目的:1.優(yōu)化黑根霉胞外多糖（EPS）搖瓶發(fā)酵條件。2.研究EPS體外抗氧化活性。3.研究EPS聯(lián)合奧沙利鉑對二甲肼（DMH）誘導(dǎo)的大鼠結(jié)腸癌的抑制作用及其作用機(jī)制。方法:1.在單因素試驗的基礎(chǔ)上進(jìn)行正交試驗,考察發(fā)酵時間、裝液量和搖瓶轉(zhuǎn)速三個因素對EPS產(chǎn)糖量的影響,優(yōu)化EPS搖瓶發(fā)酵條件,從而提高EPS搖瓶發(fā)酵產(chǎn)糖效率。2.通過測定對1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、羥基自由基（·OH）的清除能力評價EPS的體外抗氧化活性。3.將40只Wistar大鼠（80-100 g）隨機(jī)分為5組:空白對照組、模型組、EPS治療組(150 mg·kg^-1)、奧沙利鉑治療組(10 mg·kg^-1)和EPS+奧沙利鉑治療組。除空白對照組外,均由頸背部皮下注射DMH(30 mg·kg^-1),每周注射1次,連續(xù)15周,建立大鼠結(jié)腸癌模型。同時按劑量給予藥物治療并每周記錄大鼠的體重。4.第21周,麻醉并解剖大鼠,并記錄胸腺和脾臟的重量。5.采用HE染色觀察大鼠結(jié)腸組織的病理學(xué)變化。6.采用酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）檢測血... 

【文章來源】：皖南醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

動物實驗設(shè)計

28 ℃、100 r/min條件下，在搖床上振蕩培養(yǎng)2、4、6、8、10 d，測定不同發(fā)酵時間EPS的產(chǎn)量。圖2 發(fā)酵時間對EPS產(chǎn)量的影響。Fig. 2 Effect of fermentation time on the production of EPS.如圖2所示，發(fā)酵液中EPS的產(chǎn)量是一個動態(tài)變化過程。發(fā)酵初期隨著菌絲體的生長，EPS的產(chǎn)量逐漸增多，隨后菌絲體進(jìn)入對數(shù)生長期，產(chǎn)糖量逐漸上升，并在發(fā)酵6 d EPS的產(chǎn)量到達(dá)最高峰。隨后菌絲體生長進(jìn)入平臺期，EPS的產(chǎn)量也隨之稍有降低。

養(yǎng)基的500 mL三角瓶中，28 ℃、100 r/min條件下，在搖床上振蕩培養(yǎng)6 d，測定不同裝液量EPS的產(chǎn)量。圖3 裝液量對EPS產(chǎn)量的影響。Fig. 3 Effect of the volume of liquid on the production of EPS.溶氧量是指水中氧氣的溶解量，也是真菌在發(fā)酵液中生長的重要指標(biāo)之一。影響發(fā)酵過程溶氧量的重要因素就是搖瓶的裝液量。如圖3所示，隨著裝液量的增加，EPS的產(chǎn)量在不斷的上升，在裝液量為150 mL時，EPS的產(chǎn)量達(dá)到最高；之后，隨著裝液量的繼續(xù)增加，EPS的產(chǎn)量開始減少。所以搖瓶發(fā)酵適宜的裝液量為150mL。3.1.3 搖瓶轉(zhuǎn)速對黑根霉胞外多糖產(chǎn)量的影響取相同接種量的黑根霉真菌置于裝有150 mL液體培養(yǎng)基的500 mL三角瓶中

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：2926199