目的探究抑制線(xiàn)粒體丙酮酸載體（mitochondrial pyruvate carrier,MPC）是否通過(guò)激活腺苷酸激活蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）-乙酰輔酶A羧化酶（acetyl CoA carboxylase,ACC）通路,改善棕櫚酸（palmitic acid,PA）所致HepG2細(xì)胞脂肪變性情況。方法利用PA處理HepG2細(xì)胞作為高脂負(fù)荷模型組,實(shí)驗(yàn)分為正常對(duì)照組、模型組和MPC抑制組。油紅O染色分析細(xì)胞的油脂蓄積情況。RT-PCR檢測(cè)AMPK、ACC、CPT1A、SREBP1 mRNA表達(dá)水平。全自動(dòng)蛋白分析儀檢測(cè)AMPK、p-AMPK、ACC、p-ACC、SREBP1蛋白表達(dá)水平。結(jié)果 PA可以誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)聚集大量環(huán)狀脂滴,降低p-AMPK、p-ACC蛋白表達(dá)水平,提高SREBP1基因以及蛋白表達(dá)水平。MPC抑制劑UK5099可以減少PA所致HepG2細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)脂滴數(shù)量,提高p-AMPK、p-ACC蛋白表達(dá)水平,降低SREBP1基因以及蛋白表達(dá)水平。結(jié)論體外抑制MPC可以明顯改善PA所致HepG2細(xì)胞脂肪變性。... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2020,36(12)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 細(xì)胞來(lái)源
    1.2 試劑
    1.3 儀器
2 方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)和主要試劑配制
    2.2 CCK8測(cè)定細(xì)胞活力
    2.3 細(xì)胞的分組
    2.4 Real-time PCR檢測(cè)目的基因的表達(dá)
    2.5 全自動(dòng)蛋白質(zhì)定量檢測(cè)儀定量檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)
    2.6 油紅O染色觀(guān)察脂質(zhì)堆積
    2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 不同濃度PA、MPC抑制劑UK5099對(duì)HepG2細(xì)胞活力的影響
    3.2 抑制MPC可以改善PA所致HepG2細(xì)胞脂質(zhì)堆積的情況
    3.3 體外抑制MPC通過(guò)激活A(yù)MPK-ACC通路改善脂質(zhì)堆積情況
4 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]小檗堿通過(guò)抑制脂肪酸攝取降低小鼠原代肝細(xì)胞脂質(zhì)沉積[J]. 俞牧雨,米日阿依·阿里木江,劉威,殷峻.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2018(03)



本文編號(hào)：3035321