硒（Se）是人體所必需的一種微量元素,具有抑菌、抗癌、抗氧化等多種生物活性。納米硒（SeNPs）不僅具有較高的生物活性和較低的毒性,而且與抗癌藥物具有較好的協(xié)同抗癌效果,因而受到廣泛的關(guān)注。然而,納米硒仍然存在著一些缺點,例如穩(wěn)定性較差、缺乏對癌細胞的選擇性等,這些缺點限制了它在抗癌方面的應(yīng)用。圍繞以上問題,本研究主要做了以下工作:（1）使用具有癌細胞靶向作用的葉酸（FA）作為配體,對殼聚糖（CS）進行修飾,并對反應(yīng)條件進行優(yōu)化以提高葉酸與殼聚糖的結(jié)合率。葉酸-殼聚糖結(jié)合物（FA-CS）通過薄層色譜（TLC）,紅外光譜（FT-IR）及核磁共振氫譜（¹H-NMR）進行表征。并通過單因素考察和正交試驗,對反應(yīng)條件進行優(yōu)化,以提高葉酸與殼聚糖的結(jié)合率。實驗結(jié)果顯示,葉酸成功地對殼聚糖進行了修飾,且最優(yōu)的反應(yīng)條件為:反應(yīng)溫度50℃,反應(yīng)時間24h,葉酸與殼聚糖投料比2:1（w/w）,通過最優(yōu)反應(yīng)條件所得產(chǎn)物的平均結(jié)合率為17.58%。（2）制備葉酸-殼聚糖修飾的納米硒（FA-CS-SeNPs）,并對其平均粒徑、粒徑分布、Zeta電位、形態(tài)特征及物理穩(wěn)定性進行評價。使用動態(tài)... 

【文章來源】：青島科技大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
符號說明
前言
第一章 緒論
    1.1 硒的性質(zhì)
        1.1.1 硒的種類
        1.1.2 硒的生物活性
        1.1.3 硒的毒性
    1.2 納米硒的毒性及影響因素
        1.2.1 納米硒的毒性
        1.2.2 影響納米硒毒性的因素
            1.2.2.1 劑量的影響
            1.2.2.2 形態(tài)的影響
            1.2.2.3 粒徑的影響
            1.2.2.4 電荷的影響
    1.3 納米硒的制備方法
        1.3.1 化學(xué)法制備納米硒
        1.3.2 物理法制備納米硒
        1.3.3 生物法制備納米硒
    1.4 納米硒的應(yīng)用
        1.4.1 抗癌活性
        1.4.2 抑菌活性
        1.4.3 抗炎及抗氧化
        1.4.4 其他應(yīng)用
    1.5 納米硒的修飾
        1.5.1 多糖的修飾
        1.5.2 電荷的修飾
        1.5.3 靶向性配體的修飾
    1.6 殼聚糖及其衍生物
        1.6.1 殼聚糖及其衍生物的性質(zhì)
        1.6.2 殼聚糖及其衍生物在藥物傳遞系統(tǒng)中的應(yīng)用
        1.6.3 殼聚糖及其衍生物在納米硒制備中的應(yīng)用
    1.7 葉酸在靶向給藥系統(tǒng)中的應(yīng)用
        1.7.1 葉酸與葉酸受體
        1.7.2 葉酸在靶向給藥系統(tǒng)中的應(yīng)用
    1.8 聯(lián)合納米硒給藥的藥物傳遞系統(tǒng)
    1.9 本課題的研究目的及意義
第二章 殼聚糖的葉酸修飾及其表征
    2.1 概述
    2.2 實驗部分
        2.2.1 實驗材料與儀器
        2.2.2 殼聚糖的葉酸修飾及純化
            2.2.2.1 殼聚糖的葉酸修飾
            2.2.2.2 葉酸-殼聚糖的純化
        2.2.3 葉酸-殼聚糖的表征
            2.2.3.1 薄層色譜法
            2.2.3.2 紅外光譜法
            2.2.3.3 核磁共振氫譜法
        2.2.4 葉酸-殼聚糖結(jié)合率的評價
            2.2.4.1 葉酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
            2.2.4.2 葉酸-殼聚糖結(jié)合率的計算方法
        2.2.5 葉酸修飾殼聚糖的條件優(yōu)化
            2.2.5.1 單因素考察
            2.2.5.2 正交實驗
            2.2.5.3 最優(yōu)條件的驗證
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 殼聚糖的葉酸修飾
        2.3.2 葉酸-殼聚糖的表征
            2.3.2.1 薄層色譜法
            2.3.2.2 紅外光譜法
            2.3.2.3 核磁共振氫譜法
        2.3.3 葉酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        2.3.4 葉酸修飾殼聚糖的條件優(yōu)化
            2.3.4.1 單因素考察
            2.3.4.2 正交實驗
            2.3.4.3 最優(yōu)反應(yīng)條件的驗證
    2.4 本章小結(jié)
第三章 葉酸-殼聚糖修飾納米硒的制備及其表征
    3.1 概述
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗材料與儀器
        3.2.2 納米硒的制備方法
            3.2.2.1 儲備液的配制
