微小RNA-218對(duì)大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎細(xì)胞的增殖與凋亡調(diào)控作用機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-04-05 12:56
目的研究微小RNA-218(miR-218)通過(guò)調(diào)控Wnt/β-連環(huán)蛋白(β-catenin)信號(hào)通路對(duì)大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎(KOA)細(xì)胞增殖與凋亡的影響。方法按照體重將SD大鼠隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照組、模型組、第1轉(zhuǎn)染組和第2轉(zhuǎn)染組,每組15只。模型組、第1轉(zhuǎn)染組和第2轉(zhuǎn)染組大鼠通過(guò)向雙側(cè)膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射碘乙酸進(jìn)行KOA造模。成功造模1周后,空白對(duì)照組與模型組大鼠注射等量0.9%NaCl,第1轉(zhuǎn)染組大鼠注射慢病毒滅活miR-218質(zhì)粒3μL(滴度5.0×1012 copies·mL-1);第2轉(zhuǎn)染組大鼠注射慢病毒滅活miR-218質(zhì)粒3μL(滴度5.0×1012 copies·mL-1)+Wnt/β-catenin信號(hào)通路激動(dòng)劑SKL2001(40μmol·L-1)。用逆轉(zhuǎn)錄-PCR法檢測(cè)軟骨組織miR-218基因的表達(dá)(OD比值×100),CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖水平,AnnexinV-FITC/PI染色分析細(xì)胞凋亡狀態(tài),蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)細(xì)胞中Bcl-2基因相關(guān)X蛋白(Bax)、B細(xì)...
【文章來(lái)源】:中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2020,36(22)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【文章目錄】:
材料與方法
1 材料
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 KOA大鼠模型建立
2.2 分組、藥物干預(yù)與取材
2.3 以RT-PCR法檢測(cè)大鼠軟骨組織miR-218基因表達(dá)[5]
2.4 以CCK-8試劑盒檢測(cè)大鼠軟骨細(xì)胞增殖[6]
2.5 以Annexin V-FITC/PI試劑盒檢測(cè)大鼠軟骨細(xì)胞凋亡
2.6 以蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)大鼠軟骨組織Bcl-2、Bax、β-catenin和Wnt蛋白的表達(dá)[8]
3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
1 各組大鼠軟骨組織miR-218基因表達(dá)比較
2 各組大鼠軟骨細(xì)胞增殖水平比較
3 各組大鼠軟骨細(xì)胞凋亡率比較
4 各組大鼠軟骨組織Bcl-2、Bax、β-catenin和Wnt蛋白表達(dá)比較
討 論
本文編號(hào):3119674
【文章來(lái)源】:中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2020,36(22)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【文章目錄】:
材料與方法
1 材料
2 實(shí)驗(yàn)方法
2.1 KOA大鼠模型建立
2.2 分組、藥物干預(yù)與取材
2.3 以RT-PCR法檢測(cè)大鼠軟骨組織miR-218基因表達(dá)[5]
2.4 以CCK-8試劑盒檢測(cè)大鼠軟骨細(xì)胞增殖[6]
2.5 以Annexin V-FITC/PI試劑盒檢測(cè)大鼠軟骨細(xì)胞凋亡
2.6 以蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)大鼠軟骨組織Bcl-2、Bax、β-catenin和Wnt蛋白的表達(dá)[8]
3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
1 各組大鼠軟骨組織miR-218基因表達(dá)比較
2 各組大鼠軟骨細(xì)胞增殖水平比較
3 各組大鼠軟骨細(xì)胞凋亡率比較
4 各組大鼠軟骨組織Bcl-2、Bax、β-catenin和Wnt蛋白表達(dá)比較
討 論
本文編號(hào):3119674
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