生物鐘作為生命體中一種重要的調(diào)控系統(tǒng),對機(jī)體的分子、細(xì)胞、生理、生化等各層次的生理功能均起到重要的調(diào)節(jié)作用。有研究表明在大鼠卵巢顆粒細(xì)胞,生物鐘基因Nr1d1激動劑會以劑量依賴的方式顯著增加StAR的mRNA達(dá)量;而且生物鐘基因在小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞中存在節(jié)律性表達(dá)并參與調(diào)控小鼠睪酮的合成。雙酚基丙烷又稱雙酚A（Bisphenol A,BPA）,是一種重要的工業(yè)化合物,常用于生活日用品的制造。其作為一種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物,可以通過呼吸道、消化道、皮膚等途徑進(jìn)入人體。已有研究證明BPA能夠?qū)θ撕蛣游锏纳诚到y(tǒng)產(chǎn)生潛在的影響,并且會影響雄性睪酮的分泌,但具體的分子機(jī)制仍不清楚,亟待進(jìn)一步深入研究。此外有證據(jù)顯示,暴露于BPA對小鼠神經(jīng)元細(xì)胞的生物鐘基因表達(dá)有顯著影響。綜上,我們推測BPA、生物鐘與睪酮合成三者之間應(yīng)該存在一定的聯(lián)系,因此,本研究對BPA是否通過生物鐘來影響睪酮合成的分子機(jī)制進(jìn)行了探究。本研究主要利用小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞系（TM3）、原代睪丸間質(zhì)細(xì)胞以及小鼠睪丸等體內(nèi)、體外模型,借助Kronos AB-2550實(shí)時(shí)生物節(jié)律熒光檢測系統(tǒng)、RT-qPCR、Western blotting、... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

哺乳動物生物鐘分子調(diào)控機(jī)制(Takahashi2017)

圖 1-2 人類胎兒期和成人期睪酮產(chǎn)生量(Zirkin et al. 2018)Figure 1-2 Fetal and adult periods of testosterone production.(Zirkin et al. 2018)為了更深入的對小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞類固醇合成機(jī)制進(jìn)行研究，Mario Ascoli 建立了小鼠腫瘤間質(zhì)細(xì)胞系 MA-10(Ascoli 1981)。然而，MA-10 細(xì)胞不表達(dá) CYP17A1，因此產(chǎn)生的主要類固醇產(chǎn)物是孕酮。與此同時(shí)，Mather1980 年建立了小鼠 TM3 睪丸間質(zhì)細(xì)胞系 (Mather 1980)。雖然 TM3 細(xì)胞產(chǎn)生睪酮，但是它與 MA-10 細(xì)胞相似，來自于與 MA-10 細(xì)胞相同的腫瘤，主要的類固醇產(chǎn)物是孕酮(Zirkin et al. 2018)。雖然上

圖 1-3 睪丸間質(zhì)細(xì)胞類固醇合成途徑(Zirkin 2018)Fig. 1-3 Steroid synthesis pathway of Leydig cells (Zirkin 2018)機(jī)體內(nèi)所有激素水平都處于一個(gè)相對穩(wěn)態(tài)狀態(tài)，所以當(dāng)機(jī)體睪酮含量過高時(shí)，睪酮以負(fù)反饋形式抑制下丘腦和垂體分泌 GnRH 和 LH，從而影響 PKA 的活性，而 PKA能夠通過與 CYP11A1 基因啟動子的相應(yīng)序列相互作用調(diào)節(jié) CYP11A1 基因的轉(zhuǎn)錄(Miller 2011)，而 CYP11A1 是唯一可以將膽固醇轉(zhuǎn)化為孕烯醇酮的酶，所以對睪酮含量的平衡起到一定調(diào)控作用。除了 PKA 對類固醇形成的調(diào)控外，在過去 20 年中還發(fā)現(xiàn)了一些調(diào)控間質(zhì)細(xì)胞分化和功能的調(diào)控因子，這些調(diào)控因子包括信號分子 PDGF 和DHH，激酶 MAPK、PKG、CAMKI 和 AMPK 以及轉(zhuǎn)錄因子 MEF2、GATA4 、SF-1、Nur77、SP-1、 PPARs 等 (Tremblay 2015)。此外，細(xì)胞自主的 AMPK 依賴機(jī)制也能積極抑制類固醇生成，從而防止類固醇激素的過度分泌(Abdou et al 2014)。除了磷酸化和蛋白激酶外，蛋白磷酸酶在調(diào)控間質(zhì)細(xì)胞分泌類固醇激素方面也起到了關(guān)鍵的作用(Gorostizaga et al. 2007)。除此之外，有研究表明一些核受體對間質(zhì)細(xì)胞功能調(diào)節(jié)具有直接或間接的作用(如 NR5A1)( Martin et al. 2010)。但是具體有哪些核受體在間質(zhì)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3055793