目的：通過篩選適宜比例的絲素蛋白、明膠納米纖維膜,進一步通過靜電紡絲技術(shù)將藥物黃芪甲苷復(fù)合于內(nèi),制備獲得載藥納米纖維敷料,探討其對于燒燙傷、創(chuàng)傷的治療以及抑制疤痕的作用并且進一步探究其相關(guān)機制,希望達到抑制疤痕、促進傷口快速愈合的治療效果。方法：1、采用靜電紡絲納米纖維技術(shù)制備絲素蛋白(SF)、明膠(GT)在SF/GT 100/0、SF/GT 75/25、SF/GT 25/75、SF/GT 0/100不同比例下的納米纖維膜,并對其直徑、表面形貌、力學(xué)性能、膨脹率、孔隙率、降解率以及生物相容性進行了考察,從而篩選出適用于傷口敷料的最佳比例；2、將藥物黃芪甲苷載入納米纖維膜制備成載藥納米纖維敷料,對其性質(zhì)進行考察。進一步將其用于大鼠深二度燒燙傷傷口治療,考察了載藥納米纖維敷料對燒燙傷的治療效果,并且采用掃描電鏡、HE染色、天狼猩紅染色、馬森三色染色等方式驗證載藥納米纖維敷料的燒燙傷修復(fù)效果；3、進一步將載藥納米纖維敷料用于大鼠創(chuàng)傷傷口治療,考察其創(chuàng)傷修復(fù)效果,并在傷口愈合不同時間點取皮膚組織樣品進行考察,對其促進愈合的機理進行研究。結(jié)果：1、采用靜電紡絲納米纖維技術(shù)成功制備了SF/GT 100/0、SF/GT 75/25、 SF/GT 25/75、SF/GT 0/100不同比例的納米纖維膜,隨著明膠成分含量的增大,其直徑增大、膨脹率增強、降解率加快,柔韌性增強,且具有較好的孔隙率和生物相容性,綜合其性能,最終篩選SF/GT 25/75比例的納米纖維膜作為載藥納米纖維敷料的最佳比例。2、將藥物黃芪甲苷載入SF/GT 25/75比例的納米纖維膜中,結(jié)果顯示對納米纖維膜的直徑、膨脹率、孔隙率、力學(xué)性能、生物相容性等性能均未產(chǎn)生影響,同時顯示了控制藥物緩慢釋放的性能,分別在釋放1h,12h,48h時,累計釋放率達到35%,80%及96%。在體內(nèi)藥效學(xué)考察中,載藥納米纖維膜用于燒燙傷顯示較明顯的治療效果,傷口的愈合速率加快,血管新生數(shù)量增加,膠原蛋白的有序排列增強,對于燒燙傷治療及抑制疤痕有較好效果。3、載藥納米纖維敷料同樣適用于創(chuàng)傷傷口的治療,進一步的研究發(fā)現(xiàn)其機制主要通過促進巨噬細胞在傷口處數(shù)量增加,從而加強創(chuàng)面局部免疫功能,促進傷口愈合；通過促進VEGF的含量增加從而促進血管內(nèi)皮細胞的分裂和增殖進而導(dǎo)致新生血管的生成；同時,載藥納米纖維敷料能有效抑制成纖維細胞的α-SMA表達,減少肌層纖維細胞的形成,從而產(chǎn)生了顯著的疤痕抑制作用。結(jié)論：作為較優(yōu)良的局部給藥體系,載有黃芪甲苷納米纖維敷料可促進燒燙傷、創(chuàng)傷修復(fù),同時有疤痕抑制的效果。
【學(xué)位單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類】：R943
【部分圖文】：

圖１．?７巧化細胞在靜電紡納米纖維膜上的生長增殖情況（＊：Ｐ＜０．０５，＊＊：Ｐ＜０．０１）。??１．３．?１．６．?３細胞生長形態(tài)測試??圖１．８為７天后靜電紡納米纖維膜上角化細胞的生長增殖形貌圖，其反映??了角化細胞在納米纖維膜上生長７天后的細胞的生長形態(tài)，并進一步顯示了細??胞在納米纖維膜上的鋪覆情況。在圖中的低倍鏡下可Ｗ看到，大量的細胞較好??的鋪覆于納米纖維膜上，質(zhì)地均勻且大小統(tǒng)一，同時存在較多的細胞與細胞間??的粗附與復(fù)合體。高倍鏡下圍片中可Ｗ看到，細胞的形態(tài)發(fā)生了轉(zhuǎn)化，普通培??養(yǎng)的懸浮的角化細胞為圓形，而圖中粗附在納米纖維膜上的細胞逐漸轉(zhuǎn)化為梭??形Ｗ及王角形，而且在細胞的表面發(fā)現(xiàn)了非常大量的絨毛及偽足長出，這種??細胞形態(tài)的轉(zhuǎn)化可Ｗ更巧的有助于細胞與納米纖維膜進一步的姑附增殖。說明??了明膠和絲素蛋白的復(fù)合支架可很好的模擬利于細胞生長增殖的細胞外基質(zhì)??的環(huán)境，促進細胞的藉附與增殖，促進細胞的集中，有利于組織的生成。進而??也證明了混合的絲素、明膠納米纖維膜其生物相容性良好

?７ｄ??Ｔｉｍｅ?（ｄ）??圖１．?７巧化細胞在靜電紡納米纖維膜上的生長增殖情況（＊：Ｐ＜０．０５，＊＊：Ｐ＜０．０１）。??１．３．?１．６．?３細胞生長形態(tài)測試??圖１．８為７天后靜電紡納米纖維膜上角化細胞的生長增殖形貌圖，其反映??了角化細胞在納米纖維膜上生長７天后的細胞的生長形態(tài)，并進一步顯示了細??胞在納米纖維膜上的鋪覆情況。在圖中的低倍鏡下可Ｗ看到，大量的細胞較好??的鋪覆于納米纖維膜上，質(zhì)地均勻且大小統(tǒng)一，同時存在較多的細胞與細胞間??的粗附與復(fù)合體。高倍鏡下圍片中可Ｗ看到，細胞的形態(tài)發(fā)生了轉(zhuǎn)化，普通培??養(yǎng)的懸浮的角化細胞為圓形，而圖中粗附在納米纖維膜上的細胞逐漸轉(zhuǎn)化為梭??形Ｗ及王角形，而且在細胞的表面發(fā)現(xiàn)了非常大量的絨毛及偽足長出，這種??細胞形態(tài)的轉(zhuǎn)化可Ｗ更巧的有助于細胞與納米纖維膜進一步的姑附增殖。說明??了明膠和絲素蛋白的復(fù)合支架可很好的模擬利于細胞生長增殖的細胞外基質(zhì)??的環(huán)境

２．?３．?１載藥納米纖維敷料的制備及性質(zhì)考察??２．３．?１．?１黃巧甲昔體化分析方法學(xué)的建立??從圖２．２可Ｗ看出，黃民甲昔在此ＨＰＬＣ條件下，保留時間在６．?５－６．?８分鐘??之間，峰形良好。??＿?化??９－??５０－??Ｉ??皂２５－??０－????＾?＾５?＇??Ｍｉｎ姐的??圖２．２黃巧甲昔標(biāo)準(zhǔn)品的ＨＰＬＣ圖譜。??２．３．?１．２分析方法學(xué)驗證??２．３．?１．２．?１專屬性驗證??２３??
【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 周岳平;張春新;陳貴彬;;磨痂術(shù)配合生物敷料A在四肢深I(lǐng)I度燒傷中的應(yīng)用[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2006年05期

本文編號：2879257