惡性腫瘤是我國(guó)人民生命健康的重要威脅之一,化療是臨床治療惡性腫瘤的主要手段,但化療藥物難以突破體內(nèi)生物學(xué)屏障、毒副作用大、易產(chǎn)生耐藥,療效欠佳。基于上述問(wèn)題,近年來(lái),腫瘤智能藥物遞送系統(tǒng)成為研究的熱點(diǎn),在一定程度上改善了化療藥物的體內(nèi)行為及分布,提高了治療效果。然而目前報(bào)道的基于腫瘤微環(huán)境（pH,GSH等）或微能量（近紅外光,超聲等）的智能藥物遞送系統(tǒng)大多受限于腫瘤的種類、發(fā)展程度、病變部位等,導(dǎo)致響應(yīng)程度有限,不能快速大量釋放藥物,實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的高效殺傷�；谏鲜鰡�(wèn)題,策略性的設(shè)計(jì)并構(gòu)建腫瘤細(xì)胞特異分子標(biāo)簽識(shí)別-觸發(fā)型的智能化藥物遞送系統(tǒng)是亟待解決的問(wèn)題。本課題擬制備一種介孔納米材料,通過(guò)其表面功能化修飾集分子識(shí)別與空間構(gòu)象變化于一體的配體,同時(shí)實(shí)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞分子特異識(shí)別與藥物控釋于一體,使其到達(dá)腫瘤細(xì)胞觸發(fā)藥物釋放激活化療。該藥物遞送系統(tǒng)主要由藥物儲(chǔ)庫(kù)單元、智能識(shí)別及響應(yīng)釋藥單元兩部分組成。介孔二氧化硅納米粒（Mesoporous Silica Nanoparticles,MSNs）因具有高度的生物安全性、簡(jiǎn)單的制備工藝、孔徑可調(diào)、超大比表面積、易于表面進(jìn)一步修飾及擁有超高的藥物荷... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
第一章 前言
第二章 分子標(biāo)簽識(shí)別-觸發(fā)型藥物遞送系統(tǒng)MSNs/DOX-APT的制備與表征
    1 儀器與試劑
        1.1 儀器
        1.2 試劑
    2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
        2.1 DOX含量高效液相色譜(HPLC)測(cè)定方法的建立
            2.1.1 DOX檢測(cè)波長(zhǎng)的確定
            2.1.2 色譜條件
            2.1.3 DOX標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
            2.1.4準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)
            2.1.5精密度實(shí)驗(yàn)
        2.2 MSNs/DOX-APT的制備
            2.2.1 介孔二氧化硅納米粒的制備
            2.2.2 MSNs-Cl的制備
            2.2.3 模板劑CTAB的去除
            2.2.4 MSNs-N_3的制備
            2.2.5 單鏈DNA溶液的配制
            2.2.6 MUC-1發(fā)卡狀A(yù)PT的連接
        2.3 MSNs/DOX-APT的制備
        2.4 MSNs/DOX-APT最佳制備條件的考察
            2.4.1 投料比
            2.4.2 震蕩時(shí)間
            2.4.3 震蕩速度
        2.5 MSNs/DOX-APT載藥率的測(cè)定
        2.6 MSNs/DOX-APT各階段產(chǎn)物的表征
            2.6.1 X射線衍射(XRD)
            2.6.2 傅立葉紅外光譜(FT-IR)
            2.6.3 熒光光譜
            2.6.4 透射電子顯微鏡(TEM)
            2.6.5 粒徑和Zeta電位
            2.6.6 孔徑和比表面積
            2.6.7 水分散性考察
            2.6.8 穩(wěn)定性考察
        2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果與討論
        3.1 阿霉素(DOX)含量測(cè)定
            3.1.1 DOX檢測(cè)波長(zhǎng)的確定
            3.1.2 DOX的標(biāo)準(zhǔn)曲線
            3.1.3 準(zhǔn)確度
            3.1.4 精密度
        3.2 MSNs/DOX-APT的制備過(guò)程
        3.3 MSNs/DOX-APT最佳制備條件的確定
            3.3.1 投料比
            3.3.2 震蕩時(shí)間
            3.3.3 震蕩速度
        3.4 MSNs/DOX-APT的載藥率
        3.5 MSNs/DOX-APT各階段產(chǎn)物的表征結(jié)果
            3.5.1 X射線衍射測(cè)試(XRD)圖
            3.5.2 傅立葉紅外光譜(FT-IR)圖
            3.5.3 熒光光譜圖
            3.5.4 透射電子顯微鏡(TEM)結(jié)果
            3.5.5 粒徑分布及Zeta電位結(jié)果
