【摘要】：目的將凍存的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UC-MSCs)制備成一種復(fù)蘇后可直接用于臨床的制劑,并進(jìn)行質(zhì)量檢定。方法從種子細(xì)胞庫復(fù)蘇凍存的UC-MSCs,待細(xì)胞培養(yǎng)至P3代時,收集UC-MSCs,按照4×107/劑的規(guī)格加入含5%人血白蛋白、10%DMSO、85%復(fù)方電解質(zhì)溶液的細(xì)胞保護(hù)液,形成制劑,并對其進(jìn)行質(zhì)量檢定,包括無菌檢測、支原體檢測、細(xì)胞內(nèi)外源致病因子檢測、內(nèi)毒素檢測、免疫表型檢測、穩(wěn)定性檢測、異常免疫學(xué)反應(yīng)檢測以及殘留物檢測。結(jié)果制備的UC-MSCs制劑無菌、無支原體污染,無內(nèi)外致病因子,毒素2 EU,能抑制異源淋巴細(xì)胞的增殖,抑制率隨臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞數(shù)量增加而增大。牛血清殘留50 ng/袋,制劑凍存前細(xì)胞活性90%,復(fù)蘇后活性85%。結(jié)論按照此方法制備的UC-MSCs制劑符合臨床治療要求的質(zhì)量檢定標(biāo)準(zhǔn)。
[Abstract]:Objective To prepare a kind of cryopreserved human umbilical cord mesenchymal stem cells (UC-MSCs) for clinical use after resuscitation and to test its quality.Methods The cryopreserved UC-MSCs were resuscitated from the seed cell bank and collected at P3 passage. The UC-MSCs were added with 5% human serum albumin, 10% DMSO and 85% compound electrolyte according to the specifications of 4 *107/dose. Results The preparation of UC-MSCs was sterile, free from Mycoplasma contamination, free from internal and external contamination, and free from endotoxin, immunophenotype, stability, abnormal immunological reaction and residue. Pathogenic factor, toxin 2 EU, can inhibit the proliferation of heterologous lymphocytes, and the inhibition rate increases with the increase of umbilical cord mesenchymal stem cells. The residual 50 ng/bag of bovine serum, 90% of the cell activity before freezing and 85% of the cell activity after resuscitation of the preparation are found.
【作者單位】： 成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院細(xì)胞生物治療中心干細(xì)胞與免疫細(xì)胞生物醫(yī)藥技術(shù)國家地方聯(lián)合工程實驗室云南省細(xì)胞治療技術(shù)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)重點實驗室云南省干細(xì)胞工程實驗室 昆明市干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué)研究重點實驗室;
【基金】：國家科技支撐計劃項目(2014BI01B0) 國家973計劃項目(2012CB5181060) 云南省科技計劃重點項目(2013CA005)
【分類號】：R943

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本文編號：2189375