【摘要】：抗血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)抗體Fab片段能夠抑制VEGF的促血管生成作用,在糖尿病性黃斑水腫等眼科疾病的治療中有重要的應(yīng)用價(jià)值。在基因工程中大腸埃希菌(Escherichia coli)是Fab片段蛋白的主要表達(dá)系統(tǒng),然而Fab片段往往會(huì)在大腸埃希菌內(nèi)形成不可溶的包涵體,而不具有生物活性。本研究從引入分子伴侶、重組蛋白誘導(dǎo)表達(dá)的溫度、時(shí)間等方面入手,進(jìn)行系統(tǒng)優(yōu)化,使絕大部分Fab蛋白可以分泌到大腸埃希菌周質(zhì)中,大大提高了抗VEGF抗體Fab片段的可溶性表達(dá)效率和生物學(xué)活性,為其工業(yè)生產(chǎn)奠定基礎(chǔ),同時(shí)也為其他種類重組Fab分子的可溶性表達(dá)提供借鑒。
[Abstract]:The anti-vascular endothelial growth factor (VEGF) antibody Fab fragment can inhibit the angiogenesis of VEGF and has important application value in the treatment of diabetic macular edema and other ophthalmic diseases. In genetic engineering, Escherichia coli (Escherichia coli) is the main expression system of Fab fragment protein. However, Fab fragment often forms insoluble inclusion bodies in Escherichia coli and has no biological activity. In this study, the molecular chaperones, the temperature and time of expression induced by recombinant proteins were introduced to optimize the expression system, so that most of the Fab proteins could be secreted into the periplasmic tissues of Escherichia coli. The soluble expression efficiency and biological activity of Fab fragment of anti VEGF antibody were greatly improved, which laid a foundation for its industrial production and provided reference for the soluble expression of other kinds of recombinant Fab molecules.
【作者單位】： 上海交通大學(xué)藥學(xué)院細(xì)胞工程及抗體藥物教育部工程研究中心;
【分類號(hào)】：R915

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本文編號(hào)：2243089