西地那非對大鼠先天性膈疝模型胎肺發(fā)育的影響及其作用機制的探討
發(fā)布時間:2021-05-08 05:46
本實驗目的是通過研究HIF-2α、VEGF-A在先天性膈疝大鼠動物模型胎肺中表達的變化,探討產(chǎn)前西地那非干預對先天性膈疝大鼠動物模型胎肺肺血管、肺泡等發(fā)育的影響及其可能的作用機制。實驗首先將雌雄SD大鼠按2:1定時成功配種后得到10只孕鼠,孕9.5 d將孕鼠隨機分為4組:正?瞻捉M(Normal+Control group,NC組,2只)、正常西地那非組(Normal+Sildenafil group,NS組,2只)僅給予橄欖油灌胃,模型空白組(Model+Control group,MC組,3只)、模型西地那非組(Model+Sildenafil group,MS組,3只)灌胃給予除草醚(125mg/只,溶于2ml橄欖油中)誘導產(chǎn)生CDH模型。孕11.5 d-20.5 d NS、MS兩組孕鼠每天灌胃給予西地那非(30mg/kg,溶于10ml/kg蒸餾水中),其余各組每天給予等量蒸餾水,孕21 d(預產(chǎn)期前24h)在戊巴比妥鈉麻醉下剖宮產(chǎn)取出所有胎鼠并稱重,放大鏡下觀察膈疝形成情況并取出兩側肺組織并稱重,肺組織切片HE染色觀察各組肺微、小血管、細小支氣管、肺泡的發(fā)育情況,免疫組織化學染...
【文章來源】:電子科技大學四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:46 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
1.1 研究背景與意義
1.2 國內外研究歷史與現(xiàn)狀
1.2.1 CDH實驗研究動物模型
1.2.2 CDH產(chǎn)前藥物干預的研究
1.2.3 CDH肺發(fā)育不良機制的研究
1.3 本文的主要工作
1.4 本論文的結構安排
第二章 材料與方法
2.1 實驗動物
2.2 試劑和藥品
2.3 設備與儀器
2.4 動物模型建立及分組
2.5 飼養(yǎng)與干預
2.6 肺組織標本采集
2.7 肺組織切片HE染色及形態(tài)學觀察
2.8 免疫組織化學染色
2.9 蛋白免疫印記實驗(WESTERN BLOTTING)
2.10 統(tǒng)計學方法
第三章 結果
3.1 胎鼠膈疝動物模型的誘導情況
3.2 胎鼠肺重與體重之比
3.3 肺泡及細小支氣管形態(tài)學指標觀察
3.4 胎肺微、小血管形態(tài)學指標觀察
3.5 免疫組化染色結果
3.5.1 缺氧誘導因子-2α(HIF-2α)
3.5.2 血管內皮細胞生長因子-A(VEGF-A)
3.6 免疫組化染色陽性表達相關性分析
3.7 WESTERN-BLOTTING定量檢測HIF-2α、VEGF-A的表達情況
第四章 討論
第五章 結論與展望
5.1 本文的主要結論
5.2 下一步工作的展望
致謝
參考文獻
攻讀碩士學位期間所取得的成果
本文編號:3174789
【文章來源】:電子科技大學四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:46 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
1.1 研究背景與意義
1.2 國內外研究歷史與現(xiàn)狀
1.2.1 CDH實驗研究動物模型
1.2.2 CDH產(chǎn)前藥物干預的研究
1.2.3 CDH肺發(fā)育不良機制的研究
1.3 本文的主要工作
1.4 本論文的結構安排
第二章 材料與方法
2.1 實驗動物
2.2 試劑和藥品
2.3 設備與儀器
2.4 動物模型建立及分組
2.5 飼養(yǎng)與干預
2.6 肺組織標本采集
2.7 肺組織切片HE染色及形態(tài)學觀察
2.8 免疫組織化學染色
2.9 蛋白免疫印記實驗(WESTERN BLOTTING)
2.10 統(tǒng)計學方法
第三章 結果
3.1 胎鼠膈疝動物模型的誘導情況
3.2 胎鼠肺重與體重之比
3.3 肺泡及細小支氣管形態(tài)學指標觀察
3.4 胎肺微、小血管形態(tài)學指標觀察
3.5 免疫組化染色結果
3.5.1 缺氧誘導因子-2α(HIF-2α)
3.5.2 血管內皮細胞生長因子-A(VEGF-A)
3.6 免疫組化染色陽性表達相關性分析
3.7 WESTERN-BLOTTING定量檢測HIF-2α、VEGF-A的表達情況
第四章 討論
第五章 結論與展望
5.1 本文的主要結論
5.2 下一步工作的展望
致謝
參考文獻
攻讀碩士學位期間所取得的成果
本文編號:3174789
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