目的:制備新型納米給藥系統(tǒng)(心肌靶向肽@槲皮素@介孔羥基磷灰石,PCM@QUE@MHAs),并研究其對心肌細胞的抗氧化作用。方法:采用合成法制備介孔羥基磷灰石(MHAs),MHAs通過介孔中的氫鍵吸附槲皮素(QUE),再通過表面的羥基與靶向肽(PCM)結(jié)合,制備得PCM@QUE@MHAs。采用透射電鏡,動態(tài)光散射儀和Zeta電位分析儀對納米給藥系統(tǒng)進行表征。建立QUE體外高效液相色譜法(HPLC)分析方法,并通過HPLC在體外考察納米粒的釋藥行為。以H9c2心肌細胞作為模型細胞,建立H_2O_2心肌損傷模型,采用MTT實驗測定納米給藥系統(tǒng)的細胞毒性,采用細胞內(nèi)活性氧探針(DCFH-DA)檢測細胞內(nèi)ROS的含量。結(jié)果:PCM@QUE@MHAs的TEM平均粒徑為185.2±5.9 nm,Zeta電位為-16.5±2.9 mV,負載量為25.2%。穩(wěn)定性實驗表明納米粒的粒徑基本沒有變化。通過HPLC法測定QUE濃度,色譜峰的峰形較好,線性關系和精密度良好,符合要求。2 h內(nèi),QUE@MHAs和PCM@QUE@MHAs中的QUE的累積釋放量分別為59.7%和50.3%。細胞實驗表明,MHAs在濃度為5μg/mL時,與H9c2細胞共培養(yǎng)24 h和48 h,其細胞存活率達到95.1%,MHAs在濃度為100μg/mL時,H9c2細胞的存活率達到79.0%。此外,制備的QUE@MHAs和PCM@QUE@MHAs與H9c2細胞共培養(yǎng)24 h和48 h,其細胞存活率均高于90.0%。采用H_2O_2(500μmol/L)處理細胞,建立細胞損傷模型,PCM@QUE@MHAs可使細胞存活率從42.3%增加為85.8%。采用細胞內(nèi)活性氧探針(DCFH-DA)檢測細胞內(nèi)ROS的含量。PCM@QUE@MHAs可使細胞體內(nèi)的DCF平均熒光強度從3557降低為390。結(jié)論:本文制備的納米粒(PCM@QUE@MHAs)粒徑均一,負載量較高,并具有較好的穩(wěn)定性。同時,QUE的HPLC色譜峰峰形較好,靈敏度符合要求,線性關系和精密度良好,符合要求。PCM@QUE@MHAs能減緩藥物的釋放。MHAs具有良好的生物相容性,可以用于藥物輸送,安全性較高。同時,PCM@QUE@MHAs對正常細胞無毒副作用。PCM@QUE@MHAs可顯著提高細胞存活率,對細胞氧化應激損傷有改善作用。PCM@QUE@MHAs可顯著性降低受損心肌細胞(H_2O_2處理)內(nèi)ROS的含量,從而保護受損的心肌細胞。該研究將為納米給藥系統(tǒng)抑制心肌損傷提供理論依據(jù),并為其臨床應用提供實驗依據(jù)。
【學位單位】：湖北科技學院
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R943
【部分圖文】：

備成納米顆粒，可應用于生物醫(yī)藥領域 HA 用于藥物輸送也存在著一些不足，化學聯(lián)合會（IUPAC）的規(guī)定，介孔材料孔材料具有極高的比表面積和孔體積、規(guī)大小連續(xù)可調(diào)等特點，因此介孔材料吸學科研究者的關注。esoporous Hydroxyapatite，MHA）是在HA 可用于輸送小分子藥物和蛋白[6]。與羥基磷灰石（Mesoporous Hydroxyapati中保護藥物不被分解；（2）MHA 具有面官能化等；（3）MHA 能夠?qū)崿F(xiàn)負載

湖北科技學院碩士學位論文值。但其水溶性較差，生物利用度偏低，這些不足都限制了它的臨床應用。鑒性質(zhì)，可通過聚合物膠束[11-13]，脂質(zhì)體[14]，或者其它類型的納米粒[15-17]等輸送而使其更好地發(fā)揮藥理效應。此外，為提高納米輸送載體的靶向性，可在納米載體的表面修飾靶向肽。心靶向肽（PCM，WLSEAGPVVTVRALRGTGSW）是通過噬菌體展示技術篩選一種由 20 個氨基酸組成的多肽化合物。文獻報道，此靶向肽可特異性地與心結(jié)合[18-20]。

QUE@MHAs透射電子顯微鏡圖譜

【參考文獻】

相關期刊論文 前2條

1 張雪梅;騫秀芳;;槲皮素對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用[J];中國藥師;2015年11期

2 王秋紅;匡海學;吳倫;李陽;王知斌;;二氫槲皮素對異丙腎上腺素致大鼠心肌缺血的保護作用[J];中國實驗方劑學雜志;2011年17期

本文編號：2818657