【摘要】：本文建立了一種運用近紅外光譜法（near infrared spectroscopy，NIRS）結(jié)合偏最小二乘法（partial least squares，PLS）高通量、高選擇性測定還原型谷胱甘肽（reduced glutathione，GSH）片中雜質(zhì)氧化型谷胱甘肽（oxidizedglutathione，GSSG）及片劑抗張強(qiáng)度（radial tensilestrength，RTS）的方法。為了建立和評價預(yù)測模型，采用優(yōu)化的測量參數(shù)，準(zhǔn)確測量了330片還原型谷胱甘肽片的近紅外漫反射和透射光譜。在GSSG或RTS的分析過程中，進(jìn)行了近紅外漫反射光譜（nearinfrared diffuse reflectance spectrum，NIR-DRS）和近紅外透射光譜（nearinfrared transmittance spectrum，NIR-TS）的篩選，校正集和預(yù)測集的合理篩分，采用化學(xué)計量學(xué)技術(shù)對光譜進(jìn)行預(yù)處理。在選擇了建模光譜范圍和去除異常光譜后，用最佳的主因子數(shù)建立模型。用校正集均方根誤差（root mean square error of calibration，RMSEC）、交叉驗證均方根誤差（root mean square error of cross validation，RMSECV）、預(yù)測集均方根誤差（root mean square error of prediction，RMSEP）、校正集的相關(guān)系數(shù)（correlation coefficient of calibration，Rc）和預(yù)測集的相關(guān)系數(shù)（correlation coefficient of prediction，Rp）對所建模型的性能進(jìn)行評價。結(jié)果表明，所建立的近紅外分析模型性能優(yōu)良。因此可證明NIRS結(jié)合PLS可同時地、選擇性地、快速無損地分析還原型谷胱甘肽片中的雜質(zhì)GSSG的含量和片劑物理參數(shù)RTS，盡管片劑中主藥GSH的含量非常高，而雜質(zhì)GSSG的含量很低。此策略可作為對常用的藥物制劑中主要成分的近紅外光譜法在線分析的一個重要補(bǔ)充，同時也擴(kuò)展了近紅外光譜法在高通量和高選擇性分析方向的運用。 目的： 1.建立還原型谷胱甘肽片中主要雜質(zhì)GSSG含量的NIR-DRS快速測定法，用于質(zhì)量控制。 2.建立還原型谷胱甘肽片物理參數(shù)RTS的NIR-DRS快速測定法，用于質(zhì)量控制。 方法： 1.還原型谷胱甘肽片近紅外光譜的測量 將片劑一面放置于FT-NIR光譜儀的積分球附件檢測窗，用片劑漫透射采樣附件調(diào)節(jié)片劑位置使固定于檢測窗中心，同時采集樣品的NIR-DRS和NIR-TS。然后，采用同樣的方式對片劑另一面進(jìn)行光譜測量。所有的光譜測量均采用下述測量條件。分辨率：8cm-1；掃描次數(shù)：64；掃描范圍：漫反射光譜10000 4000cm-1，透射光譜10000 6000cm-1；溫度：約25；濕度：（55±5）%RH。每次測量前掃描并扣除背景以避免空氣中水蒸氣和二氧化碳的影響。 2.還原型谷胱甘肽片中GSSG含量參考值的測定 用高效液相色譜法（high performance liquid chromatography，HPLC）測定，并按外標(biāo)法計算GSSG的含量參考值。色譜柱：C18柱（Phenomenex Gemini,250mm4.6mm,5μm），柱溫：30，流動相：甲醇-緩沖液（10mmol/L庚烷磺酸鈉水溶液，50mmol/L磷酸二氫鈉水溶液,用磷酸調(diào)節(jié)pH至3.0）（4:96, v/v），流速：1mL/min，檢測波長：210nm，進(jìn)樣量：20μL。根據(jù)ICH-Q2(R1)中分析方法的驗證標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行方法學(xué)驗證。 3.還原型谷胱甘肽片RTS參考值的測定 用游標(biāo)卡尺測量每片樣品的直徑（t）和厚度（D），用片劑硬度測試儀測定每片樣品的硬度（F），然后根據(jù)公式（1）計算每片樣品的RTS參考值。(1) 4.建立基于NIR-DRS的GSSG含量的PLS預(yù)測模型并對模型進(jìn)行驗證 對NIR-DRS和NIR-TS進(jìn)行選擇，然后合理的篩分校正集和預(yù)測集，采用化學(xué)計量學(xué)技術(shù)對光譜進(jìn)行預(yù)處理。在選擇了建模光譜范圍和去除異常光譜后，用最佳的主因子數(shù)建立基于NIR-DRS的GSSG預(yù)測模型。用RMSEC、RMSECV、RMSEP、Rc和Rp對所建模型的性能進(jìn)行評價。 5.建立基于NIR-DRS的RTS的PLS預(yù)測模型并對模型進(jìn)行驗證 對NIR-DRS和NIR-TS進(jìn)行選擇，然后合理的篩分校正集和預(yù)測集，采用化學(xué)計量學(xué)技術(shù)對光譜進(jìn)行預(yù)處理。在選擇了建模光譜范圍和去除異常光譜后，用最佳的主因子數(shù)建立基于NIR-DRS的RTS預(yù)測模型。用RMSEC、RMSECV、RMSEP、Rc和Rp對所建模型的性能進(jìn)行評價。 結(jié)果： 1.近紅外光譜的測量 得到330片還原型谷胱甘肽片樣品的660張NIR-DRS和660張NIR-TS。 2.氧化型谷胱甘肽含量參考值的測定 GSH和GSSG的分離度符合要求。GSSG的濃度（0.44 16.34μg/mL）和峰面積之間呈良好的線性關(guān)系，回歸方程A=16.85C-0.823（A為對照品峰面積，C對照品濃度）R2=1。平均回收率為100.3%（n=9），RSD為1.3%。方法學(xué)驗證結(jié)果表明，HPLC可準(zhǔn)確測定GSSG的含量。 測得186個還原型谷胱甘肽片樣品的GSSG含量參考值范圍為15.81 22.20mg/g。 3.抗張強(qiáng)度參考值的測定 測得318個還原型谷胱甘肽片樣品的RTS參考值范圍為270.76 1145.14kPa。 4. GSSG預(yù)測模型性能評價 最優(yōu)的GSSG預(yù)模型中，RMSEC、RMSECV和RMSEP分別為0.575、0.729和0.607mg/g，Rc和Rp分別為0.9173和0.9182。預(yù)測集參考值和預(yù)測值呈良好的線性關(guān)系，回歸方程y=0.8614x+2.6982。 5. RTS預(yù)測模型性能評價 最優(yōu)的RTS預(yù)測模型中，RMSEC、RMSECV和RMSEP分別為58.2、61.3和69.0kPa，Rc和Rp分別0.9393和0.9151。預(yù)測集參考值和預(yù)測值呈良好的線性關(guān)系，回歸方程y=0.8211x+113.3224。 結(jié)論： 所建方法可高通量無損快速地測定還原型谷胱甘肽片中主要雜質(zhì)GSSG的含量和片劑的RTS。所建模型具有低的預(yù)測誤差，，以及較高的相關(guān)系數(shù)。表明NIR-DRS結(jié)合PLS可高通量選擇性的測定還原型谷胱甘肽片中低含量的GSSG和片劑的物理參數(shù)RTS。此策略亦可用于片劑生產(chǎn)過程的在線監(jiān)控。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R917

