發(fā)布時間：2021-03-09 03:27

　　丙型肝炎病毒（Hepatitis c virus,HCV）感染可導(dǎo)致肝纖維化,肝硬化,肝癌甚至死亡,嚴(yán)重危害了人類健康。NS3/4A蛋白酶是研發(fā)抗HCV藥物的重要靶點,本研究利用實驗室已構(gòu)建好的NS3/4A蛋白酶抑制劑篩選模型從真菌SIPIFW-F4581和云南美登木中篩選活性化合物,并進行結(jié)構(gòu)鑒定和定量的NS3/4A蛋白酶抑制活性評價。首先對真菌SIPIFW-F4581的發(fā)酵培養(yǎng)基進行了篩選,考察了Y-1培養(yǎng)基、Y-2培養(yǎng)基、Y-3培養(yǎng)基、Y-4培養(yǎng)基、Y-5培養(yǎng)基和Y-6培養(yǎng)基,結(jié)果顯示Y-1培養(yǎng)基和Y-6培養(yǎng)基發(fā)酵真菌SIPIFW-F4581時,其代謝產(chǎn)物具有較高NS3/4A蛋白酶抑制活性。接著,本研究利用Y-1培養(yǎng)和Y-6培養(yǎng)基進行SIPIFW-F4581的大規(guī)模發(fā)酵,并對其產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物進行以活性為導(dǎo)向的分離純化。最終獲得兩個活性化合物:J-1和J-2,其中J-1為新化合物,命名為（E）-2,4-二羥基-6-丙烯基苯甲醛,IC50是17.9 m M;J-2結(jié)構(gòu)鑒定為（2S,3R）-2,3,4-三甲基-5,7-二羥基-2,3-苯并二氫呋喃,IC50是312.0μM,本研究為首次... 

【文章來源】：中國醫(yī)藥工業(yè)研究總院上海市

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮寫說明
第1章 緒論
    1.1 丙型肝炎病毒與抗丙型肝炎病毒藥物
        1.1.1 丙型肝炎病毒的結(jié)構(gòu)與復(fù)制
        1.1.2 抗HCV藥物
    1.2 HCV NS3/4A蛋白酶及其抑制劑的開發(fā)
        1.2.1 HCV NS3/4A蛋白酶的結(jié)構(gòu)與功能
        1.2.2 HCV NS3/4A蛋白酶抑制劑
    1.3 立題依據(jù)
    1.4 實驗技術(shù)路線
第2章 SIPIFW-F4581中NS3/4A蛋白酶抑制劑的篩選
    2.1 試劑與儀器
        2.1.1 實驗儀器
        2.1.2 實驗材料與溶劑
        2.1.3 培養(yǎng)基
    2.2 實驗方法
        2.2.1 SIPIFW-F4581發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選
        2.2.2 SIPIFW-F4581中活性代謝產(chǎn)物分離
        2.2.3 活性化合物的結(jié)構(gòu)鑒定
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 SIPIFW-F4581發(fā)酵培養(yǎng)基的篩選
        2.3.2 SIPIFW-F4581中NS3/4A蛋白酶抑制劑的篩選
    2.4 本章小結(jié)和討論
第3章 美登木中NS3/4A蛋白酶抑制劑的篩選
    3.1 試劑與儀器
        3.1.1 實驗儀器
        3.1.2 實驗材料與溶劑
    3.2 實驗方法
        3.2.1 提取
        3.2.2 美登木正丁醇萃取組分中活性代謝產(chǎn)物分離
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 活性化合物Z-1 的分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定
        3.3.2 活性化合物Z-2 的分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定
        3.3.3 活性化合物Z-3 的分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定
        3.3.4 活性化合物Z-4 的分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定
    3.4 本章小結(jié)和討論
第4章 化合物的生物活性評價
    4.1 試劑與儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 待測樣品的配制
        4.2.2 樣品NS3/4A蛋白酶抑制率的測定
    4.3 實驗結(jié)果
    4.4 本章小結(jié)和討論
全文總結(jié)
參考文獻
對進一步研究工作的設(shè)想和建議
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文、專利申請
致謝
附錄



本文編號：3072166