目的通過建立小鼠幼年鉛暴露時間序列及白藜蘆醇干預(yù)模型,以AMPK/mTOR作為自噬通路研究起點(diǎn),探索生命早期鉛暴露對小鼠腦組織自噬發(fā)展及BACE1、p-Tau蛋白表達(dá)量改變的影響。方法建立小鼠鉛暴露時間序列模型,即4周齡雄性C57BL/6小鼠隨機(jī)分為6組,實驗組以自由飲水方式進(jìn)行0.2%的醋酸鉛溶液染毒3個月后飼養(yǎng)至不同生命節(jié)點(diǎn)（4月齡-4Pb、13月齡-13Pb及16月齡-16Pb）;同齡對照組僅飲用去離子水（4月齡-4C、13月齡-13C及16月齡-16C）。同時,建立小鼠白藜蘆醇（resveratrol,Res）干預(yù)模型,4周齡雄性C57BL/6小鼠飲水染鉛3個月后,進(jìn)行12個月隔天Res灌胃,分為對照組（Cont）,染鉛組（Pb）,染鉛后Res干預(yù)組（PbR）和20Res20組（CR）。對小鼠斷頭后剝離腦組織,分離皮層及海馬區(qū),并進(jìn)行組織蛋白及mRNA提取。采用Western20blotting檢測自噬通路因子中自噬誘導(dǎo)因子（AMPK、mTOR、Rictor、GβL）、自噬體成熟輔助因子（Beclin-1、Atg12、Atg3、Atg7）、自噬降解標(biāo)志因子（LC3-Ⅱ/Ⅰ、p6... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：106 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
1 引言
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 主要試劑與耗材
        2.1.3 主要試劑及其配制
        2.1.4 主要儀器與設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 動物飼養(yǎng)及分組
        2.2.2 小鼠腦組織采集
        2.2.3 Real-time PCR檢測海馬組織中BACE1,AMPK等mRNA表達(dá)水平
        2.2.4 Western blot檢測海馬、皮層組織AMPK,BACE1,p-Tau等的蛋白表達(dá)水平
    2.3 統(tǒng)計學(xué)處理
3 結(jié)果
    3.1 生命早期鉛暴露及白藜蘆醇干預(yù)對小鼠海馬及皮層組織中自噬起始通路關(guān)鍵因子AMPK、mTOR及mTORC2復(fù)合物因子Rictor、GβL相對表達(dá)量的影響
    3.2 生命早期鉛暴露及白藜蘆醇干預(yù)對小鼠海馬及皮層組織中自噬體形成相關(guān)自噬因子Beclin-1,Atg12蛋白及mRNA表達(dá)量的影響以及Atg3,Atg7蛋白表達(dá)量的影響
    3.3 生命早期鉛暴露及白藜蘆醇干預(yù)對小鼠海馬及皮層組織中對自噬體成熟標(biāo)志物L(fēng)C3及自噬底物蛋白p62相對表達(dá)量的調(diào)節(jié)作用
    3.4 生命早期鉛暴露及白藜蘆醇干預(yù)對小鼠海馬及皮層組織中學(xué)習(xí)記憶損傷關(guān)鍵因子p-Tau,BACE1的調(diào)節(jié)作用
4 討論
    4.1 本研究對C57BL/6小鼠各生命節(jié)點(diǎn)的分組依據(jù)
    4.2 生命早期鉛暴露及白藜蘆醇干預(yù)對小鼠腦組織自噬誘導(dǎo)因子AMPK、mTOR及mTORC2復(fù)合物相對表達(dá)量的影響
    4.3 生命早期鉛暴露及白藜蘆醇干預(yù)對小鼠腦組織自噬體成熟相關(guān)因子Beclin-1,Atg12,Atg3,Atg7的調(diào)節(jié)作用
    4.4 生命早期鉛暴露及白藜蘆醇干預(yù)對小鼠海馬及皮層組織中自噬體結(jié)合蛋白LC3及選擇性自噬底物p62的調(diào)節(jié)作用
    4.5 生命早期鉛暴露及白藜蘆醇干預(yù)對小鼠海馬及皮層組織中神經(jīng)退行性病變特異性蛋白BACE1,p-Tau表達(dá)量改變
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 白藜蘆醇對神經(jīng)退行性疾病的保護(hù)作用
    1 背景介紹
    2 白藜蘆醇的體內(nèi)神經(jīng)保護(hù)作用
    3 白藜蘆醇的體外神經(jīng)保護(hù)作用
    4 白藜蘆醇和其他衍生物的生物利用度和臨床療效
    5 展望
    綜述參考文獻(xiàn)
個人簡歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]孕哺期鉛暴露對小鼠腦組織8-羥基脫氧鳥苷和沉默信息調(diào)節(jié)因子1表達(dá)的影響[J]. 屠潤琪,張麗杰,馮得敏,李超杰,方華,馬雪,舒婷婷,崔留欣,黃輝.  環(huán)境與健康雜志. 2016(05)
[2]阿爾茨海默病的發(fā)病機(jī)制及治療藥物研究進(jìn)展[J]. 應(yīng)俠,吳振,雷嚴(yán),王立強(qiáng).  中國藥房. 2014(33)
[3]白藜蘆醇神經(jīng)保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J]. 王禮鵬,高召兵.  生命科學(xué). 2013(06)
[4]活性氧簇及其介導(dǎo)的自噬[J]. 黃雷招,唐德燊.  醫(yī)學(xué)綜述. 2012(19)
[5]Inhibition20of20caspases20and20intracellular20free20Ca2+20concentrations20are20involved20in20resveratrol20protection20against20apoptosis20in20rat20primary20neuron20cultures[J]. Qi-hai GONG~(2,3,4),Qian WANG~(2,3),Jing-shan SHI~(2,3),Xie-nan HUANG~(2,3),Qiong LIU~2,Hu MA~2~2 Department of Pharmacology,Zunyi Medical College,Zunyi 563000,China;~3 the Key Laboratory of Basic Pharmacology of GuizhouProvince,Zunyi Medical College,Zunyi 563000,China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2007(11)
[6]學(xué)習(xí)記憶相關(guān)腦區(qū)[J]. 劉永紅,柏林.  第一軍醫(yī)大學(xué)分校學(xué)報. 2003(02)

碩士論文
[1]白藜蘆醇對鉛致發(fā)育期小鼠學(xué)習(xí)記憶損傷的保護(hù)作用[D]. 屠潤琪.鄭州大學(xué) 2017
[2]自噬相關(guān)基因Beclin-1、ATG7、ATG3、LC3在腦缺血再灌注大鼠腦組織的表達(dá)[D]. 閔鶴鳴.錦州醫(yī)科大學(xué) 2017



本文編號：3178991