目的探討人結(jié)腸癌細(xì)胞中高爾基磷蛋白3（GOLPH3）基因高表達(dá)與結(jié)腸癌細(xì)胞對(duì)5-氟尿嘧啶（5-FU）的耐藥的相關(guān)性。方法 HT29細(xì)胞分為5組:對(duì)照組（HT29）,轉(zhuǎn)染組（siRNA-GOLPH3）,實(shí)驗(yàn)組1(30μmol·L^-15-FU),實(shí)驗(yàn)組2(siRNA-GOLPH3+30μmol·L^-15-FU),實(shí)驗(yàn)組3(30μmol·L^-15-FU+50μmol·L^-1PD98059)。人結(jié)腸癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染siRNA-GOLPH3,以逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)方法檢測(cè)GOLPH3基因的沉默效果,以噻唑藍(lán)、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞增殖和凋亡,以Western blot法檢測(cè)GOLPH3,P糖蛋白（P-gp）,ERK1/2和p ERK1/2蛋白的表達(dá)。結(jié)果對(duì)照組和轉(zhuǎn)染組的GOLPH3 mRNA的蛋白相對(duì)表達(dá)量分別為1.00±0.08和0.15±0.02,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,表明GOLPH3基因沉默效果好。實(shí)驗(yàn)組1、實(shí)驗(yàn)組2和對(duì)照組的增殖能力分別為0.80±0.10,0.24±0.09和1.05±0.... 

【文章來源】：中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志. 2020,36(03)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
        細(xì)胞
        試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與分組
        2.2 以逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng) （RT-PCR） 檢測(cè)結(jié)腸癌細(xì)胞株HT29轉(zhuǎn)染前后GOLPH3 mRNA的表達(dá)[4]
        2.3 以噻唑藍(lán) （MTT） 法檢測(cè)各組細(xì)胞增殖[5]
        2.4 以流式細(xì)胞法檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡率[5]
        2.5 以Western Blot檢測(cè)各組細(xì)胞株GOLPH3、p-gp、ERK1/2和p ERK1/2蛋白質(zhì)的表達(dá)[6]
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    1 HT29結(jié)腸癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染效果檢測(cè)
        1.1 HT29結(jié)腸癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染后GOLPH3表達(dá)量檢測(cè)
        1.2轉(zhuǎn)染組HT29細(xì)胞增殖能力檢測(cè)
    2 GOLPH3基因參與HT29細(xì)胞對(duì)5-FU化療耐藥的研究
        2.1 5-FU處理下干擾GOLPH3基因?qū)T29細(xì)胞增殖的影響
        2.2 5-FU處理下干擾GOLPH3基因?qū)T29細(xì)胞凋亡的影響
    3 各組蛋白表達(dá)結(jié)果
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人結(jié)腸癌細(xì)胞中高爾基磷蛋白3表達(dá)與Wnt信號(hào)通路的關(guān)系[J]. 陳志雄,洪鐘時(shí),邱成志,余外市,王春曉,郭延塔.  中國(guó)普通外科雜志. 2016(10)
[2]淫羊藿素對(duì)大鼠軟骨細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 何李樂,王萬春.  中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015(05)
[3]IGFBP-2及IGFBP-6在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及意義[J]. 薛晶,趙楊,張建偉,焦艷,申興斌.  醫(yī)學(xué)與哲學(xué)（B）. 2014(12)
[4]Recent studies of 5-fluorouracil resistance in pancreatic cancer[J]. Wei-Bin Wang,Yu Yang,Yu-Pei Zhao,Tai-Ping Zhang,Quan Liao,Hong Shu.  World Journal of Gastroenterology. 2014(42)
[5]高爾基磷酸化蛋白3在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及其與血管生成的關(guān)系[J]. 王春曉,邱成志,余外市,吳友誼,黃種心.  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2013 (08)



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