            3.5.6 孔徑和比表面積的測(cè)試
            3.5.7 水分散性結(jié)果
            3.5.8 MSNs/DOX-APT的穩(wěn)定性結(jié)果
    4 本章小結(jié)
第三章 MSNs/DOX-APT的細(xì)胞水平研究
    1 儀器與試劑
        1.1 儀器
        1.2 試劑
        1.3 主要試劑的配制
    2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
        2.1 細(xì)胞的培養(yǎng)
            2.1.1 細(xì)胞培養(yǎng)的前期準(zhǔn)備
            2.1.2 細(xì)胞復(fù)蘇
            2.1.3 細(xì)胞傳代
            2.1.4 細(xì)胞凍存
        2.2 Western blot實(shí)驗(yàn)
            2.2.1 Western blot樣品準(zhǔn)備
            2.2.2 蛋白樣品的定量
            2.2.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)
            2.2.4 濕法電轉(zhuǎn)印與抗體孵育
            2.2.5 ECL底物發(fā)光
            2.2.6 封閉和孵育內(nèi)參抗體
            2.2.7 ECL底物發(fā)光
            2.2.8 凝膠成像儀檢測(cè)
        2.3 發(fā)卡狀A(yù)PT選擇性識(shí)別及構(gòu)象變化實(shí)驗(yàn)
        2.4 MSNs-APT的細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)
        2.5 DOX在細(xì)胞內(nèi)的釋放實(shí)驗(yàn)
        2.6 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
            2.6.1 CCK-8法測(cè)定細(xì)胞活力的操作步驟
            2.6.2 空白載體對(duì)MCF-7和Hs578bst的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
            2.6.3 制劑對(duì)MCF-7和Hs578bst細(xì)胞活力的影響
    3 結(jié)果與討論
        3.1 Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2 發(fā)卡狀適配體的選擇性識(shí)別及構(gòu)象變化能力
        3.3 MSNs-APT在不同細(xì)胞中的攝取
        3.4 MSNs/DOX-APT在不同細(xì)胞中DOX的釋放
        3.5 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
            3.5.1 空白載體對(duì)MCF-7和Hs578bst細(xì)胞的毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            3.5.2 制劑對(duì)MCF-7和Hs578bst細(xì)胞活力的影響結(jié)果
    4 本章小結(jié)
第四章 MSNs/DOX-APT的動(dòng)物水平研究
    1 儀器與試劑
        1.1 儀器
        1.2 試劑
        1.3 主要試劑的配制
    2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
        2.1 荷瘤裸鼠模型的建立
        2.2 荷瘤裸鼠體內(nèi)腫瘤組織MUC-1蛋白表達(dá)的研究
        2.3 載體MSNs/DOX-APT在裸鼠體內(nèi)組織分布的研究
            2.3.1 MSNs/IR783-APT的制備
            2.3.2 MSNs/IR783-APT在裸鼠體內(nèi)的組織分布
        2.4 MSNs/DOX-ATP在荷瘤裸鼠體內(nèi)選擇性分子識(shí)別激活藥物釋放的考察
        2.5 MSNs/DOX-APT體內(nèi)抗腫瘤活性研究
            2.5.1 實(shí)驗(yàn)分組及數(shù)據(jù)測(cè)定
            2.5.2 蘇木精伊紅(HE)染色病理切片考察
            2.5.3 TUNEL凋亡考察
    3 結(jié)果與討論
        3.1 荷瘤裸鼠體內(nèi)腫瘤組織MUC-1蛋白的表達(dá)
        3.2 MSNs/IR783-APT在裸鼠體內(nèi)的組織分布結(jié)果
        3.3 DOX在裸鼠腫瘤部位的釋放情況
        3.4 體內(nèi)抗腫瘤活性研究
            3.4.1 荷瘤裸鼠腫瘤體積的變化
            3.4.2 荷瘤裸鼠體重的變化
        3.5 HE染色病理切片
        3.6 腫瘤組織HE染色和TUNEL凋亡
    4 本章小結(jié)
第五章 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
致謝



本文編號(hào)：3205574