研究目的與背景近年來(lái),結(jié)腸癌的發(fā)病率與死亡率不斷升高,已成為導(dǎo)致我國(guó)癌癥病人死亡的主要原因之一。結(jié)腸癌患者的死亡多是由于發(fā)生了肝轉(zhuǎn)移,約有60%以上的晚期結(jié)腸癌病人均伴有不同程度的肝轉(zhuǎn)移。結(jié)腸癌的發(fā)病機(jī)理十分復(fù)雜,干細(xì)胞理論認(rèn)為腫瘤組織中具有干細(xì)胞樣特性的細(xì)胞才是導(dǎo)致結(jié)腸癌發(fā)生的原因。不同于一般的腫瘤細(xì)胞,腫瘤干細(xì)胞（cancer stemcell,CSC）可以在增殖過(guò)程中保持自我更新,同時(shí)還具有較強(qiáng)免疫逃逸能力;雖然CSC數(shù)目很少,但可引起腫瘤的發(fā)生或者轉(zhuǎn)移;而且CSC對(duì)傳統(tǒng)的治療手段有著相當(dāng)高的抗性,容易導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)。因此,靶向CSC被認(rèn)為是新的、有效的治療包括結(jié)腸癌在內(nèi)的大多數(shù)腫瘤的重要手段之一。腫瘤的發(fā)生除了伴有重要功能基因的突變以外,還與一些特定基因的表觀遺傳學(xué)修飾有關(guān)系。表觀遺傳學(xué)修飾中甲基化修飾方面的報(bào)道居多,且機(jī)制比較明確。異常的DNA甲基化,會(huì)引起一些重要的基因表達(dá)發(fā)生變化,不斷累積后會(huì)使細(xì)胞功能發(fā)生改變,進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞分化或增殖異常,致使各類(lèi)疾病甚至是腫瘤發(fā)生。有趣的是,DNA甲基化是一種特殊的、可逆的生化修飾方式,通過(guò)DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNMT）進(jìn)行調(diào)控。研究表明,... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１基因ＣｐＧ島區(qū)域胞嘧啶的甲基化修飾??

ＤＮＡ甲基化轉(zhuǎn)移酶在結(jié)腸癌細(xì)胞干性維持中的驗(yàn)結(jié)果??ＤＣ對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞ＤＮＭＴ活性的影響??Ｃｏｎｔｒｏｌ組與２．５?ｐＭ、５?ｐＭ和１０?ｐＭ５－ＡｚａＤＣ不同濃度核蛋白的濃度。之后使用ＤＮＭＴ活性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)不，根據(jù)?ＤＮＭＴ?Ａｃｔｉｖｉｔｙ?（ＯＤ／ｈ／ｍｇ）?＝?（Ｎｏ?Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ?ＯＤ?－ｏｕｎｔ?（｜ａｇ）?ｘ?ｈｏｕｒ）?ｘ?１０００計(jì)算各組核蛋白樣品ＤＮＭＴ的Ｃ能夠抑制細(xì)胞ＤＮＭＴ的活性，與Ｃｏｎｔｒｏｌ組相比，后結(jié)腸癌細(xì)胞ＤＮＭＴ活性顯著降低。??

為觀察５－ＡｚａＤＣ結(jié)腸癌細(xì)胞干性特征的影響，我們首先檢測(cè)了不同濃度５－ＡｚａＤＣ??對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞克隆形成能力的影響，各處理組藥物濃度的設(shè)置與生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)相同。結(jié)果??如圖１－４所示，與Ｃｏｎｔｒｏｌ組相比，當(dāng)給予不同濃度的ＤＮＭＴ抑制劑處理后，ＨＣＴ１１６??和ＳＷ６２０細(xì)胞的克隆大小以及克隆的形成率顯著下降。??５－ＡｚａＤＣ??Ｃｏｎｔｒｏｌ???＿?Ｃｏｎｔｒｏｌ?□?２．５ｕＭ??２．５ｕＭ?５．０ｕＭ?ｉ〇ｕＭ?白?５〇ｕＭ?ｃｎｕ?ｉ〇ｕＭ??？?Ｊ——．??ｒｎ?？＜？？?？?〇＞?１５０＊１?１?￣￣￣?１?ｉ?１??■?Ｉ?＾?３Ｔ??￥１００＿ｌ?Ｉ??０?￡?５０■圓?■??１?：?Ｉ?〇１ｌ＾ｒｉ＾??ＨＣＴ１１６?ＳＷ６２０??圖１－４不同濃度５－ＡｚａＤＣ對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞克隆形成的影響（ｎ＝３；?＊＊＊ｐ＜０．００１）??３．２對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞自我更新能力的影響??成球?qū)嶒?yàn)是體外檢測(cè)腫瘤細(xì)胞自我更新能力的重要實(shí)驗(yàn)方法，也是衡量ＣＳＣ干??性的重要標(biāo)準(zhǔn)。于是，我們通過(guò)該實(shí)驗(yàn)來(lái)觀察抑制結(jié)腸癌細(xì)胞ＤＮＭＴ活性是否會(huì)影??－２０－??


本文編號(hào)：3130790