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西地那非對(duì)大鼠先天性膈疝模型胎肺發(fā)育的影響及其作用機(jī)制的探討

發(fā)布時(shí)間:2021-05-08 05:46
  本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖峭ㄟ^(guò)研究HIF-2α、VEGF-A在先天性膈疝大鼠動(dòng)物模型胎肺中表達(dá)的變化,探討產(chǎn)前西地那非干預(yù)對(duì)先天性膈疝大鼠動(dòng)物模型胎肺肺血管、肺泡等發(fā)育的影響及其可能的作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)首先將雌雄SD大鼠按2:1定時(shí)成功配種后得到10只孕鼠,孕9.5 d將孕鼠隨機(jī)分為4組:正?瞻捉M(Normal+Control group,NC組,2只)、正常西地那非組(Normal+Sildenafil group,NS組,2只)僅給予橄欖油灌胃,模型空白組(Model+Control group,MC組,3只)、模型西地那非組(Model+Sildenafil group,MS組,3只)灌胃給予除草醚(125mg/只,溶于2ml橄欖油中)誘導(dǎo)產(chǎn)生CDH模型。孕11.5 d-20.5 d NS、MS兩組孕鼠每天灌胃給予西地那非(30mg/kg,溶于10ml/kg蒸餾水中),其余各組每天給予等量蒸餾水,孕21 d(預(yù)產(chǎn)期前24h)在戊巴比妥鈉麻醉下剖宮產(chǎn)取出所有胎鼠并稱(chēng)重,放大鏡下觀察膈疝形成情況并取出兩側(cè)肺組織并稱(chēng)重,肺組織切片HE染色觀察各組肺微、小血管、細(xì)小支氣管、肺泡的發(fā)育情況,免疫組織化學(xué)染... 

【文章來(lái)源】:電子科技大學(xué)四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 研究背景與意義
    1.2 國(guó)內(nèi)外研究歷史與現(xiàn)狀
        1.2.1 CDH實(shí)驗(yàn)研究動(dòng)物模型
        1.2.2 CDH產(chǎn)前藥物干預(yù)的研究
        1.2.3 CDH肺發(fā)育不良機(jī)制的研究
    1.3 本文的主要工作
    1.4 本論文的結(jié)構(gòu)安排
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2.2 試劑和藥品
    2.3 設(shè)備與儀器
    2.4 動(dòng)物模型建立及分組
    2.5 飼養(yǎng)與干預(yù)
    2.6 肺組織標(biāo)本采集
    2.7 肺組織切片HE染色及形態(tài)學(xué)觀察
    2.8 免疫組織化學(xué)染色
    2.9 蛋白免疫印記實(shí)驗(yàn)(WESTERN BLOTTING)
    2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第三章 結(jié)果
    3.1 胎鼠膈疝動(dòng)物模型的誘導(dǎo)情況
    3.2 胎鼠肺重與體重之比
    3.3 肺泡及細(xì)小支氣管形態(tài)學(xué)指標(biāo)觀察
    3.4 胎肺微、小血管形態(tài)學(xué)指標(biāo)觀察
    3.5 免疫組化染色結(jié)果
        3.5.1 缺氧誘導(dǎo)因子-2α(HIF-2α)
        3.5.2 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子-A(VEGF-A)
    3.6 免疫組化染色陽(yáng)性表達(dá)相關(guān)性分析
    3.7 WESTERN-BLOTTING定量檢測(cè)HIF-2α、VEGF-A的表達(dá)情況
第四章 討論
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 本文的主要結(jié)論
    5.2 下一步工作的展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間所取得的成果



本文編號(hào):3174789

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