【摘要】：目的對(duì)大鼠Pig-a基因突變?cè)囼?yàn)方法進(jìn)行優(yōu)化,并初步探討陽(yáng)性誘變劑N-乙基-N-亞硝基脲(ENU)在該實(shí)驗(yàn)中的時(shí)-效關(guān)系和量-效關(guān)系。方法 30只雄性SD大鼠隨機(jī)平均分為5組,即溶劑對(duì)照組,ENU10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg和80mg/kg 4個(gè)劑量組,連續(xù)3d經(jīng)口灌胃染毒。分別于實(shí)驗(yàn)第0、15、30、45、60、75、90天尾靜脈取血,分離紅細(xì)胞,經(jīng)Anti-CD59-APC和SYTO 13核酸染料標(biāo)記后采用流式細(xì)胞儀分析CD59表型突變?yōu)槌墒旒t細(xì)胞(RBCCD59-)率、CD59表型突變?yōu)榫W(wǎng)織紅細(xì)胞(RETCD59-)率以及RET占總紅細(xì)胞百分率。結(jié)果 ENU各組大鼠在染毒后第15~90天的RBCCD59-率呈現(xiàn)隨時(shí)間和劑量反應(yīng)性地增高。RETCD59-率隨時(shí)間延長(zhǎng),ENU各組表現(xiàn)為先增后基本穩(wěn)定伴小幅波動(dòng)趨勢(shì),但均保持在較高水平,在染毒后30d出現(xiàn)最高峰,在45d時(shí)出現(xiàn)下降;同時(shí),隨著ENU劑量的增加,ENU各組RETCD59-率也隨之增加。隨時(shí)間延長(zhǎng),ENU各組大鼠RET百分率有所下降,30d后呈現(xiàn)較為穩(wěn)定的輕微波動(dòng),5組間RET%在各時(shí)間點(diǎn)處差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論本研究改良的大鼠Pig-a基因突變?cè)囼?yàn)可進(jìn)行快速檢測(cè),ENU短期(3d)染毒誘導(dǎo)大鼠紅細(xì)胞Pig-a基因突變具有時(shí)-效關(guān)系和量-效關(guān)系。
[Abstract]:Objective to optimize the mutagenesis test of rat Pig-a gene, and to explore the time-effect and dose-effect relationships of the positive mutagens N- ethyl-N-nitrosourea (ENU) in this experiment. Methods Thirty male SD rats were randomly divided into five groups: the solvent control group (n = 10) and the control group (n = 40 mg 路kg ~ (-1) and 80mg/kg (n = 4). The rats were given oral administration of ENU10 mg 路kg ~ (-1) / kg ~ (40 mg / kg) and 80mg/kg for 3 days. The red blood cells were isolated from the tail vein on the 90th day of the experiment. After labeling with Anti-CD59-APC and SYTO 13 nucleic acid dyes, the percentage of CD59 phenotypic mutation to mature erythrocyte (RBCCD59-), CD59 phenotype mutation to reticulocyte (RETCD59-) and the percentage of RET to total erythrocyte were analyzed by flow cytometry. Results the rate of RBCCD59- increased with time and dose reactivity at 1590 days after exposure to ENU. The results showed that the rate of RBCCD59- increased first, then stabilized and fluctuated slightly, but remained at a high level. The peak appeared at 30 days after exposure and decreased at 45 days, and the RETCD59- rate increased with the increase of ENU dose. There was no significant difference in the percentage of RET between the five groups at each time point after 30 days of decrease in the percentage of RET. Conclusion the modified rat Pig-a gene mutation test can be used for rapid detection of Pig-a gene mutation in red blood cells of rats induced by short term (3 d) exposure to Pig-a, which has a time-effect relationship and a dose-effect relationship.
【作者單位】： 四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院四川省食品安全監(jiān)測(cè)與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(No.81030053);國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(No.81573197)資助
【分類號(hào)】：R99

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本文編號(hào)：2235480