1.4.3 運(yùn)用的主要方法和思路
        1.4.4 論文結(jié)構(gòu)和基本結(jié)論
第2章 JEV-eGFP報(bào)告病毒的構(gòu)建
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 JEV-eGFP報(bào)告病毒的構(gòu)建
        2.3.2 JEV-eGFP報(bào)告病毒的特性
        2.3.3 JEV-eGFP報(bào)告病毒的穩(wěn)定性
        2.3.4 JEV-eGFP報(bào)告病毒能夠用于抗病毒藥物的篩選
    2.4 討論
第3章 JEV-eGFP高內(nèi)涵抗病毒藥物的篩選
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 高內(nèi)涵篩選條件的優(yōu)化
        3.3.2 藥物篩選濃度及DMSO濃度的確定
        3.3.3 對(duì)篩選條件進(jìn)行評(píng)價(jià)
        3.3.4 JEV-eGFP報(bào)告病毒的FDA藥物庫抗病毒藥物的篩選
        3.3.5 對(duì)篩選出的藥物進(jìn)行評(píng)價(jià)
    3.4 討論
第4章 總結(jié)與展望
    4.1 總結(jié)
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄A 常用縮寫
附錄B 圖表清單
致謝
作者簡(jiǎn)歷及攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果



本文編號(hào):3228996

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