【摘要】：采用琥珀酸將N,N-二甲基乙二氨偶聯(lián)到膽固醇上,合成新型的陽(yáng)離子膽固醇衍生物——N-(N′,N′-二甲基)乙基丁二酸單膽固醇酯單酰胺(DC-CHEMS),并考察其作為基因載體的可行性.以DC-CHEMS和磷脂為膜材采用薄膜分散法制備脂質(zhì)體,透射電鏡顯示其形態(tài)規(guī)整,粒徑均勻;激光粒度測(cè)定儀測(cè)得其平均粒徑為136nm,Zeta電位為25mV.瓊脂糖凝膠電泳顯示當(dāng)+/-電荷比大于4∶1時(shí),脂質(zhì)體能將DNA完全結(jié)合,且能保護(hù)DNA免受DNase I酶的降解.溶血試驗(yàn)和MTT細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果顯示,所得脂質(zhì)體具有較低的毒性.細(xì)胞攝取和基因轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)表明:所得脂質(zhì)體能顯著促進(jìn)HepG2細(xì)胞對(duì)F-ODN的攝取;當(dāng)+/-電荷比為1∶1,1∶2時(shí),基因轉(zhuǎn)染效果強(qiáng)于市售的轉(zhuǎn)染試劑Lipfectamine汶2000.因此,DC-CHEMS作為基因載體,具備了高效低毒的優(yōu)勢(shì),值得進(jìn)一步的深入研究.
[Abstract]:A new kind of cationic cholesterol derivative N- (N-) -dimethyl) ethyl succinate monoamide (DC-CHEMS) was synthesized by using succinic acid (Succinic acid) to couple N-dimethyl-ethylenediamine to cholesterol. The feasibility of N- (N-) -dimethyl-ethylenediamine (DC-CHEMS) as a gene carrier was investigated. Liposomes were prepared by membrane dispersion method using DC-CHEMS and phospholipid as membrane materials. The morphology of liposomes was uniform by transmission electron microscope, and the average particle size of liposomes was 136nmPe (25mV) measured by laser particle size analyzer. Agarose gel electrophoresis showed that when the /-charge ratio was greater than 4:1, the liposome could bind DNA completely and protect DNA from DNase I degradation. The results of hemolysis test and MTT cytotoxicity test showed that the liposomes had lower toxicity. The results of cell uptake and gene transfection showed that the liposomes could significantly promote the uptake of F-ODN in HepG2 cells, and when the ratio of / to charge was 1: 1: 1: 2, the effect of gene transfection was better than that of the marketable transfection reagent Lipfectamine Wen2000. Therefore, as a gene vector, DC-CHEMS has the advantages of high efficiency and low toxicity, which is worthy of further study.
【作者單位】： 浙江工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81102396)
【分類號(hào)】：R944

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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4 要e，

本文編號(hào)：2275785