發(fā)布時(shí)間：2020-04-20 13:41

【摘要】：向日葵(Helianthus annuus L.)在我國(guó)種植廣泛,其葵籽是油料產(chǎn)物的主要來(lái)源之一,但花盤、葉、莖稈等副產(chǎn)品一般僅作為飼料、燃料或廢棄物處理,既污染環(huán)境又浪費(fèi)資源。研究顯示,向日葵的花盤中含有豐富的果膠。果膠是一類富含半乳糖醛酸的酸性多糖,主要存在于植物細(xì)胞壁中,具有抗腫瘤、抗氧化以及免疫調(diào)節(jié)等多種生物學(xué)活性。高溫修飾果膠是將果膠進(jìn)行高溫高壓處理,得到分子量較小的果膠片段以及其它一些小分子成分。分子量較小的果膠有利于人體吸收且具有多種藥理活性,受到越來(lái)越多的關(guān)注。因此,本文從向日葵的花盤中提取出果膠,并進(jìn)行了高溫處理,研究高溫修飾前、后向日葵盤果膠的抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)活性。本文參考實(shí)驗(yàn)室前期的研究結(jié)果,從向日葵的花盤中提取出果膠(HAP)。單糖組成分析結(jié)果顯示HAP含有半乳糖醛酸(GalA,79.9%),將HAP進(jìn)行高溫處理,得到了高溫修飾的向日葵盤果膠(Heat-treated HAP,HT-HAP)。采用細(xì)胞存活以及荷瘤小鼠模型實(shí)驗(yàn)比較了HAP和HT-HAP的體外和體內(nèi)抗腫瘤活性。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示,HAP對(duì)幾種不同腫瘤細(xì)胞的存活均無(wú)抑制作用,而HT-HAP顯著抑制腫瘤細(xì)胞的存活。體內(nèi)抗腫瘤活性結(jié)果顯示,HAP對(duì)黑色素瘤細(xì)胞B16F10和結(jié)腸癌細(xì)胞CT26的生長(zhǎng)沒(méi)有抑制作用,而HT-HAP顯著抑制這兩種腫瘤的生長(zhǎng)。HT-HAP是由果膠片段和DHCP樣小分子組成的混合物,為了研究HT-HAP抗腫瘤活性的有效成分,本文分別研究了果膠片段和DHCP樣小分子的抗腫瘤活性。并采用western blot、流式細(xì)胞術(shù)、內(nèi)皮細(xì)胞遷移和成管實(shí)驗(yàn)研究HT-HAP抗腫瘤活性的作用機(jī)制。結(jié)果顯示,HT-HAP中具有抗腫瘤活性的有效成分是DHCP樣小分子,其作用機(jī)制與其降低Akt的活化及抑制血管生成相關(guān)。研究了HAP和HT-HAP對(duì)荷瘤小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用,發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)高溫修飾后得到的HT-HAP能夠顯著提高荷瘤小鼠的胸腺指數(shù),促進(jìn)NK和巨噬細(xì)胞的活化。進(jìn)一步研究其有效成分,結(jié)果顯示果膠片段和DHCP樣小分子均發(fā)揮了一定的作用,但果膠片段的作用更為明顯。為了充分研究HT-HAP的免疫調(diào)節(jié)作用,本文研究了HT-HAP對(duì)正常小鼠和環(huán)磷酰胺(CTX)誘導(dǎo)的免疫抑制小鼠的免疫調(diào)節(jié)影響。結(jié)果顯示,HT-HAP能顯著提高免疫抑制小鼠的脾臟和胸腺指數(shù),促進(jìn)NK和T淋巴細(xì)胞的活化。綜上所述,向日葵盤果膠對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)沒(méi)有抑制作用,而經(jīng)過(guò)高溫修飾后能夠明顯地抑制腫瘤生長(zhǎng)、增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。HT-HAP中具有抗腫瘤活性的有效成分是DHCP樣小分子,具有提高免疫活性的有效成分主要為果膠片段。急性毒性結(jié)果顯示高溫修飾向日葵盤果膠不具有毒性。本文的研究結(jié)果為向日葵副產(chǎn)品的利用以及開發(fā)向日葵盤果膠為功能性食品的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
【圖文】：

果膠由于植物的種類、生長(zhǎng)環(huán)境以及提取方法的不同而具有很大的差異性。雖然果膠的結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜，但是大多數(shù)的果膠都含有類似的結(jié)構(gòu)區(qū)域（圖1-1）。具體包括以下幾種：圖 1-1 果膠結(jié)構(gòu)示意圖[8]

東北師范大學(xué)博士學(xué)位論文乳糖醛酸乳糖醛酸（Homogalacturonan，HG），是果膠中的主要結(jié)構(gòu)，約占果膠總由 α-1，，4-D-GalA 組成（圖 1-2）[9]。在檸檬果膠、甜菜果膠和蘋果果膠膠至少由 72~100 個(gè) GalA 殘基組成[10]。GalA 的 C-6 位羧基可被甲酯化[11 C-3 位羥基可被乙�；痆9]。不同來(lái)源的植物，GalA 發(fā)生的甲酯化和乙�；�。在果膠的研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，果膠的甲酯化對(duì)果膠的性質(zhì)有很大的影響。有連續(xù) 10 個(gè) GalA 沒(méi)有甲酯化，GalA 會(huì)與鈣離子絡(luò)合，以保持果膠結(jié)構(gòu)此外，除了甲酯化的數(shù)量，甲酯化發(fā)生的位置對(duì)果膠的性質(zhì)也有很大的影
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R915

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2634603