建立基于DNA條形碼技術(shù)的普樂(lè)安片處方成分鑒定方法。共收集8個(gè)廠家的16份普樂(lè)安片樣品,分別采用植物和動(dòng)物基因組DNA提取試劑盒提取樣品DNA,所獲DNA的ITS2序列擴(kuò)增成功率均為100%,細(xì)胞色素C氧化酶亞基I （COI）序列擴(kuò)增成功率分別為43.75%和56.25%。對(duì)于ITS2序列, 12份樣品可獲得高質(zhì)量測(cè)序峰圖,鑒定結(jié)果為油菜Brassica campestris, 4份樣品存在較嚴(yán)重套峰,經(jīng)克隆測(cè)序鑒定為油菜和黑芥B. nigra。對(duì)于COI序列通用引物獲得的9份PCR產(chǎn)物,其中2份樣品可直接進(jìn)行PCR產(chǎn)物測(cè)序,鑒定結(jié)果為蚜蟲類, 7份樣品經(jīng)克隆測(cè)序獲得82條序列,其中5份樣品可檢測(cè)到意大利蜜蜂Apis mellifera, 7份樣品均可檢測(cè)到病原菌或病蟲害。為解決COI通用引物因外源污染導(dǎo)致的蜜蜂源檢測(cè)失敗問(wèn)題,新設(shè)計(jì)2對(duì)蜜蜂屬Apis的COI引物,擴(kuò)增效率均為43.75%,7份PCR產(chǎn)物直接測(cè)序的鑒定結(jié)果均為意大利蜜蜂A. mellifera。9份未檢測(cè)到蜜蜂源的普樂(lè)安片來(lái)自同一廠家生產(chǎn)的3個(gè)不同批次,且每個(gè)批次含3份樣品,推測(cè)原料花粉非蜜蜂采集所得。本研究基于ITS... 

【文章來(lái)源】：藥學(xué)學(xué)報(bào). 2020,55(06)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
材料與方法
結(jié)果
    1 普樂(lè)安片DNA提取、PCR擴(kuò)增成功率與測(cè)序結(jié)果
    2 普樂(lè)安片植物源成分的基原物種鑒定
    3 基于COI序列通用引物的普樂(lè)安片蜜蜂源成分鑒定
    4 基于COI序列的蜂屬特異性引物對(duì)普樂(lè)安片中蜜蜂源成分鑒定
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]基于DNA metabarcoding技術(shù)的如意金黃散處方成分鑒定研究[J]. 石林春,劉金欣,魏妙潔,謝麗芳,宋經(jīng)元.  中國(guó)科學(xué):生命科學(xué). 2018(04)
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本文編號(hào)：2994447