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瑞舒伐他汀抑制血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化的機(jī)制研究

發(fā)布時間:2018-09-04 12:55
【摘要】:目的研究瑞舒伐他汀是否可以抑制大鼠主動脈血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)表型轉(zhuǎn)化及其機(jī)制。方法 SD大鼠主動脈VSMCs原代細(xì)胞培養(yǎng)鑒定,取4~7代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。用不同濃度的瑞舒伐他汀干預(yù)VSMCs,Western blot檢測各組標(biāo)本中骨骼肌肌動蛋白(SM-actin)、平滑肌22α(SM-22α)、滑肌肌球蛋白重鏈(SMMHC)、骨橋蛋白(OPN)的表達(dá),噻唑藍(lán)(MTT)法檢測細(xì)胞增殖情況,劃痕試驗(yàn)觀察細(xì)胞遷移情況。通過免疫組織化學(xué)法(ICC)檢測SM-actin的表達(dá)從而觀察VSMC的形態(tài)。轉(zhuǎn)染過表達(dá)KLF-4或空白對照質(zhì)粒至離體培養(yǎng)的VSMCs中,用瑞舒伐他汀干預(yù),并采用上述實(shí)驗(yàn)方法檢測VSMCs表型轉(zhuǎn)化情況。結(jié)果 MTT結(jié)果顯示,與對照組比較,瑞舒伐他汀組VSMCs增殖能力降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。劃痕試驗(yàn)結(jié)果顯示,與對照組比較,他汀組VSMCs遷移減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Western blot檢測顯示,與對照組比較,他汀組VSMCs中SM-22α、SM-MHC、OPN表達(dá)增多,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。ICC結(jié)果顯示,與對照組VSMCs的細(xì)胞形態(tài)比較,他汀組VSMCs形態(tài)變細(xì)、變長。轉(zhuǎn)染KLF-4過表達(dá)質(zhì)粒后,與對照組比較,轉(zhuǎn)染KLF-4過表達(dá)質(zhì)?梢栽黾覸SMCs的增殖和遷移,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),逆轉(zhuǎn)他汀對VSMCs表型轉(zhuǎn)化有抑制作用。結(jié)論瑞舒伐他汀通過下調(diào)KLF-4,抑制大鼠主動脈VSMCs表型轉(zhuǎn)化。
[Abstract]:Aim to investigate whether recuvastatin can inhibit (VSMCs) phenotypic transformation of rat aortic vascular smooth muscle cells (VSMCs) and its mechanism. Methods the primary cells of SD rat aortic VSMCs were cultured and identified, and 4 ~ 7 passage cells were used in the experiment. The expression of skeletal muscle actin (SM-actin), smooth muscle 22 偽 (SM-22 偽), skid myosin heavy chain (SMMHC), osteopontin (OPN) and cell proliferation were detected by VSMCs,Western blot with different concentrations of rosuvastatin. Cell migration was observed by scratch test. The expression of SM-actin was detected by immunohistochemical (ICC) to observe the morphology of VSMC. KLF-4 or blank control plasmids were transfected into VSMCs cultured in vitro and treated with rosuvastatin. The phenotypic transformation of VSMCs was detected by the method mentioned above. Results MTT results showed that compared with the control group, the proliferative ability of VSMCs was decreased in rosuvastatin group, the difference was statistically significant (P0.05). The results of scratch test showed that compared with the control group, the migration of VSMCs in statin group decreased, the difference was statistically significant (P0.05). Western blot detection showed that the expression of SM-22 偽 -SM-MHC-OPN in VSMCs of statins group was higher than that in control group, the difference was statistically significant (P0.05) .ICC results showed that the expression of SM-MHC-OPN in statins group was significantly higher than that in control group (P0.05). Compared with the control group, the morphology of VSMCs in statin group was thinner and longer than that in control group. After transfection of KLF-4 overexpression plasmid, compared with the control group, transfection of KLF-4 overexpression plasmid could increase the proliferation and migration of VSMCs, the difference was statistically significant (P0.05), reversing the effect of statins on VSMCs phenotypic transformation. Conclusion Risuvastatin inhibits the phenotypic transformation of rat aortic VSMCs by down-regulating KLF-4,.
【作者單位】: 鄭州大學(xué)附屬鄭州市中心醫(yī)院心血管內(nèi)科;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科;
【分類號】:R965

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號:2222165

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