銀納米簇(Ag NCs)是由幾個(gè)至幾百個(gè)銀原子組成,具有超小的尺寸、強(qiáng)大的發(fā)光性能、良好的生物相容性、易于制備等優(yōu)點(diǎn)。近年來(lái),以Ag NCs作為理想探針的熒光分析法已廣泛用于各種重金屬離子、小分子、生物大分子、細(xì)菌等檢測(cè)。這種免標(biāo)記的熒光方法可避免傳統(tǒng)有機(jī)染料的光漂白、容易聚集等缺點(diǎn);也可避免傳統(tǒng)色譜法繁瑣的操作過(guò)程以及精密儀器的使用;另外,所建立的熒光方法還可通過(guò)引入的熒光猝滅劑降低背景信號(hào),實(shí)現(xiàn)高靈敏檢測(cè)靶物。因此,本文通過(guò)制備生物相容的模板包被的Ag NCs,建立簡(jiǎn)便、快速、低成本、高靈敏的熒光“開(kāi)-關(guān)-開(kāi)”策略,并實(shí)現(xiàn)對(duì)人體液及相關(guān)藥物制劑中小分子藥物的檢測(cè)。研究?jī)?nèi)容包括以下兩個(gè)部分:第一部分:基于銅離子介導(dǎo)的銀納米簇探針檢測(cè)阿侖膦酸鈉基于Cu~(2+)介導(dǎo)的Ag NCs探針建立了一種檢測(cè)阿侖膦酸鈉(ALDS)的熒光分析新方法。ALDS是一種重要的治療骨質(zhì)疏松癥的藥物,定量檢測(cè)體液及其相關(guān)制劑中ALDS的含量對(duì)其質(zhì)量控制和提高藥物療效具有重要意義。在此,以DNA為模板合成高發(fā)光性能的DNA-Ag NCs探針(開(kāi)),而Cu~(2+)可選擇性地與DNA-Ag NCs結(jié)合,從而猝滅其熒光(關(guān));當(dāng)加入ALDS后,Cu~(2+)與ALDS間的較強(qiáng)的結(jié)合作用使得DNA-Ag NCs的熒光恢復(fù)(開(kāi))�；谏鲜鲈�,實(shí)現(xiàn)了熒光“開(kāi)-關(guān)-開(kāi)”式策略定量檢測(cè)ALDS,線性范圍為800 pmol/L~200μmol/L,檢測(cè)限低至100 pmol/L。方法簡(jiǎn)便、靈敏度高、檢測(cè)范圍寬,并且可用于人體尿液、血清樣品以及片劑中ALDS的檢測(cè)。第二部分:基于銀納米簇-二氧化錳納米片復(fù)合探針檢測(cè)異煙肼利用Ag NCs-Mn O2納米片的復(fù)合探針建立了一種熒光“開(kāi)-關(guān)-開(kāi)”策略檢測(cè)異煙肼(INH)。INH是一種有效的、不可缺少的基礎(chǔ)抗結(jié)核藥物,已廣泛用于結(jié)核病的防治。INH的治療效果及患者的健康與其藥物劑量密切相關(guān)。因此,檢測(cè)人體體液中的INH濃度及定量檢測(cè)制劑中INH含量對(duì)實(shí)現(xiàn)結(jié)核病的有效治療具有重要意義。在此,以聚甲基丙烯酸鈉(PMAA)為模板合成穩(wěn)定的PMAA-Ag NCs熒光探針(開(kāi)),Mn O2納米片通過(guò)熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)有效地猝滅其熒光(關(guān));當(dāng)引入INH后,Mn O2納米片被還原成Mn2+,熒光再次恢復(fù)(開(kāi))。通過(guò)“開(kāi)-關(guān)-開(kāi)”式熒光檢測(cè)的設(shè)計(jì),可實(shí)現(xiàn)對(duì)INH高靈敏檢測(cè),線性范圍為0.8μmol/L~200μmol/L,檢測(cè)限為476 nmol/L。方法簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高、成本低、環(huán)保。另外,方法還具有較強(qiáng)的實(shí)用性和抗干擾性,可用于人體液和藥物制劑中INH的檢測(cè)。
【學(xué)位單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類(lèi)】：O657.3;TQ460.72;R927
【部分圖文】：

