【摘要】：目的細胞高通量篩選發(fā)現(xiàn)苯并噻唑衍生物BD960具有免疫抑制活性,文中探討B(tài)D960抑制T細胞增殖的作用機制。方法免疫磁珠純化人外周血T細胞,Anti-CD3/CD28m Abs或同種異型抗原活化T細胞。流式細胞術(shù)檢測BD960對活化T細胞的增殖抑制作用、靜息T細胞的細胞毒性作用、CD25表達及細胞周期。酶聯(lián)免疫吸附法測定BD960對活化T細胞分泌IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A及IFN-γ等細胞因子的影響。結(jié)果 BD960抑制Anti-CD3/CD28 m Abs或同種異型抗原刺激的T細胞增殖,IC50分別為(2.3±0.3)μmol/L和(2.5±0.3)μmol/L,且濃度達100μmol/L也不影響靜息T細胞和PBMC的存活。Anti-CD3/CD28 m Abs刺激T細胞72 h表達的CD25比為69.7%,BD960在(0.625、2.5、10)μmol/L均不抑制活化T細胞表達CD25,而0.1μmol/L FK506可抑制CD25表達低至9.4%�；罨�96 h的T細胞,G0/G1期細胞比為58.5%。BD960能阻滯細胞周期于G0/G1期,并隨著濃度的提高G0/G1比例增大。BD960在(0.625、2.5、10)μmol/L能抑制活化T細胞分泌IFN-γ、IL-6和IL-17并呈劑量依賴效應(yīng),但不影響IL-2、IL-4和IL-10。結(jié)論 BD960抑制作用在T細胞增殖為細胞活化的后期,同時抑制IL-6、IL-17A和IFN-γ等促炎細胞因子的分泌,抑制作用不同于FK506。BD960有望作為先導(dǎo)化合物開發(fā)新型免疫抑制劑。
[Abstract]:Objective to identify the immunosuppressive activity of benzothiazole derivative BD960 by high throughput screening. The mechanism of BD960 inhibiting T cell proliferation was discussed in this paper. Methods T cells were purified from human peripheral blood by immunomagnetic beads and activated by Anti-CD3/CD28m Abs or alloantigen. The effects of BD960 on the proliferation of activated T cells, the cytotoxicity of resting T cells, the expression of CD25 and the cell cycle were detected by flow cytometry. Enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) was used to determine the effect of BD960 on the secretion of cytokines such as IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-17A and IFN- 緯 by activated T cells. Results BD960 inhibited the proliferation of T cells stimulated by Anti-CD3/CD28 m Abs or alloantigen, IC50 was (2.3 鹵0.3) 渭 mol/L and (2.5 鹵0.3) 渭 mol/L, respectively. The concentration of 100 渭 mol/L did not affect the survival of resting T cells and PBMC. The CD25 ratio of Anti-CD3/CD28 m Abs stimulated T cells for 72 h was 69.7% and BD960 did not inhibit the expression of CD25, by activated T cells at (0.625 渭 mol/L) 渭 mol/L. 0. 1 渭 mol/L FK506 could inhibit the expression of CD25 as low as 9. 4%. When T cells were activated for 96 h, 58.5%.BD960 could block the cell cycle in G0/G1 phase. The ratio of G0/G1 increased with increasing concentration. BD960 at (0.625 渭 mol/L) 渭 mol/L inhibited the release of IFN- 緯, IL-6 and IL-17 from activated T cells in a dose-dependent manner, but did not affect IL-2,IL-4 and IL-10.. Conclusion BD960 inhibits T cell proliferation at the late stage of cell activation and inhibits the secretion of proinflammatory cytokines such as IL-6,IL-17A and IFN- 緯. The inhibitory effect is different from that of FK506.BD960 in the development of novel immunosuppressants.
【作者單位】： 成都醫(yī)學(xué)院檢驗醫(yī)學(xué)院;成都醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)院;成都醫(yī)學(xué)院科研實驗中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81273530;81302786;81402944) 四川省高�？蒲袆�(chuàng)新團隊(13TD0028) 四川省教育廳科研項目(15ZB0233;15ZB0235)
【分類號】：R96

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 俞敬;何宋兵;朱新國;;濾泡輔助T細胞與腫瘤的研究進展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2014年04期

【二級參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 劉增慧;李勇華;肖揚;;CD4~+CD25~+調(diào)節(jié)性T細胞在骨髓造血系統(tǒng)疾病中的研究進展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2011年01期

2 沈成龍;何宋兵;趙華;汪良;;輔助性T細胞17相關(guān)細胞因子與結(jié)腸癌的研究進展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2013年04期

3 馬志遠;謝玉梅;王宇;馬力;何瑜;張穎;連建奇;郭永紅;賈戰(zhàn)生;;外周血CD4~+CXCR5~+濾泡輔助性T細胞與慢性乙型肝炎患者高球蛋白血癥相關(guān)[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;2013年05期

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 盧瑤;王獻慧;李淑艷;;一種新的以影像為基礎(chǔ)的細胞增殖和細胞毒性檢測方法[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2014年08期

2 孫愛華;毛亞飛;嚴杰;;葡萄球菌腸毒素A促白細胞增殖與抗腫瘤活性的研究現(xiàn)狀[J];江西醫(yī)學(xué)檢驗;2005年06期

3 蔣燕靈;林茂芳;黃河;;霉酚酸影響T細胞增殖及細胞因子表達的體外實驗[J];中國病理生理雜志;2007年06期

4 趙敏;王洪新;崔蕾;;δ阿片受體激活誘導(dǎo)心肌細胞增殖的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑[J];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志;2007年05期

5 張桂英,冷愛民,賀智敏,唐麗安;消炎痛抑制人結(jié)腸癌細胞增殖和誘導(dǎo)凋亡的研究[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;1998年12期

6 謝正南;劉定勝;曹維克;鄧之奎;李玉峰;;塞來昔布聯(lián)合干擾素α對K562細胞增殖、凋亡、細胞周期和CD117表達的影響[J];中國實驗血液學(xué)雜志;2010年02期

7 鄒本澤;崔文海;;維生素A與癌癥[J];藥學(xué)情報通訊;1985年01期

8 徐晶晶;高靜;戴小敏;李靜;李文峗;王朝暉;姚其正;;新合成的7-氮雜異靛藍抑制A549細胞增殖的作用及可能機制[J];中國細胞生物學(xué)學(xué)報;2010年02期

9 王凡,李愛冬,羊惠君,王修杰,江凌,李瑞祥;轉(zhuǎn)化生長因子-β對骺軟骨細胞增殖和PCNA表達的影響[J];華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2000年04期

10 劉進;余小平;舒茂;羅興燕;郭波;劉陽;林治華;鄒強;;苯并咪唑衍生物BM935抑制T細胞增殖的機制研究[J];中國藥理學(xué)通報;2013年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 馬e，

本文編號：2370779