【摘要】：目的:本論文旨在根據(jù)腺癌細(xì)胞表面過表達(dá)的雌激素受體的特點(diǎn),設(shè)計(jì)并制備一種新型的長(zhǎng)循環(huán)靶向紫杉醇脂質(zhì)體制劑,將藥物特異性的靶向于乳腺癌細(xì)胞,延長(zhǎng)藥物半衰期、提高藥物的生物利用度,減少藥物的毒副作用。并對(duì)改長(zhǎng)循環(huán)靶向紫杉醇脂質(zhì)體制劑的表征、藥代動(dòng)力學(xué)、急性毒性等進(jìn)行研究。方法:(1)利用薄膜水化法制備紫杉醇普通脂質(zhì)體(L-PTX)、紫杉醇長(zhǎng)效靶向脂質(zhì)體(ES-SSL-PTX)制劑,建立了紫杉醇的HPLC含量測(cè)定方法,對(duì)脂質(zhì)體制劑的表征進(jìn)行研究,利用馬爾文Nano-ZS90型粒徑分析儀脂質(zhì)體平均粒徑和Zeta電位,采用低速離心法分離脂質(zhì)體制劑中游離的紫杉醇,以此測(cè)定脂質(zhì)體包封率及載藥量。(2)建立了紫杉醇小鼠生物樣品HPLC分析方法。以ICR小鼠為動(dòng)物模型,進(jìn)行了藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn),檢測(cè)了紫杉醇注射液、紫杉醇普通脂質(zhì)體、紫杉醇長(zhǎng)循環(huán)靶向脂質(zhì)體不同時(shí)間的血藥濃度及在心肝脾肺腎等主要臟器的濃度,統(tǒng)計(jì)分析t_(1/2)、AUC、MRT等藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù),并分析了48小時(shí)內(nèi)三種紫杉醇制劑在小鼠體內(nèi)組織分布情況。(3)以ICR小鼠為模型,進(jìn)行了紫杉醇注射液、紫杉醇普通脂質(zhì)體、紫杉醇長(zhǎng)循環(huán)靶向脂質(zhì)體三種制劑小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)�？疾炝巳N藥物對(duì)ICR小鼠的半數(shù)致死劑量LD_(50)及最大耐受劑量MTD,記錄小鼠給藥后癥狀、體重變化情況、主要血液學(xué)參數(shù)以及不同性別小鼠給藥后的差異,綜合評(píng)價(jià)不同紫杉醇制劑的安全性。結(jié)果:(1)本研究采用薄膜水化法,成功制備了一種含有雌酮靶向片段ES-PEG2000-DSPE及長(zhǎng)效片段DSPE-mPEG2000具有雌激素受體靶向性的紫杉醇長(zhǎng)效脂質(zhì)體制劑,該制備方法簡(jiǎn)單易行,所制得脂質(zhì)體粒徑在120-140nm范圍內(nèi),均一穩(wěn)定,帶有一定的負(fù)電荷,包封率為86%左右,載藥量在6.0%-7.4%之間,包封率與載藥量較高,4℃條件下儲(chǔ)存48小時(shí)釋放率小于10%,有臨床應(yīng)用的潛力。(2)藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示,PTX、L-PTX及ES-SSL-PTX組消除半衰期分別為1.79、2.26、20.98小時(shí)。紫杉醇長(zhǎng)效靶向脂質(zhì)體的消除半衰期分別是游離紫杉醇和紫杉醇普通脂質(zhì)體的11.1倍和9.3倍,消除半衰期顯著延長(zhǎng)。紫杉醇長(zhǎng)效靶向脂質(zhì)體的AUC_(0-∞)為107.69mg/L*h,分別是游離紫杉醇和紫杉醇普通脂質(zhì)體的5.2倍和3.8倍,表明長(zhǎng)效靶向脂質(zhì)體組生物利用度顯著提高。此外,紫杉醇長(zhǎng)效靶向脂質(zhì)體清除速率CL顯著降低,平均駐留時(shí)間MRT顯著延長(zhǎng)。(3)杉醇長(zhǎng)效靶向脂質(zhì)體對(duì)ICR小鼠的LD_(50)值為166.39mg/kg,是紫杉醇注射液的4.6倍,與紫杉醇普通脂質(zhì)體相比也有顯著增高;ICR小鼠對(duì)紫杉醇的最大耐受計(jì)量,紫杉醇注射液是20mg/kg,而紫杉醇普通脂質(zhì)體及長(zhǎng)循環(huán)靶向脂質(zhì)體提高至80mg/kg,這說明長(zhǎng)循環(huán)靶向脂質(zhì)體制劑能夠有效降低紫杉醇注射液的毒副作用。結(jié)論:根據(jù)乳腺癌細(xì)胞高度表達(dá)雌激素受體這一特性,本實(shí)驗(yàn)以雌激素受體為靶點(diǎn),成功制備一種長(zhǎng)循環(huán)靶向紫杉醇脂質(zhì)體制劑(ES-SSL-PTX)。建立了紫杉醇生物樣品的HPLC檢測(cè)方法,并對(duì)該制劑進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)和急性毒性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,相對(duì)于紫杉醇注射液和普通脂質(zhì)體制劑,ES-SSL-PTX能夠顯著延長(zhǎng)藥物半衰期,增加其體內(nèi)循環(huán)時(shí)間,提高生物利用度,降低其毒副作用。ES-SSL-PTX能夠顯著改善紫杉醇的藥代動(dòng)力學(xué)性能,避免原溶媒的過敏反應(yīng)并減小藥物毒副作用,有應(yīng)用于臨床的潛力。
【圖文】：

W/WL×100％ 計(jì)算。ES-SSL-PTX 制劑分別于 4 ℃和室溫下保存，，分出 50μL 脂質(zhì)體，加入 350μL PBS，1000rpm 離 法測(cè)定上清中 PTX 濃度，記為 Cn（n 為不同時(shí)滲漏率=（1-Cn/C0）×100%。標(biāo)，滲漏率為縱坐標(biāo)，繪制穩(wěn)定性曲線。論P(yáng)LC 檢測(cè)方法，PTX 的最大紫外吸收波長(zhǎng)為 λ=227nm，與藥作為 HPLC 檢測(cè)波長(zhǎng)。

第 2 章 脂質(zhì)體制備及表征2.3.1.2 專屬性考察結(jié)果如圖 2.2 所示，在 2.2.1.2 色譜條件下，紫杉醇保留時(shí)間為 4.6 min，磷脂等物質(zhì)的峰在 2min，對(duì)紫杉醇檢測(cè)無干擾，紫杉醇峰形較好，與雜質(zhì)峰分離度好（R>1.5），理論塔板數(shù)、對(duì)稱因子等均符合高效液相色譜檢測(cè)要求。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R943;R96

【參考文獻(xiàn)】

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1 張志強(qiáng);鐘春蕾;趙欣;;iRGD肽修飾阿霉素脂質(zhì)體的理化性質(zhì)和對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖抑制作用的初步研究[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2015年06期

本文編號(hào)：2672474