目的探討人結腸癌細胞中高爾基磷蛋白3（GOLPH3）基因高表達與結腸癌細胞對5-氟尿嘧啶（5-FU）的耐藥的相關性。方法 HT29細胞分為5組:對照組（HT29）,轉染組（siRNA-GOLPH3）,實驗組1(30μmol·L^-15-FU),實驗組2(siRNA-GOLPH3+30μmol·L^-15-FU),實驗組3(30μmol·L^-15-FU+50μmol·L^-1PD98059)。人結腸癌細胞轉染siRNA-GOLPH3,以逆轉錄聚合酶鏈反應方法檢測GOLPH3基因的沉默效果,以噻唑藍、流式細胞術檢測各組細胞增殖和凋亡,以Western blot法檢測GOLPH3,P糖蛋白（P-gp）,ERK1/2和p ERK1/2蛋白的表達。結果對照組和轉染組的GOLPH3 mRNA的蛋白相對表達量分別為1.00±0.08和0.15±0.02,差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）,表明GOLPH3基因沉默效果好。實驗組1、實驗組2和對照組的增殖能力分別為0.80±0.10,0.24±0.09和1.05±0.... 

【文章來源】：中國臨床藥理學雜志. 2020,36(03)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
        細胞
        試劑
    2 實驗方法
        2.1 細胞培養(yǎng)與分組
        2.2 以逆轉錄聚合酶鏈反應 （RT-PCR） 檢測結腸癌細胞株HT29轉染前后GOLPH3 mRNA的表達[4]
        2.3 以噻唑藍 （MTT） 法檢測各組細胞增殖[5]
        2.4 以流式細胞法檢測各組細胞凋亡率[5]
        2.5 以Western Blot檢測各組細胞株GOLPH3、p-gp、ERK1/2和p ERK1/2蛋白質的表達[6]
    3 統(tǒng)計學處理
結果
    1 HT29結腸癌細胞轉染效果檢測
        1.1 HT29結腸癌細胞轉染后GOLPH3表達量檢測
        1.2轉染組HT29細胞增殖能力檢測
    2 GOLPH3基因參與HT29細胞對5-FU化療耐藥的研究
        2.1 5-FU處理下干擾GOLPH3基因對HT29細胞增殖的影響
        2.2 5-FU處理下干擾GOLPH3基因對HT29細胞凋亡的影響
    3 各組蛋白表達結果
討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]人結腸癌細胞中高爾基磷蛋白3表達與Wnt信號通路的關系[J]. 陳志雄,洪鐘時,邱成志,余外市,王春曉,郭延塔.  中國普通外科雜志. 2016(10)
[2]淫羊藿素對大鼠軟骨細胞作用的實驗研究[J]. 何李樂,王萬春.  中南大學學報(醫(yī)學版). 2015(05)
[3]IGFBP-2及IGFBP-6在結直腸癌中的表達及意義[J]. 薛晶,趙楊,張建偉,焦艷,申興斌.  醫(yī)學與哲學（B）. 2014(12)
[4]Recent studies of 5-fluorouracil resistance in pancreatic cancer[J]. Wei-Bin Wang,Yu Yang,Yu-Pei Zhao,Tai-Ping Zhang,Quan Liao,Hong Shu.  World Journal of Gastroenterology. 2014(42)
[5]高爾基磷酸化蛋白3在結直腸癌組織中的表達及其與血管生成的關系[J]. 王春曉,邱成志,余外市,吳友誼,黃種心.  中華實驗外科雜志. 2013 (08)



本文編號：2996587