【摘要】：目的:多酪氨酸激酶抑制劑索拉非尼(SOR,sorafenib)激酶抑制劑,被批準(zhǔn)用于腎細(xì)胞癌、肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)及 FLT3-ITD 陽(yáng)性 AML(急性髓性白血病)的治療,可顯著提升肝癌晚期患者的總體生存率。但價(jià)格昂貴長(zhǎng)期使用易誘導(dǎo)耐藥,限制了 SOR的臨床使用。因此,增強(qiáng)SOR藥物敏感性是當(dāng)前抗癌治療的難題之一。已知,當(dāng)SOR與PI3K抑制劑組合使用時(shí),可顯著增強(qiáng)索拉非尼抗癌作用。并且有報(bào)道顯示青蒿琥酯(ARS,artesunate)可通過(guò)作用于PI3K/mTOR信號(hào)通路發(fā)揮抗癌作用。本文旨在明確青蒿琥酯對(duì)索拉非尼的抗癌增敏作用,并探討其相應(yīng)的分子機(jī)制。方法:1.應(yīng)用MTS測(cè)得對(duì)照(CON,control)SOR、ARS及SOR+ARS組系列濃度的OD值,計(jì)算每組IC50值,并確定SOR/ARS聯(lián)合使用比例。2.用臺(tái)盼藍(lán)染色分別統(tǒng)計(jì)CON、SOR、ARS及其聯(lián)合組的活、死細(xì)胞數(shù),進(jìn)一步驗(yàn)證SOR與ARS聯(lián)合用藥對(duì)腫瘤增殖的抑制作用。3.通過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CON、SOR、ARS、SOR+ARS聯(lián)用對(duì)SK-HEP1(人肝腹水腺癌細(xì)胞)及HN30(人頭頸鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞)細(xì)胞遷移的改變。4.PI-ANNXIN V雙染后流式儀檢測(cè)SOR、ARS及SOR+ARS對(duì)SK-HEP1及HN30細(xì)胞凋亡情況的影響。5.流式細(xì)胞技術(shù)驗(yàn)證SOR、ARS及聯(lián)合對(duì)SK-HEP1及HN30細(xì)胞周期是否存在阻滯作用。6.Western blot 法檢測(cè) SOR、ARS、SOR+ARS 各組的 p-mTOR,,p-ERK,p-AKT等蛋白的蛋白表達(dá)水平。7.采用Graphad 7.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,IC50計(jì)算采用Sigmoidal dose-response法,兩組間計(jì)量數(shù)據(jù)比較采用two-tailed Student's t檢驗(yàn)法。結(jié)果:MTS實(shí)驗(yàn)提示SOR,ARS聯(lián)用組對(duì)SK-HEP1,HN30細(xì)胞增殖的抑制作用顯著高于單獨(dú)用藥組且伴隨濃度依賴效應(yīng),且CI1;SK-HEP1和HN30細(xì)胞中SOR+ARS聯(lián)合組凋亡率高于其他組(P0.05);劃痕試驗(yàn)結(jié)果表明,SOR+ARS聯(lián)合組的劃痕愈合率變慢,低于SOR、ARS刺激組。SOR+ARS聯(lián)合用藥無(wú)明顯誘導(dǎo)細(xì)胞周期改變作用。Western Blot結(jié)果表明,ARS+SOR聯(lián)合用藥組可顯著下調(diào)HN30細(xì)胞及Sk-hep1細(xì)胞中p-AKT和p-ERK等蛋白的表達(dá)水平。結(jié)論:在SK-HEP1及HN30細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)中ARS與SOR聯(lián)合用藥有正向協(xié)同作用,并可顯著增強(qiáng)對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖和遷移的抑制效果,促進(jìn)誘導(dǎo)SK-HEP1及HN30細(xì)胞的凋亡。ARS與SOR通過(guò)聯(lián)合抑制PI3K/mTOR及MAPK/ERK信號(hào)通路誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。本研究可能為增強(qiáng)抗腫瘤藥物SOR敏感性及減弱其副作用提供了新的思路。
【圖文】：

圖１：邐ＨＣＣ及其靶信號(hào)通路的分子靶向治療

圖２：索拉非尼（ＳＯＲ）和青蒿琥酯聯(lián)合對(duì)ＳＫ－ＨＥＰ１細(xì)胞增殖的影響逡逑Ｆｉｇ２邋：邋Ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ邋ｔｒｅａｔｍｅｎｔ邋ｗｉｔｈ邋ｓｏｒａｆｅｎｉｂ邋（ＳＯＲ）邋ａｎｄ邋Ａｒｔｅｓｕｎａｔｅ邋ｏｎ邋ｃｅｌｌ逡逑ｇｒｏｗｔｈ邋ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ＳＫ－ＨＥＰ１：逡逑－－
【學(xué)位授予單位】：安徽理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R96

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 朱江川;;青蒿琥酯治療兒童瘧疾療效觀察[J];中國(guó)藥物與臨床;2012年10期

2 劉旭;抗瘧藥青蒿琥酯的研究[J];藥學(xué)進(jìn)展;1999年01期

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本文編號(hào)：2588767