            3.2.2.2 納米硒的制備
        3.2.3 葉酸-殼聚糖修飾納米硒的制備
        3.2.4 納米硒及葉酸-殼聚糖修飾納米硒的表征
            3.2.4.1 粒徑及粒徑分布
            3.2.4.2 Zeta電位
            3.2.4.3 形態(tài)特征
        3.2.5 納米硒及修飾納米硒的物理穩(wěn)定性
            3.2.5.1 納米硒及修飾納米硒的聚集、沉降特點
            3.2.5.2 納米硒及修飾納米硒的粒徑變化
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 納米硒的制備
        3.3.2 葉酸-殼聚糖修飾納米硒的制備
        3.3.3 納米硒及葉酸-殼聚糖修飾納米硒的表征
            3.3.3.1 平均粒徑及其分布
            3.3.3.2 Zeta電位
        3.3.4 納米硒及修飾納米硒的物理穩(wěn)定性
            3.3.4.1 納米硒及修飾納米硒的聚集、沉降特點
            3.3.4.2 納米硒及修飾納米硒的粒徑變化
    3.4 本章小結(jié)
第四章 葉酸-殼聚糖修飾納米硒的靶向性及抗癌效果評價
    4.1 概述
    4.2 實驗部分
        4.2.1 實驗材料與設(shè)備
        4.2.2 細胞的復(fù)蘇
        4.2.3 細胞的傳代
        4.2.4 樣品的配制
            4.2.4.1 儲備液的配制
            4.2.4.2 樣品的制備
        4.2.5 體外細胞毒性實驗
            4.2.5.1 實驗設(shè)計
            4.2.5.2 實驗方法
        4.2.6 統(tǒng)計學(xué)處理
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 MTT法測定的細胞存活率
        4.3.2 細胞存活率的統(tǒng)計學(xué)分析
    4.4 本章小結(jié)
第五章 葉酸-殼聚糖修飾納米硒與脂質(zhì)體復(fù)合體系的構(gòu)建
    5.1 概述
    5.2 實驗部分
        5.2.1 實驗材料與儀器
        5.2.2 負(fù)載熒光素脂質(zhì)體的制備
        5.2.3 熒光素分析方法的建立
            5.2.3.1 熒光素激發(fā)波長和發(fā)射波長的確定
            5.2.3.2 熒光素標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        5.2.4 脂質(zhì)體與游離熒光素的分離
            5.2.4.1 透析時間的確定
            5.2.4.2 分離方法的驗證
        5.2.5 脂質(zhì)體包封率的評價
        5.2.6 FA-CS-SeNPs-Lips復(fù)合體系的構(gòu)建
            5.2.6.1 儲備液的配制
            5.2.6.2 FA-CS-SeNPs-Lips復(fù)合體系的構(gòu)建
        5.2.7 脂質(zhì)體及FA-CS-SeNPs-Lips復(fù)合體系的表征
            5.2.7.1 形態(tài)特征
            5.2.7.2 粒徑分布及Zeta電位
        5.2.8 熒光素的體外釋放研究
        5.2.9 熒光素的細胞攝取實驗
            5.2.9.1 實驗設(shè)計
            5.2.9.2 細胞的傳代與復(fù)蘇
            5.2.9.3 細胞的接種與加樣
            5.2.9.4 熒光顯微鏡觀察及熒光素攝取量的比較
        5.2.10 統(tǒng)計學(xué)分析
    5.3 結(jié)果與討論
        5.3.1 熒光素分析方法的建立
            5.3.1.1 熒光素激發(fā)光波長及發(fā)射光波長的確定
            5.3.1.2 熒光素標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        5.3.2 脂質(zhì)體與未包封熒光素的分離
            5.3.2.1 透析時間的確定
            5.3.2.2 分離方法的驗證
        5.3.3 脂質(zhì)體的包封率
        5.3.4 脂質(zhì)體及FA-CS-SeNPs-Lips復(fù)合體系的表征
            5.3.4.1 形態(tài)特征
            5.3.4.2 脂質(zhì)體的平均粒徑及粒徑分布
            5.3.4.3 Zeta電位
        5.3.5 熒光素的體外釋放研究
        5.3.6 熒光素的細胞攝取實驗
            5.3.6.1 熒光顯微鏡
            5.3.6.2 熒光強度的定量分析
            5.3.6.3 細胞熒光強度的統(tǒng)計學(xué)分析
    5.4 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
致謝
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本文編號：3098275