【摘要】：目的對大鼠Pig-a基因突變試驗(yàn)方法進(jìn)行優(yōu)化,并初步探討陽性誘變劑N-乙基-N-亞硝基脲(ENU)在該實(shí)驗(yàn)中的時(shí)-效關(guān)系和量-效關(guān)系。方法 30只雄性SD大鼠隨機(jī)平均分為5組,即溶劑對照組,ENU10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg和80mg/kg 4個(gè)劑量組,連續(xù)3d經(jīng)口灌胃染毒。分別于實(shí)驗(yàn)第0、15、30、45、60、75、90天尾靜脈取血,分離紅細(xì)胞,經(jīng)Anti-CD59-APC和SYTO 13核酸染料標(biāo)記后采用流式細(xì)胞儀分析CD59表型突變?yōu)槌墒旒t細(xì)胞(RBCCD59-)率、CD59表型突變?yōu)榫W(wǎng)織紅細(xì)胞(RETCD59-)率以及RET占總紅細(xì)胞百分率。結(jié)果 ENU各組大鼠在染毒后第15~90天的RBCCD59-率呈現(xiàn)隨時(shí)間和劑量反應(yīng)性地增高。RETCD59-率隨時(shí)間延長,ENU各組表現(xiàn)為先增后基本穩(wěn)定伴小幅波動(dòng)趨勢,但均保持在較高水平,在染毒后30d出現(xiàn)最高峰,在45d時(shí)出現(xiàn)下降;同時(shí),隨著ENU劑量的增加,ENU各組RETCD59-率也隨之增加。隨時(shí)間延長,ENU各組大鼠RET百分率有所下降,30d后呈現(xiàn)較為穩(wěn)定的輕微波動(dòng),5組間RET%在各時(shí)間點(diǎn)處差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論本研究改良的大鼠Pig-a基因突變試驗(yàn)可進(jìn)行快速檢測,ENU短期(3d)染毒誘導(dǎo)大鼠紅細(xì)胞Pig-a基因突變具有時(shí)-效關(guān)系和量-效關(guān)系。
[Abstract]:Objective to optimize the mutagenesis test of rat Pig-a gene, and to explore the time-effect and dose-effect relationships of the positive mutagens N- ethyl-N-nitrosourea (ENU) in this experiment. Methods Thirty male SD rats were randomly divided into five groups: the solvent control group (n = 10) and the control group (n = 40 mg 路kg ~ (-1) and 80mg/kg (n = 4). The rats were given oral administration of ENU10 mg 路kg ~ (-1) / kg ~ (40 mg / kg) and 80mg/kg for 3 days. The red blood cells were isolated from the tail vein on the 90th day of the experiment. After labeling with Anti-CD59-APC and SYTO 13 nucleic acid dyes, the percentage of CD59 phenotypic mutation to mature erythrocyte (RBCCD59-), CD59 phenotype mutation to reticulocyte (RETCD59-) and the percentage of RET to total erythrocyte were analyzed by flow cytometry. Results the rate of RBCCD59- increased with time and dose reactivity at 1590 days after exposure to ENU. The results showed that the rate of RBCCD59- increased first, then stabilized and fluctuated slightly, but remained at a high level. The peak appeared at 30 days after exposure and decreased at 45 days, and the RETCD59- rate increased with the increase of ENU dose. There was no significant difference in the percentage of RET between the five groups at each time point after 30 days of decrease in the percentage of RET. Conclusion the modified rat Pig-a gene mutation test can be used for rapid detection of Pig-a gene mutation in red blood cells of rats induced by short term (3 d) exposure to Pig-a, which has a time-effect relationship and a dose-effect relationship.
【作者單位】： 四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院四川省食品安全監(jiān)測與風(fēng)險(xiǎn)評估重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(No.81030053);國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(No.81573197)資助
【分類號】：R99

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 印木泉;SOS試驗(yàn)規(guī)范化的幾個(gè)問題[J];癌變.畸變.突變;1989年00期

2 黃吉武;人類成纖維細(xì)胞體外轉(zhuǎn)化結(jié)合基因突變試驗(yàn)方法[J];中國公共衛(wèi)生學(xué)報(bào);1996年06期

3 張銘;周長慧;常艷;王征;涂宏剛;李婕;;體內(nèi)Pig-a基因突變試驗(yàn)高通量方法聯(lián)合驗(yàn)證研究[J];癌變.畸變.突變;2013年05期

4 張銘;周長慧;黃鵬程;涂宏剛;常艷;王征;;大鼠Pig-a基因突變試驗(yàn)高通量方法的建立和驗(yàn)證[J];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志;2013年03期

