【摘要】：目的：研究17β-雌二醇(E2)對(duì)去卵巢小鼠子宮組織Dll1基因表達(dá)水平的影響。 方法：①將40只成年雌性小鼠分為4組(實(shí)驗(yàn)過(guò)程中死亡8只)，分別為Normal（正常對(duì)照）、Sham+NS（假手術(shù)+生理鹽水）、OVX+NS（去卵巢造模+生理鹽水）和OVX+E2（去卵巢造模+17β-雌二醇）；其中Normal組無(wú)任何干預(yù)；Sham+NS組僅切去卵巢附近少許性腺脂肪組織，給予相應(yīng)體積生理鹽水干預(yù)；OVX+NS組手術(shù)切去雙側(cè)卵巢組織，并給予相應(yīng)體積生理鹽水；OVX+E2組去雙側(cè)卵巢，每2天每千克體重給予1次E2，每次1mg，干預(yù)10d。②造模所切“卵巢”標(biāo)本進(jìn)行10%福爾馬林固定，常規(guī)脫水，透明，浸蠟，包埋制成蠟塊，，石蠟連續(xù)切片，進(jìn)行HE染色。光學(xué)顯微鏡觀察拍照，驗(yàn)證是否為小鼠卵巢；ELISA檢測(cè)造模前后，及生理鹽水和E2干預(yù)后血清雌激素濃度前后變化，驗(yàn)證造模是否成功和E2干預(yù)是否進(jìn)入血液循環(huán)起到生物學(xué)作用。造模干預(yù)10d后，取全部小鼠的雙側(cè)子宮組織，稱濕重，計(jì)算子宮系數(shù)，分析E2對(duì)小鼠子宮重量的影響。③采用TRIzol一步法提取總RNA，特異性引物對(duì)目標(biāo)基因Dll1和內(nèi)參基因Gapdh目標(biāo)片段進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物1.5%瓊脂糖凝膠電泳，運(yùn)用FR-200A全自動(dòng)紫外與可見(jiàn)分析裝置觀察電泳結(jié)果并拍照，采用QuantityOne-4.6.2凝膠分析軟件對(duì)Dll1基因與Gapdh基因的目標(biāo)帶進(jìn)行半定量分析，測(cè)定Normal組、Sham+NS組、OVX+NS組和OVX+E2組Dll1基因與Gapdh基因目標(biāo)帶的光強(qiáng)度(Adj.Vol.)值；運(yùn)用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)分析軟件得到4個(gè)組別的目的基因與內(nèi)參基因目標(biāo)帶Adj.Vol.比值（x±s），進(jìn)行單因素方差分析，然后進(jìn)行組間均數(shù)的兩兩比較，以確定組間差異是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果：①HE染色石蠟切片結(jié)果顯示造模所切組織確為卵巢及輸卵管組織；ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示OVX+NS和OVX+E2組共17例小鼠血清雌激素水平造模后較造模前顯著下降Z＝-3.479，P=0.001，P0.05，提示造模成功；OVX+E2組在E2干預(yù)10d后，血清雌激素水平較Normal、Sham+NS、OVX+NS組顯著上升，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。OVX+E2組小鼠子宮系數(shù)顯著大于其余3組，且差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。②在生物電泳圖像分析系統(tǒng)中觀察到全部標(biāo)本均出現(xiàn)目的基因Dll1與內(nèi)參基因Gapdh的目標(biāo)帶，Normal組、Sham+NS組、OVX+NS組和OVX+E2組目的基因Dll1與內(nèi)參基因Gapdh光強(qiáng)度比值分別為0.33±0.12、0.36±0.08、0.30±0.12和0.78±0.11。采用單因素方差分析，得出4個(gè)組別間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F＝35.580，P＝0.000，P0.05）；組間兩兩比較，結(jié)果顯示OVX+E2組的Adj.Vol.的比值Dll1/Gapdh （x±s）顯著大于其余3組（P＝0.000），且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。即可說(shuō)明4組間Dll1基因表達(dá)水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，OVX+E2組Dll1基因表達(dá)水平顯著高于Normal組、Sham+NS組和OVX+NS組。 結(jié)論：持續(xù)高水平E2干預(yù)可顯著增加小鼠子宮系數(shù)，誘發(fā)子宮組織異常增生；同時(shí)誘導(dǎo)Dll1基因表達(dá)水平升高，導(dǎo)致Notch信號(hào)通路異常激活，可能是雌激素依賴性子宮組織異常增生甚至癌變的分子病理基礎(chǔ)，其作用機(jī)制及意義有待于進(jìn)一步研究。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R965

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 陳紅菊;尹伶;;子宮肌瘤病因?qū)W的研究進(jìn)展[J];實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué);2012年06期

2 楊蕾;秦占芬;蔣湘寧;徐曉白;;雌激素致乳腺癌機(jī)制的研究進(jìn)展[J];腫瘤防治研究;2006年11期

本文編號(hào)：2351473