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新型羧甲基殼聚糖包裹C-藻藍(lán)蛋白負(fù)載CD59配體的靶向納米微球的制備及其對HeLa細(xì)胞的殺傷作用

發(fā)布時間:2019-06-24 21:20
【摘要】:目的:制備一種新型的C-藻藍(lán)蛋白(C-phycocyanin,C-PC)靶向納米微球(nanometer microspheres,NPs),并探究其對He La細(xì)胞的靶向治療作用。方法:采用離子交聯(lián)法制備靶向羧甲基殼聚糖(carboxymethyl chitosan,CMC)納米載藥顆粒C-PC/CMC-NPs;響應(yīng)面優(yōu)化法篩選出最佳制備條件,并用透射電鏡、激光粒度儀觀察納米載藥顆粒的表征;MTT法檢測靶向納米顆粒C-PC/CMC-CD59sp-NPs對人宮頸癌HeLa細(xì)胞生長的影響;溶血實驗檢測C-PC/CMC-CD59sp-NPs的組織相容性及安全性;Western blotting和免疫組化法分別檢測C-PC/CMC-CD59sp-NPs對HeLa細(xì)胞內(nèi)活化的Caspase-3/PARP蛋白和Bcl-2蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果:成功制備C-PC/CMC納米微球,透射電鏡觀察到納米微球呈現(xiàn)出規(guī)則的球形,分散均勻,其粒徑約為160 nm。最佳制備條件:羧甲基殼聚糖濃度為2.0 mg/ml,CaCl_2濃度為1.0 mg/ml,粒徑約為120 nm的球形,包封率為(62±5)%;CMC與C-PC投藥量為3∶1,載藥量為(20±3)%;C-PC/CMC-NPs體外表現(xiàn)出緩釋特征,在120 h內(nèi)pH=5.4和7.4條件下,釋放率分別達(dá)到80%和60%;同時未出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。C-PC/CMC-CD59sp-NPs對HeLa細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用,促進(jìn)活化的Caspase-3/PARP蛋白的表達(dá),抑制Bcl-2蛋白的表達(dá)(均P0.05)。結(jié)論:新型靶向納米藥物C-PC/CMCCD59sp-NPs能在體外抑制HeLa細(xì)胞的生長,誘導(dǎo)其凋亡。為海洋藥物的研發(fā)提供了新的思路,對靶向納米藥物的進(jìn)一步研究提供理論基礎(chǔ)。
[Abstract]:Aim: to prepare a new type of C-phycocyanin (C 鈮,

本文編號:2505377

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