5 郭亞杰;王亞男;張立實(shí);;TK基因突變試驗(yàn)檢測葉綠素的抗誘變性[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2006年06期

6 張銘;周長慧;王慶利;常艷;;體內(nèi)Pig-a基因突變試驗(yàn)方法的開發(fā)[J];世界臨床藥物;2012年11期

7 馮繼農(nóng),高們,賴紅巖;V79細(xì)胞基因突變試驗(yàn)的應(yīng)用研究[J];癌變.畸變.突變;1993年06期

8 姜薇;陳士杰;;HPRT基因突變試驗(yàn)在環(huán)境衛(wèi)生中的應(yīng)用進(jìn)展[J];浙江預(yù)防醫(yī)學(xué);2007年10期

9 王怡凈;張立實(shí);;用tk基因突變試驗(yàn)評價(jià)長春新堿和秋水仙堿的遺傳毒性[J];衛(wèi)生研究;2006年02期

10 黃吉武;人類成纖維細(xì)胞的體外細(xì)胞轉(zhuǎn)化結(jié)合基因突變試驗(yàn)法[J];癌變.畸變.突變;1995年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 李彥;廖雪;王捷;李夢茹;;體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因突變試驗(yàn)操作方法改良[A];中國毒理學(xué)會(huì)第五次全國學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2009年

2 朱慶;谷麗維;肖珍;彭雙清;;一種新的檢測體細(xì)胞突變的體內(nèi)試驗(yàn)方法介紹[A];低碳生活與健康損害論壇——中國環(huán)境誘變劑學(xué)會(huì)風(fēng)險(xiǎn)評價(jià)專業(yè)委員會(huì)全國第十三屆學(xué)術(shù)會(huì)議暨第四屆第5次委員會(huì)會(huì)議論文集[C];2011年

3 李巖;霍嬌;張立實(shí);;Pig-a基因突變試驗(yàn)研究與應(yīng)用進(jìn)展[A];中國毒理學(xué)會(huì)第六屆全國毒理學(xué)大會(huì)論文摘要[C];2013年

4 張銘;周長慧;黃鵬程;涂宏剛;常艷;王征;;大鼠Pig-a基因突變試驗(yàn)高通量方法的建立和驗(yàn)證[A];2013年（第三屆）中國藥物毒理學(xué)年會(huì)暨藥物非臨床安全性評價(jià)研究論壇論文摘要[C];2013年

5 張銘;周長慧;黃鵬程;涂宏剛;常艷;王征;;大鼠Pig-a基因突變試驗(yàn)高通量方法的建立和驗(yàn)證[A];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

6 帥培強(qiáng);張立實(shí);王怡凈;;TK基因突變試驗(yàn)——兩種方法的比較研究[A];四川省營養(yǎng)學(xué)會(huì)2002年學(xué)術(shù)會(huì)議專題報(bào)告及論文摘要匯編[C];2002年

7 潘虹;鄒思穎;蔡木易;張立實(shí);;用TK基因突變試驗(yàn)評價(jià)大豆低聚肽的抗誘變性[A];中國毒理學(xué)會(huì)第五次全國學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2009年

8 鄧中平;;WTK1細(xì)胞用于tk基因突變試驗(yàn)檢測誘變劑的誘變性[A];中國藥理學(xué)會(huì)毒理專業(yè)委員會(huì)第十次學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2004年

9 施暢;馬華智;石富江;孫艷麗;于永生;王全軍;丁日高;;一套不同遺傳終點(diǎn)短期遺傳毒性試驗(yàn)組合方法的建立[A];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

10 鄒思穎;潘虹;張立實(shí);;用TK基因突變試驗(yàn)評價(jià)三種海洋生物肽的抗誘變性[A];中國環(huán)境誘變劑學(xué)會(huì)第14屆學(xué)術(shù)交流會(huì)議論文集[C];2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 帥培強(qiáng);TK基因突變試驗(yàn)—三種人類淋巴母細(xì)胞的比較及兩類突變集落形成的機(jī)理研究[D];四川大學(xué);2005年

2 王亞男;長春花堿和秋水酰胺誘導(dǎo)TK基因突變的比較研究及兩類突變集落機(jī)制研究[D];四川大學(xué);2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 姜薇;用四種體外試驗(yàn)方法評價(jià)長春新鹼誘發(fā)的人淋巴細(xì)胞的遺傳損傷[D];浙江大學(xué);2008年

，

本文編號：2235480