發(fā)布時間：2019-09-12 14:23

【摘要】：目的：觀察PGIS-PGI2-IP信號通路在全腦缺血再灌注腦損傷大鼠海馬中的時程表達變化特征，以及IP激動劑貝前列素鈉對全腦缺血再灌注致大鼠腦損傷的保護作用。 方法：采用夾閉雙側(cè)頸總動脈合并低血壓的方法建立大鼠全腦缺血再灌注腦損傷模型。多普勒激光腦血流儀監(jiān)測大鼠在缺血再灌注手術(shù)過程中的腦血流變化。分別在再灌注30min、2h、6h、24h、48h、7d和15d時觀察SOD活性，MDA與PGI2含量，PGIS與IP表達變化。貝前列素鈉（50，100ug·kg-1）術(shù)前30min灌胃給藥。水迷宮檢測大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力，HE染色觀察大鼠海馬神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)變化；黃嘌呤氧化酶法，TBA法分別測定大鼠海馬中SOD活性，MDA含量變化；ELISA測定大鼠海馬PGI2含量，RT-PCR檢測大鼠海馬PGIS與IP mRNA表達情況。 結(jié)果：全腦缺血大鼠腦血流降低74.45%。與假手術(shù)組相比，全腦缺血再灌注大鼠尋臺潛伏期，尋臺路徑顯著增加；海馬神經(jīng)元出現(xiàn)明顯核固縮，細胞層次紊亂，，神經(jīng)細胞數(shù)目明顯減少，并隨再灌注時間延長而損傷加重；全腦缺血再灌注大鼠海馬SOD活性降低，MDA含量增加，PGI2含量明顯增加；PGIS與IP mRNA表達明顯增加。與模型組相比較，貝前列素鈉能明顯改善大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力；減輕大鼠海馬神經(jīng)元損傷；升高海馬SOD活性，降低MDA含量；明顯降低海馬PGI2含量，抑制海馬PGIS及IP mRNA表達。 結(jié)論： PGIS-PGI2-IP信號通路可能參與了大鼠全腦缺血再灌注致腦損傷過程。貝前列素鈉對全腦缺血再灌注大鼠腦損傷具有明顯的保護作用，其機制可能涉及調(diào)控PGIS-PGI2-IP信號通路平衡。
【圖文】：

MDA 含量(nmol/mg protein)=（測定管吸光度值-測定空白管吸光度值）/（標(biāo)準(zhǔn)管吸光度值-標(biāo)準(zhǔn)空白管吸光度值）×標(biāo)準(zhǔn)品濃度（10 nmol/ml）/蛋白含量（mgprotein/ml）。1.2.7 PGI2含量測定每組各取 4 只大鼠用于 PGI2含量測定，PGI2易被代謝為較穩(wěn)定但無生物活性的 6-keto-PGF1α，因而用 6-keto-PGF1α的含量間接反映海馬組織中 PGI2含量變化，用 ELISA 法測定大鼠海馬組織中 6-keto-PGF1α含量，具體操作按照說明書進行，步驟如下：1.2.7.1 制備 0.5%海馬組織勻漿液將海馬組織從-80 ℃取出，海馬稱重后按質(zhì)量體積比 1∶199 加入 EIAbuffer，勻漿，于 4 ℃，1200×g，離心 15 min，分取上清液備用。1.2.7.2 海馬組織中 6-keto-PGF1α含量測定（1）用 EIAbuffer 稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，具體操作如下：

GIS、IP 的光密度值，分別用 PGIS、IP 與 β-actin 的光密度比值A(chǔ) 的相對表達量。分析Quantity One 分析 PCR 結(jié)果，Image-Pro Plus 6.0 分析 HE 結(jié)果x±s 表示，SPSS17.0 進行統(tǒng)計學(xué)處理，用單因素 ANOVA 分析Dunnett’s t 進行分析，以 P<0.05 為有顯著性差異。IR 大鼠腦血流變化缺血處理前，基線血流設(shè)定為 100%，當(dāng)微型動脈夾夾閉雙側(cè)迅速降低，在全腦缺血 20 min 過程中，CBF 較基線下降 74.45%，血流迅速回升至基線血流的 75.60%±6.14%（圖 2）。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R965

【參考文獻】

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本文編號：2535189