發(fā)布時(shí)間：2020-07-20 12:29

【摘要】：膜蛋白可作為轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、受體、酶及粘附-錨定蛋白,參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、亞細(xì)胞區(qū)室化、膜運(yùn)輸以及蛋白質(zhì)分泌等生物學(xué)過程,并可參與和維持細(xì)胞膜的完整結(jié)構(gòu)。目前已知約70%的藥物靶標(biāo)為膜蛋白,因此對膜蛋白的結(jié)構(gòu)與功能研究有助于加快新藥設(shè)計(jì)與研發(fā)。然而,由于膜蛋白的疏水性強(qiáng)及豐度低等理化性質(zhì)使其成為蛋白質(zhì)組學(xué)研究中有待解決的難點(diǎn)。本文建立了能夠提高膜蛋白檢出率的樣品制備方法,通過結(jié)合高速離心與去污劑抽提使得樣品處理過程相對簡便省時(shí),在提高樣品制備效率的同時(shí)又具有良好的重復(fù)性。我們通過液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法(LC-MS/MS)在分離純化的膜蛋白組分中鑒定到更高比例的膜蛋白、整合膜蛋白和跨膜蛋白(76.6%、48.1%和40.6%),而總蛋白樣品中的對應(yīng)鑒定率分別為41.6%、16.4%和13.5%。本文建立的方法也利于高疏水性和含多次跨膜區(qū)的膜蛋白的鑒定,在膜蛋白組分鑒定到的2106個(gè)蛋白質(zhì)中,GRAVY值0的蛋白質(zhì)為486個(gè)(占23.0%),跨膜區(qū)數(shù)量≥2的蛋白質(zhì)為488個(gè)(占23.1%);通過對膜蛋白組分和總蛋白樣品中共同鑒定到的膜蛋白進(jìn)行分析,我們發(fā)現(xiàn)60.6%的蛋白質(zhì)在膜蛋白組分中具有更高的序列覆蓋率。因此,本文建立了無需依賴超高速離心機(jī)設(shè)備的膜蛋白樣品制備方法,為膜蛋白研究提供了更簡便快速的分析手段。
【學(xué)位授予單位】：華東理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R943

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黃天旭;;空氣懸浮單級高速離心風(fēng)機(jī)節(jié)能可行性分析[J];風(fēng)機(jī)技術(shù);2013年01期

2 翁幼武;劉藝;張琦;;高速離心法在中藥口服制劑工藝中的應(yīng)用[J];中國藥業(yè);2005年11期

3 韋榮干;高速離心在快速病理制片中的應(yīng)用[J];廣西醫(yī)學(xué);2000年04期

4 汪俊漢;微量高速離心法測定纖維蛋白原500例結(jié)果報(bào)告[J];中國血液流變學(xué)雜志;1997年02期

5 徐春茂;;高速離心法消除脂濁對生化結(jié)果的影響[J];現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2007年05期

6 曹人靖;;葉尖間隙對小型高速離心風(fēng)扇氣動(dòng)性能與流場的影響(英文)[J];Transactions of Nanjing University of Aeronautics & Astronau;2005年04期

7 王國棟,李玲;高速離心法替代醇沉法制備流浸膏研究[J];新疆中醫(yī)藥;2001年04期

8 高中良;電動(dòng)高速離心噴霧頭的研究與應(yīng)用[J];農(nóng)機(jī)與食品機(jī)械;1994年03期

9 黃飛,徐龍祥;高速離心干燥機(jī)用電磁軸承控制系統(tǒng)的開發(fā)[J];軸承;2003年10期

10 袁軍婭,張振鵬,張純良;小流量高速離心泵的一種優(yōu)化方法[J];航空動(dòng)力學(xué)報(bào);2002年02期

相關(guān)會(huì)議論文 前4條

1 丁玲;田國文;戴侃;;石油化工用高速離心泵的發(fā)展歷程[A];中國航天第三專業(yè)信息網(wǎng)第三十八屆技術(shù)交流會(huì)暨第二屆空天動(dòng)力聯(lián)合會(huì)議論文集——航天推進(jìn)技術(shù)產(chǎn)業(yè)應(yīng)用[C];2017年

2 張林君;;單級高速離心風(fēng)機(jī)[A];全國小城鎮(zhèn)污水處理技術(shù)（設(shè)備）交流與工程咨詢研討會(huì)論文集（續(xù)集）[C];2003年

3 李紅星;陳活虎;俞基宏;陳池;;單級高速離心風(fēng)機(jī)在350MW燃煤電廠煙氣脫硫中節(jié)能改造與效果分析[A];第九屆（2013）中國鋼鐵年會(huì)論文集[C];2013年

4 支金花;李迅;張海存;盧正欣;張敏;褚巧玲;;0Cr13Ni5Mo焊接接頭疲勞性能研究[A];第四屆數(shù)控機(jī)床與自動(dòng)化技術(shù)高層論壇論文集[C];2013年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 胡祖福;一步高速離心噴霧干燥機(jī)暢銷國內(nèi)外[N];中國食品報(bào);2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 陳玨煒;提高自體脂肪移植效果相關(guān)因素的若干研究[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 周艷婷;基于高速離心和去污劑抽提的膜蛋白樣品制備方法的建立與優(yōu)化[D];華東理工大學(xué);2018年

2 龔偉威;軸承套圈超高速離心磨削的磨削液分析與研究[D];廣州大學(xué);2016年

3 何銓鵬;超高速離心磨削工藝穩(wěn)健性研究[D];廣州大學(xué);2016年

4 楊秀鑫;消防車用高速離心泵的水力特性研究[D];西華大學(xué);2017年

5 彭昌松;羰基合成高速離心壓縮機(jī)干氣密封的研制與應(yīng)用[D];大慶石油學(xué)院;2005年

6 劉曉;基于超高速離心濃縮技術(shù)的HBV低載量樣本檢測體系的初步研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

7 邱團(tuán)輝;高速離心空壓機(jī)葉輪流場分析及性能研究[D];中南大學(xué);2013年

8 王政東;羰基合成高速離心壓縮機(jī)密封改造與可靠性應(yīng)用[D];大慶石油學(xué)院;2005年

9 王紅霞;土壤中溶解性有機(jī)碳、氮及其遷移淋溶特性研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2008年

10 陳義紅;大孔樹脂法與超濾法富集六味地黃中芍藥苷的研究[D];湖南大學(xué);2007年

本文編號：2763442