背景與目的:血管功能異常是糖尿病的主要并發(fā)癥,其中,內(nèi)皮細(xì)胞損傷或?qū)ζ咸烟堑睦谜系K是血管功能重構(gòu)的重要環(huán)節(jié),本研究通過建立內(nèi)皮細(xì)胞胰島素抵抗模型,探討感覺神經(jīng)末梢釋放的強(qiáng)舒血管活性肽—降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞胰島素抵抗模型中的保護(hù)作用及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。方法:以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）作為對(duì)象。光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài);用33.3mmol/L高糖和不同濃度的胰島素處理內(nèi)皮細(xì)胞24h和48h,通過檢測(cè)培養(yǎng)中上清液中的葡萄糖消耗量和細(xì)胞糖原合成量,及細(xì)胞e NOS的表達(dá),確定內(nèi)皮細(xì)胞胰島素抵抗模型成功建立;用10nmol/L CGRP處理內(nèi)皮細(xì)胞胰島素抵抗模型24h,分別用葡萄糖氧化酶法和蒽酮-硫酸法檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞胰島素抵抗模型中的葡萄糖消耗能力和糖原合成能力;Western blot檢測(cè)PPARγ和e NOS的蛋白表達(dá),RT-PCR檢測(cè)PPARγ和e NOS的基因表達(dá);為了檢測(cè)CGRP是否通過c AMP上調(diào)PPARγ和e NOS蛋白的表達(dá),使用AC阻斷劑SQ22536檢測(cè)下游蛋白PPARγ和e NOS蛋白基因表達(dá)變化。結(jié)果:33.3mmol/L的高糖和5μmol... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
第2章 材料
    2.1 主要試劑
    2.2 主要儀器
第3章 主要方法
    3.1 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)
    3.2 葡萄糖氧化酶-過氧化酶法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)基中葡萄糖
    3.3 蒽酮-硫酸法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)糖原含量
    3.4 Western-Blot法檢測(cè)蛋白表達(dá)
    3.5 RT-PCR法檢測(cè)mRNA的表達(dá)
    3.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第4章 結(jié)果
    4.1 HUVEC胰島素抵抗模型的建立
        4.1.1 不同濃度的胰島素對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的葡萄糖的消耗量的改變
        4.1.2 內(nèi)皮細(xì)胞胰島素抵抗組細(xì)胞形態(tài)變化
        4.1.3 IR模型組處理不同的時(shí)間檢測(cè)細(xì)胞糖原合成能力
    4.2 CGRP改善內(nèi)皮細(xì)胞的胰島素抵抗
        4.2.1 CGRP增加胰島素抵抗內(nèi)皮細(xì)胞中葡萄糖消耗量
        4.2.2 CGRP增加胰島素抵抗內(nèi)皮細(xì)胞中糖原合成
        4.2.3 CGRP上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞IR中PPARγ 和e NOS蛋白和基因表達(dá)
    4.3 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制
        4.3.1 AC阻斷劑對(duì)胰島素抵抗內(nèi)皮細(xì)胞的PPARγ 蛋白和m RNA的影響
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 血管內(nèi)皮細(xì)胞來源的主要酶類及其功能
    參考文獻(xiàn)
科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]IR-3T3-L1脂肪胰島素抵抗細(xì)胞的建立[J]. 聶緒強(qiáng),楊建文,史海霞,張玉金,張建永,卞卡.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(01)
[2]細(xì)胞內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶2基因過表達(dá)對(duì)INS-1細(xì)胞功能的影響[J]. 劉沖霄,萬曉玉,陳源文,方芳,葉婷婷,董艷.  中國(guó)糖尿病雜志. 2014(04)
[3]芝麻素對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠的降壓作用及機(jī)制[J]. 張俊秀,楊解人,李文星,唐麗娟,楊慧,熊鶯.  皖南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2014(02)
[4]降鈣素基因相關(guān)肽對(duì)低氧性肺動(dòng)脈高壓肺動(dòng)脈膠原沉積的影響[J]. 李先偉,杜潔,李元建.  中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2013(02)
[5]卡托普利對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化家兔血管內(nèi)皮功能的保護(hù)作用及其機(jī)制[J]. 徐文娟,馮梅,劉麗華,魯長(zhǎng)武,熊燕.  中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2012(06)
[6]人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞胰島素抵抗細(xì)胞模型的建立[J]. 肖維民,姚尚龍,武慶平,刁波,周芳,王玨,戴中亮,伍靜.  中國(guó)組織工程研究. 2012(24)
[7]洛伐他汀抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶9表達(dá)和活性[J]. 曾鈞發(fā),王佐,羅勇,雷建軍,桂培根.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2012(03)
[8]米非司酮對(duì)胰島素抵抗人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響及其機(jī)制[J]. 劉艷,李靜,彭軍,賀碧霞,張紅,丁啟龍.  藥學(xué)進(jìn)展. 2011(06)
[9]福辛普利對(duì)老年高血壓患者血管內(nèi)皮功能的影響[J]. 易春濤,陳旭,馬宏偉.  中華全科醫(yī)學(xué). 2011(03)
[10]NADPH氧化酶NOX家族與疾病的關(guān)系[J]. 韓曉燕,高麗萍,劉箐.  國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志. 2010(06)

博士論文
[1]AGE 激活內(nèi)皮細(xì)胞NF-κB及誘導(dǎo)COX-2表達(dá)的機(jī)制研究[D]. 張桂林.中國(guó)人民解放軍第一軍醫(yī)大學(xué) 2003



本文編號(hào)：3119898