hERG通道是藥物心臟安全性評價的重要靶點,同時還與多種腫瘤細胞的循環(huán)周期密切相關,如:結腸癌,胃癌,惡性膠質瘤和白血病。因此評價hERG通道在生物系統(tǒng)中的功能對了解腫瘤細胞的生理活動特點以及藥物篩選具有重要的意義。目前,膜片鉗技術、放射性配體標記和熒光分析法等一系列技術手段已用于hERG通道的功能評價,但是這些技術手段在高通量、靈敏度、選擇性及環(huán)境友好型等方面仍然存在著缺陷,如:膜片鉗技術的低通量性,放射性配體標記的放射性環(huán)境污染以及熒光分析法的低選擇性。為了高效、快速、準確地了解hERG通道在生物系統(tǒng)中的作用,需要一種簡單、高通量、特異性強、靈敏度高的分析方法。因此,我們基于新的靶向基團——4-芐基苯胺設計了一個結構簡單的熒光探針CBH用于hERG通道熒光成像及標記。通過電生理實驗、熒光共聚焦成像和免疫熒光共定位等手段證明了CBH對hERG通道的高特異性。研究結果表明,探針CBH的熒光發(fā)射機制受溶劑致變色及分子旋轉雙重調控。雙重調控機制有效增大大了探針的熒光發(fā)射信號,從而大大提高了CBH對hERG通道的靈敏性。此外,探針CBH的高靈敏性在hERG蛋白低表達的腫瘤細胞中得到了進一步印... 

【文章來源】：青島大學山東省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

CBH的結構和hERG蛋白作用機制

圖 2 CBH、ZBH、BBH 的合成路線3.2 CBH 的熒光和紫外光譜檢測探針 CBH 在 DMSO 溶解后，得到 CBH 儲備溶液（1 mM）。取 20 μl 儲備溶液

CBH 的紫外吸收光譜也發(fā)生了明顯的變化（圖2.1B）。為了解釋這一現(xiàn)象，我們在不同比例的 DMSO 組分中進行了動態(tài)光散射分析。如圖 1.2 所示，在含有 50%DMSO 的 DMSO/水體系中，CBH 的平均粒徑約為820 nm，表明 CBH 在這一體系中主要處于聚集狀態(tài)。而在含有 60% DMSO 體系中時，CBH 的粒徑大小幾乎無法檢測到，表明 CBH 處于完全分散的狀態(tài)�？紤]到兩種體系所對應的熒光狀態(tài)變化，這種在聚集態(tài)下熒光發(fā)射變?nèi)跛坪跖c聚集致猝滅（ACQ）的現(xiàn)象一致。然而我們發(fā)現(xiàn)

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Optopharmacological control of TRPC channels by coumarincaged lipids is associated with a phototoxic membrane effect[J]. Oleksandra Tiapko,Bernadett Bacsa,Gema Guedes de la Cruz,Toma Glasnov,Klaus Groschner.  Science China（Life Sciences）. 2016(08)
[2]抗心律失常藥物作用的靶點——HERG K+通道[J]. 關鳳英,楊世杰.  藥學學報. 2007(07)



本文編號：3127510