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 盧薇;谷胱甘肽的化學(xué)與醫(yī)療作用[J];化學(xué)教育;2004年01期

2 鐘隆欣,陳惠虹,黃鎮(zhèn)奎;還原型谷胱甘肽治療藥物性急性腎損害[J];廣東醫(yī)學(xué);2003年10期

3 王多加,周向陽,金同銘,胡祥娜,鐘嬌娥,吳啟堂;近紅外光譜檢測技術(shù)在農(nóng)業(yè)和食品分析上的應(yīng)用[J];光譜學(xué)與光譜分析;2004年04期

4 全彩娟;周明浩;張菊紅;吉春風(fēng);;還原型谷胱甘肽治療急性有機(jī)磷中毒引起的心肌損害[J];中國臨床醫(yī)學(xué);2012年01期

5 王春,嚴(yán)偉民;注射用還原型谷胱甘肽質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法——HPLC法的建立與驗證[J];中國臨床藥學(xué)雜志;2005年03期

6 張莉;周金池;;近紅外光譜檢測技術(shù)及其在木材工業(yè)中的應(yīng)用[J];林業(yè)機(jī)械與木工設(shè)備;2010年09期

7 張勇;叢茜;謝云飛;趙冰;;NIRS分析技術(shù)在農(nóng)業(yè)中的應(yīng)用進(jìn)展[J];農(nóng)業(yè)工程學(xué)報;2007年10期

8 劉梅;陸倫根;竇愛霞;陳尉華;鄭瑞丹;曾民德;房靜遠(yuǎn);;還原型谷胱甘肽對人肝星狀細(xì)胞增殖和氧應(yīng)激及轉(zhuǎn)化生長因子β1表達(dá)的影響[J];中華消化雜志;2007年10期

9 劉沙;李tR;王麗瓊;易珍奎;范琦;;偏最小二乘-近紅外漫反射光譜法測定還原型谷胱甘肽片[J];中國醫(yī)藥工業(yè)雜志;2010年11期

10 席秀芳;趙秀川;;谷胱甘肽的藥理與臨床[J];中國醫(yī)學(xué)文摘.內(nèi)科學(xué);2004年01期

本文編號：2371664