圖 1.1 熒光“開(kāi)-關(guān)-開(kāi)”策略檢測(cè) ALDS 的示意圖Fig. 1.1 Schematic illustration of the fluorescence “on-off-on” strategy for the detection ofALDS. The picture shows the fluorescence of reaction solution under 254-nm irradiation: (nly AgNCs; (2) AgNCs with the addition of 10 μmol/L Cu2+; (3-5) AgNCs-Cu2+complex in tpresence of 20 μmol/L, 200 μmol/L, and 2000 μmol/L of ALDS, respectively..2 DNA-AgNCs 的表征.2.1 DNA-AgNCs 的熒光性質(zhì)對(duì)合成的 DNA-AgNCs 的熒光性質(zhì)進(jìn)行考察，結(jié)果如圖 1.2 A 所示，合成NA-AgNCs 高度分散在水溶液中，在自然光下是無(wú)色透明的。當(dāng)用手提紫外燈發(fā)波長(zhǎng)為 254 nm 照射下，合成的 DNA-AgNCs 顯示出強(qiáng)大的紅色熒光。通過(guò)光譜掃描，DNA-AgNCs 的最大激發(fā)波長(zhǎng)和最大發(fā)射波長(zhǎng)分別位于 590 nm 和 6m。蛋白質(zhì)、核酸、細(xì)胞等生物分子的熒光背景信號(hào)位于發(fā)藍(lán)色熒光的波長(zhǎng)范

圖 1.2 （A）DNA-AgNCs 熒光激發(fā)和發(fā)射光譜圖；插圖：DNA-AgNCs 在日光燈（左）和紫外燈（右）下的照片；（B）DNA-AgNCs 的穩(wěn)定性Fig. 1.2 (A) The excitation and emission spectra of DNA-AgNCs, together with a photograph(inset) of DNA-AgNCs solution under white (left) and UV light (right), respectively; (B) Thestability of DNA-AgNCs.3.2.3 DNA-AgNCs 的 TEM 和 HRTEM 表征TEM 和 HRTEM 用于表征 DNA-AgNCs 的大小和形態(tài)。如圖 1.3 A 所示，合成的 DNA-AgNCs 具有良好的單分散性，DNA-AgNCs 平均尺寸為 2.3 ±0.5 nm。由圖 1.3 B 的 HRTEM 圖清楚地顯示出 DNA-AgNCs 的晶格結(jié)構(gòu)，并且其孿晶界顯示出不同的方向。上述結(jié)果表明，成功合成了尺寸小、單分散性好、發(fā)光性能強(qiáng)的 DNA-AgNCs。

1.2 （A）DNA-AgNCs 熒光激發(fā)和發(fā)射光譜圖；插圖：DNA-AgNCs 在日光燈（左）和外燈（右）下的照片；（B）DNA-AgNCs 的穩(wěn)定性Fig. 1.2 (A) The excitation and emission spectra of DNA-AgNCs, together with a photograp(inset) of DNA-AgNCs solution under white (left) and UV light (right), respectively; (B) Thstability of DNA-AgNCs..2.3 DNA-AgNCs 的 TEM 和 HRTEM 表征TEM 和 HRTEM 用于表征 DNA-AgNCs 的大小和形態(tài)。如圖 1.3 A 所示，的 DNA-AgNCs 具有良好的單分散性，DNA-AgNCs 平均尺寸為 2.3 ±0.5 nm圖 1.3 B 的 HRTEM 圖清楚地顯示出 DNA-AgNCs 的晶格結(jié)構(gòu)，并且其孿晶界出不同的方向。上述結(jié)果表明，成功合成了尺寸小、單分散性好、發(fā)光性能 DNA-AgNCs。
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 張普;王燚;劉忠德;黃承志;;寡聚核苷酸穩(wěn)定銀納米簇?zé)晒馓结樀暮铣杉昂瑤�基藥物的高選擇性分析測(cè)定[J];中國(guó)科學(xué):化學(xué);2011年06期

本文編號(hào)：2837625