腦利鈉肽（Brain natriuretic peptide,BNP）是由心肌細(xì)胞分泌包含32個氨基酸殘基的多肽,具有促進(jìn)排鈉、排尿、舒張血管,可對抗腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（RAAS）的縮血管作用。重組人腦利鈉肽（Recombinant human Brain Natriuretic Peptide,rhBNP）是人腦利鈉肽基因體外表達(dá)的產(chǎn)物,是治療心衰的臨床用藥。論文分為兩個部分。第一部分,根據(jù)血液中存在的二肽基肽酶DPP-Ⅳ可能對BNP發(fā)揮特異性切割作用,從而降低血液BNP濃度（活性）,體外表達(dá)、純化出純度大于98%的rhBNP,建立了體外DPP-Ⅳ酶切rhBNP方法,DPP-Ⅳ最佳酶切條件:DPP-Ⅳ與rhBNP終濃度比1:500、酶切時間4 h、酶切緩沖體系20 mmol/l Tris-HCl pH7.8。建立了基于HPLC鑒定DPP-Ⅳ酶切產(chǎn)物的方法并純化獲得純度大于95%的3-32BNP。采用穩(wěn)轉(zhuǎn)BNP受體細(xì)胞系,結(jié)合特異性ELISA方法,比較了酶切前后rhBNP生物學(xué)活性,3次實驗結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計學(xué)t檢驗算出P（rhBNP、酶切rhBNP）=0.0716>0.05,... 

【文章來源】：河北科技大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

腦利鈉肽肽鏈分子結(jié)構(gòu)

的啟動子位于 5’端上游區(qū)域，雖然心房中 BNP更大，所以心型 BNP 大部分源自心室。心房中，而新生兒不然，因此心室和心房中腦利鈉肽的的受體胞膜跨膜受體特異性結(jié)合，發(fā)揮細(xì)胞信號傳導(dǎo)A、NPR-B 和 NPR-C 三種二聚體跨膜蛋白。其合部位，胞內(nèi)部位有鳥苷酸環(huán)化酶催化結(jié)構(gòu)域、異性結(jié)合，胞外信號跨膜傳導(dǎo)，使胞內(nèi)鳥苷酸為 cGMP，cGMP 發(fā)揮第二信使作用，cGMP 使磷酸二酯酶(PDEs)激活，產(chǎn)生多種信號通路的作這個域的受損或缺失都會促使受體失去活性，結(jié)合。NPR-C 受體與 NPR-A 和 NPR-B 不同，其的清除回收工作[15]，見圖 1-2[16]。

共振角跟芯片表面折射率成反比，芯片表面折射率跟芯片結(jié)合的分，通過實時測定芯片表面折光率 n 的變化形成響應(yīng)曲線，經(jīng)過數(shù)據(jù)線數(shù)據(jù)擬合后就能得到樣品濃度、親和力(平衡結(jié)合/解離常數(shù))、動力率)常數(shù)和特異性等數(shù)據(jù)。通過檢測器就能實時分析芯片表面固定的分子的相互作用全過程，原理如下圖 1-3[48]：

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]生物技術(shù)藥物生物學(xué)活性測定方法研究進(jìn)展[J]. 于雷,饒春明.  生物技術(shù)通訊. 2017(03)
[2]2型糖尿病經(jīng)二肽基肽酶4抑制劑治療的研究進(jìn)展[J]. 于大泳,管林霞.  中國繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育. 2016(13)
[3]心力衰竭新型器械治療進(jìn)展[J]. 鄒彤,楊杰孚.  中國介入心臟病學(xué)雜志. 2015(08)
[4]用硝酸甘油、多巴酚丁胺聯(lián)合米力農(nóng)治療頑固性心力衰竭的效果觀察[J]. 李偉.  當(dāng)代醫(yī)藥論叢. 2014(17)
[5]心力衰竭患者的護(hù)理[J]. 張雪飛.  中國臨床醫(yī)生. 2014(09)
[6]Marked elevation of B-type natriuretic peptide in patients with heart failure and preserved ejection fraction[J]. Samuel Tate,Andrea Griem,Blythe Durbin-Johnson,Clifton Watt,Saul Schaefer.  The Journal of Biomedical Research. 2014(04)
[7]淺析高效液相色譜分析法在各領(lǐng)域的應(yīng)用及發(fā)展前景[J]. 昝川南,葉梁銀.  化學(xué)工程與裝備. 2013(02)
[8]親和標(biāo)簽在重組蛋白表達(dá)與純化中的應(yīng)用[J]. 陳愛春,彭偉,汪生鵬.  中國生物工程雜志. 2012(12)
[9]重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J]. 范翠英,馮利興,樊金玲,果德安,劉璇.  生物技術(shù). 2012(02)
[10]腦鈉肽的生物學(xué)意義與臨床價值[J]. 楊磊.  臨床合理用藥雜志. 2010(03)



本文編號：3059168