發(fā)布時(shí)間：2021-01-22 03:34

　　目的:大腦中神經(jīng)炎癥的發(fā)生可以促進(jìn)各種神經(jīng)退行性疾病發(fā)展進(jìn)程,小膠質(zhì)細(xì)胞活化是神經(jīng)炎癥特征之一。前期研究表明磷酸二酯酶-4（phosphodiesterase-4,PDE4）抑制劑羅氟普蘭（Roflupram,ROF）減輕炎癥因子釋放,但其機(jī)制尚未清楚,本研究旨在研究ROF對(duì)脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞活化的抑制作用及機(jī)制。方法:（1）使用LPS誘導(dǎo)BV-2細(xì)胞活化,采用ELISA試劑盒檢測(cè)白細(xì)胞介素-6（interleukin-6,IL-6）和腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）含量,Greiss檢測(cè)試劑盒檢測(cè)一氧化氮（nitric oxide,NO）含量,Western blot檢測(cè)誘生型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）和小膠質(zhì)/巨噬細(xì)胞特異性蛋白抗Iba1抗體（ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1）表達(dá),Iba1免疫熒光評(píng)價(jià)ROF對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞活化的抑制作用。（2）采用Western bl... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．神經(jīng)炎癥過程，本圖修改自文獻(xiàn)［５］

進(jìn)展中的作用是非常有意義的，??抑制小膠質(zhì)細(xì)胞活化控制炎癥可能有助于改善疾病進(jìn)展｜１６１。因此，對(duì)小膠質(zhì)細(xì)??胞的炎癥因子的釋放的抑制具有重要意義，針對(duì)減輕小膠質(zhì)細(xì)胞活化引起的神??經(jīng)炎癥的Ｔ預(yù)措施可能成為治療各神經(jīng)退彳／？性疾病的策略之一。??Ｎ？ｕｒｏｎ?Ｉｎｊｕｒｙ?Ｓｉｇｎａｌｓ??〇＾＾ｅａ，ｈ／Ｄａｍａａｅ??（ＬＰＳＪＮＦ＾ＩＬ－６）?．?Ｗ?、??Ｓｏｎ????（ＩＬ－１．?ＴＮＦａ．?ＮＯ．?ＩＬ－６?）??Ｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃ?Ｆａｃｔｏｒｓ??圖２．小膠質(zhì)細(xì)胞激活和祌經(jīng)元死亡的關(guān)系，本閣修改ｈ文獻(xiàn)｜ｌ７＇１８１??Ｆｉｇｕｒｅ?２．?Ｍｉｃｒｏｇｌｉａ?ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｎｅｕｒｏｎａｌ?ｃｅｌｌ?ｄｅａｔｈ．?Ｍｏｄｉｆｉｅｄ?ｆｒｏｍ?ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ１＇７?ＩＫ＾??憐酸：船酶４?（ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ?４，ＰＤＥ４）?＿足一種／丨？：免疫細(xì)胞中高度表達(dá)??的酶，可特異性降解細(xì)胞內(nèi)源性第二信使環(huán)磷酸腺苷（ｃｙｃｌｉｃ?ａｄｅｎｏｓｉｎｅ??ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ，?ｃＡＭＰ），使細(xì)胞中ｃＡＭＰ含量降低。ＰＤＥ４包含四個(gè)亞型??（ＰＤＥ４Ａ，?ＰＤＥ４Ｂ，?ＰＤＥ４Ｃ，?ＰＤＥ４Ｄ），在炎癥細(xì)胞中，ＰＤＥ４Ａ／Ｂ／Ｄ?中高??度表達(dá)｜ｉｙ｜，并ＵｌＪｉｆ．證明Ｐ［）Ｅ４Ｂ和ＰＤＥ４Ｄ調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)（圖３）。一些研宄??人員認(rèn)為，ＰＤＥ４Ｂ是單核細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞中的主要ＰＤＥ４亞型，在引發(fā)炎??癥中起主要作用［２（）１，并且ＰＤＥ４Ｂ的非選擇性抑制劑通常用于千擾炎癥性肺疾病??［２１１�；蚯贸龑�(shí)驗(yàn)表明，敲除ＰＤＥ４Ｂ會(huì)降低ＬＰＳ誘導(dǎo)的ＴＮＦ－ａ表達(dá)，

第一章ＰＤＥ４抑制劑ＲＯＦ對(duì)ＬＰＳ誘導(dǎo)的ＢＶ－２小肢質(zhì)細(xì)胞活化的抑制作用研究??軟件繪制統(tǒng)計(jì)圖。??３結(jié)果??３．１?ＲＯＦ對(duì)經(jīng)ＬＰＳ刺激的ＢＶ－２細(xì)胞上清中炎癥因子水平的影響??在ＬＰＳ作用條件下，免疫細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生炎癥因子。使用ＥＬＩＳＡ試劑盒檢測(cè)細(xì)??胞上清中ＴＮＦ－ａ和ＩＬ－６水平，結(jié)果如圖１－１所示，與Ｃｏｎｔｒｏｌ組相比，ＬＰＳ處理??顯著增加了?ＴＮＦ－ａ和ＩＬ－６水平（Ｐ＜０．０１）。相反，ＲＯＦ劑量依賴性地降低了這??些細(xì)胞因子的水平（Ｐ＜０．０１）�？├仗m（Ｒｏｌｉｐｒａｍ）是第一代ＰＤＥ４抑制劑，??被用作陽性對(duì)照。與咯利普蘭效果相似，ＲＯＦ也降低了?ＢＶ－２細(xì)胞炎癥因子的水??平。上述結(jié)果表明在ＬＰＳ刺激的ＢＶ－２細(xì)胞中，ＲＯＦ可降低炎癥因子的水平。??Ａ?１３００〇ｉ?孽?Ｂ??—?８０００ｎ??ｃ?一?ｔｍ??ｉ?ｎ?＾?ｉ?■?ｘ??３?８〇〇°－?Ｔ?６０００－?＾??ｒ－１－！?Ｃｕｏ?＊＊?＊＊??ｌ?ｇ＊＊＊＊?念一??ｚ?１１?—?一甲?４０００?丄?；Ｍ?！??卜?＾１，１１，１１，１１，１１，１?士?ｉ＾ｌ?ＩＩ?１１，１１．１１１??ＬＰＳ?■?＋?＋＋＋＋?ＬＰＳ?－?＋?＋＋＋?＋??ＲＯＦ?５?１０?２０?－?ＲＯＦ?－?５?１０?２０?－??ｒｏｌｉｐｒａｍ?＋?ｒｏｌｉｐｒａｍ?＋??圖１－１?ＲＯＦ對(duì)經(jīng)ＬＰＳ刺激的ＢＶ－２細(xì)胞上清中炎癥因子水平的影響。用不同濃度的Ｒ〇Ｆ（５，??１０，?２０?ｎＭ）或２０?ｐＭ咯利普蘭預(yù)處理細(xì)胞１?ｈ，然后再用ＬＰＳ?（１昭仰��；１）處理另外８?ｈ。??使用ＥＬＩＳＡ試劑盒檢測(cè)細(xì)胞上清


本文編號(hào)：2992470