腦利鈉肽（Brain natriuretic peptide,BNP）是由心肌細(xì)胞分泌包含32個(gè)氨基酸殘基的多肽,具有促進(jìn)排鈉、排尿、舒張血管,可對(duì)抗腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（RAAS）的縮血管作用。重組人腦利鈉肽（Recombinant human Brain Natriuretic Peptide,rhBNP）是人腦利鈉肽基因體外表達(dá)的產(chǎn)物,是治療心衰的臨床用藥。論文分為兩個(gè)部分。第一部分,根據(jù)血液中存在的二肽基肽酶DPP-Ⅳ可能對(duì)BNP發(fā)揮特異性切割作用,從而降低血液BNP濃度（活性）,體外表達(dá)、純化出純度大于98%的rhBNP,建立了體外DPP-Ⅳ酶切rhBNP方法,DPP-Ⅳ最佳酶切條件:DPP-Ⅳ與rhBNP終濃度比1:500、酶切時(shí)間4 h、酶切緩沖體系20 mmol/l Tris-HCl pH7.8。建立了基于HPLC鑒定DPP-Ⅳ酶切產(chǎn)物的方法并純化獲得純度大于95%的3-32BNP。采用穩(wěn)轉(zhuǎn)BNP受體細(xì)胞系,結(jié)合特異性ELISA方法,比較了酶切前后rhBNP生物學(xué)活性,3次實(shí)驗(yàn)結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)t檢驗(yàn)算出P（rhBNP、酶切rhBNP）=0.0716>0.05,... 

【文章來(lái)源】：河北科技大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

腦利鈉肽肽鏈分子結(jié)構(gòu)

的啟動(dòng)子位于 5’端上游區(qū)域，雖然心房中 BNP更大，所以心型 BNP 大部分源自心室。心房中，而新生兒不然，因此心室和心房中腦利鈉肽的的受體胞膜跨膜受體特異性結(jié)合，發(fā)揮細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)A、NPR-B 和 NPR-C 三種二聚體跨膜蛋白。其合部位，胞內(nèi)部位有鳥苷酸環(huán)化酶催化結(jié)構(gòu)域、異性結(jié)合，胞外信號(hào)跨膜傳導(dǎo)，使胞內(nèi)鳥苷酸為 cGMP，cGMP 發(fā)揮第二信使作用，cGMP 使磷酸二酯酶(PDEs)激活，產(chǎn)生多種信號(hào)通路的作這個(gè)域的受損或缺失都會(huì)促使受體失去活性，結(jié)合。NPR-C 受體與 NPR-A 和 NPR-B 不同，其的清除回收工作[15]，見圖 1-2[16]。

共振角跟芯片表面折射率成反比，芯片表面折射率跟芯片結(jié)合的分，通過(guò)實(shí)時(shí)測(cè)定芯片表面折光率 n 的變化形成響應(yīng)曲線，經(jīng)過(guò)數(shù)據(jù)線數(shù)據(jù)擬合后就能得到樣品濃度、親和力(平衡結(jié)合/解離常數(shù))、動(dòng)力率)常數(shù)和特異性等數(shù)據(jù)。通過(guò)檢測(cè)器就能實(shí)時(shí)分析芯片表面固定的分子的相互作用全過(guò)程，原理如下圖 1-3[48]：

【參考文獻(xiàn)】：
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