目的建立人凝血因子Ⅷ、人凝血因子Ⅸ、人凝血酶、人抗凝血酶Ⅲ蛋白含量Lowry快速檢測(cè)法,并進(jìn)行驗(yàn)證。方法采用《中國(guó)藥典》三部（2010版）Lowry法檢測(cè)因子類產(chǎn)品的蛋白含量,通過(guò)耐用性研究降低輔料對(duì)方法的干擾,優(yōu)化Lowry檢測(cè)方法,并對(duì)方法的專屬性、線性及范圍、準(zhǔn)確度、精密度進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果不同輔料對(duì)Lowry法的干擾程度不同,人凝血因子Ⅷ、人凝血因子Ⅸ、人凝血酶、人抗凝血酶Ⅲ樣品分別稀釋20、10、80、160倍,可明顯降低輔料的影響;Lowry法與凱氏定氮法相關(guān)性良好,方法線性R>0.99,其準(zhǔn)確度、精密度均良好。結(jié)論 Lowry法測(cè)定人凝血因子Ⅷ、人凝血因子Ⅸ、人凝血酶、人抗凝血酶Ⅲ蛋白含量操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確,可用于產(chǎn)品的質(zhì)量控制。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2016,29(04)

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【部分圖文】：

Lowry法的標(biāo)準(zhǔn)曲線

SD（%）2.64.1FⅡa-15.255.11>0.055.175.085.145.08RSD（%）1.10.4ATⅢ-18.438.15>0.058.248.178.398.22RSD（%）1.20.52.3方法的線性及范圍標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖1，回歸方程為y=359.1x+0.6234，R>0.99；檢測(cè)不同濃度標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的回收率在90%~110%之間，供試品溶液的測(cè)定范圍為7.932~79.32μg／ml，見(jiàn)表3。表3Lowry法的標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍Tab3.RangeofstandardcurveofLowrymethod體積蛋白濃度測(cè)定的蛋白濃度回收率（ml）（μg／ml）（μg／ml）（%）SM10.17.937.9299.8SM20.539.6639.4699.5SM31.079.3279.1599.8圖1Lowry法的標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig1.StandardcurveofLowrymethod2.4方法的準(zhǔn)確度每個(gè)樣品3次測(cè)定值的RSD均＜10%，蛋白回收率在90%~110%之間，見(jiàn)表4。表明該方法準(zhǔn)確度良好。表4Lowry法的準(zhǔn)確度驗(yàn)證結(jié)果Tab4.VerificationforaccuracyofLowrymethod樣品添加蛋白含量（μg／ml）回收率（%）FⅧ-139.059840.8410336.8993RSD（%）5.1-FⅨ-143.3610941.5610539.0598RSD（%）5.3-FⅡa-137.979638.699838.3397RSD（%）1.0-ATⅢ-140.1210141.9210637.6195RSD（%）5.5-0.000.050.100.150.200.250908070605040302010吸光度蛋白濃度（μg／m）l樣品·431·

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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