【摘要】：乳腺癌是全球女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤之一,成為威脅女性健康的殺手。如何在診斷腫瘤發(fā)生的同時又能夠治療癌癥成為當今研究的熱點。納米粒子具有多重成像、基因治療、攜帶藥物等多種功能,成為診療一體化的重要載體。在本研究中,通過改良后的St?ber法合成的Fe3O4@SiO2(FITC)納米粒子具有低毒性,良好的生物相容性和可再修飾性等優(yōu)點。使用TEOS與APS-FITC共同水解的方法將熒光染料FITC和Fe3O4共同包裹在核殼型硅納米粒子內(nèi)部,形成平均直徑為64 nm的Fe3O4@SiO2(FITC)納米粒子,這種納米粒子具有熒光成像與核磁共振成像雙重成像功能。通過靜電吸引作用將PEI-FA包裹在Fe3O4@SiO2(FITC)納米粒子表面,形成Fe3O4@SiO2(FITC)/PEI-FA納米粒子,粒子zeta電位由-12.2±1.87 mV變?yōu)?17.5±1.32 mV,且修飾后的Fe3O4@SiO2(FITC)/PEI-FA納米粒子仍然具有良好的熒光特性與超順磁性,能夠吸附帶有負電的Notch-1 shRNA形成Fe3O4@SiO2(FITC)/PEI-FA/Notch-1shRNA納米復合載體,這種載體能夠保護Notch-1 shRNA在血清中和DNaseI中不被降解。通過倒置熒光顯微鏡和共聚焦顯微鏡共同證明Fe3O4@SiO2(FITC)/PEI-FA納米粒子對葉酸受體高表達的MDA-MB-231細胞有明顯的靶向性,封閉細胞膜表面的葉酸受體后,能夠降低細胞對Fe3O4@SiO2(FITC)/PEI-FA納米粒子的內(nèi)吞效率,由此證明MDA-MB-231細胞對Fe3O4@SiO2(FITC)/PEI-FA納米粒子內(nèi)吞部分是由葉酸受體介導的。裝載有Notch-1 shRNA的納米載體能夠在細胞內(nèi)沉默Notch-1基因,通過抑制Notch-1蛋白表達促進腫瘤細胞凋亡,抑制腫瘤細胞的增殖,實現(xiàn)對乳腺癌的治療。Fe3O4@SiO2(FITC)/PEI-FA/Notch-1shRNA納米復合物能夠靶向腫瘤部位,在腫瘤部位具有熒光/MRI雙成像功能,且能抑制腫瘤生長,這種多功能納米載體在醫(yī)學上有著非常重要的應用價值。
【圖文】：

然是一個非常復雜的問題，，需要進一步了解研究納米載體的被動靶向遞送過程[22近日，主動靶向納米載體傳遞系統(tǒng)越來越受到人們的關(guān)注，主動靶向納米體傳遞通常是指使用特殊配體、受體使納米載體和腫瘤細胞相結(jié)合。在納米載上修飾配體能夠增加細胞對粒子的內(nèi)吞能力[23]。例如使用葉酸修飾納米載體，酸進入細胞主要包括兩種途徑，在腫瘤中細胞膜表面葉酸受體高表達，葉酸與酸受體結(jié)合作為葉酸進入腫瘤細胞的主要途徑[24]；相反，非腫瘤細胞中則使用同的路徑，葉酸的還原形式被跨膜轉(zhuǎn)運進入細胞。由于葉酸分子的腫瘤特異性可以讓葉酸分子與腫瘤細胞表面過表達的葉酸受體結(jié)合，葉酸復合物通過內(nèi)化用形成內(nèi)吞小體，將復合物帶入到細胞質(zhì)內(nèi)，然后將載體上藥物、基因在細胞內(nèi)釋放并發(fā)揮其生物學作用，實現(xiàn)腫瘤的靶向治療[25]。有效的受體配體結(jié)合方式需要以下幾個關(guān)鍵因素。一、病理細胞膜表面的原/受體需要過渡表達；二、受體必須均勻有效的分布在細胞膜表面；三、靶向配體能夠與受體特異性的結(jié)合，同時，配體的密度也是至關(guān)重要的。另外，腫作為生物系統(tǒng)，能夠積極調(diào)節(jié)特定的生物標志物的表達以應對連有抗體的納米粒，因此納米顆粒在參與介腫瘤導生物效應方面發(fā)揮積極作用。

5圖 1-2 RNAi 原理hRNA(short hairpin RNA)：是小發(fā)卡或短發(fā)卡 RNA，包括兩個反向重復一莖環(huán)(loop)序列分隔組成的發(fā)卡結(jié)構(gòu)。當 shRNA 表達載體送入動核膜內(nèi)表達成 shRNA，因為載體中包含有的 U6 啟動子能夠確保 shR，從而使基因的沉默可被遺傳。shRNA 被 Dicer 酶剪切成 siRNA，i 通道處理，siRNA 解旋成單鏈 RNA 形成基因沉默復合物 RISC，該復到目的基因的 mRNA 上并將其降解。利用 shRNA 特異性抑制癌基因或突變基因的過度表達，使這些基因保持在靜寂或休眠狀態(tài)，從作用，但是 shRNA 的轉(zhuǎn)染效率低、組織穿透性弱、非特異性作用等技術(shù)的發(fā)展。
【學位授予單位】：電子科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R96;R943

【相似文獻】

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1 李穎;攜帶Notch-1 shRNA的核殼型靶向磁性熒光納米粒子的構(gòu)筑及抗腫瘤效應研究[D];電子科技大學;2014年

本文編號：2573157