【摘要】：麥胚球蛋白是一種優(yōu)質(zhì)蛋白,在改善身體機(jī)能和消除炎癥方面有著重要的研究價(jià)值。麥胚球蛋白的開發(fā)利用及提取都屬于小麥精深加工領(lǐng)域。本課題從麥胚球蛋白的水洗鹽提、體外生物活性分析、創(chuàng)面組織修復(fù)效果評(píng)估進(jìn)行較為全面的研究,旨在為麥胚資源的高附加值利用提供較系統(tǒng)的理論基礎(chǔ),為進(jìn)一步開發(fā)功能性保健品及抗炎藥品原料開發(fā)提供了思路。主要研究包含以下內(nèi)容:試驗(yàn)采用水洗鹽提法制備麥胚球蛋白,以麥胚球蛋白對(duì)小鼠成纖維細(xì)胞L929活性為指標(biāo),通過單因素和響應(yīng)面設(shè)計(jì)研究了工藝過程中關(guān)鍵控制點(diǎn):鹽濃度、提取溫度、提取時(shí)間對(duì)麥胚球蛋白提取工藝進(jìn)行了研究。麥胚球蛋白的最好提取條件是:鹽濃度2.89%,提取時(shí)間1.86 h,提取溫度30.45℃,在此條件下,獲得的麥胚球蛋白對(duì)小鼠成纖維細(xì)胞L929的增殖指數(shù)達(dá)到67.89±2.31%。經(jīng)氨基酸分析表明,麥胚球蛋白中必需氨基酸的含量均明顯高于麥胚,各氨基酸含量較為均衡,離散程度最小。相比于前人的鹽提-酸沉、Osborne分級(jí)分離、鹽酶協(xié)同提取工藝,在麥胚球蛋白的提取工藝中首次以麥胚蛋白對(duì)小鼠成纖維細(xì)胞L929的生物活性為指標(biāo)對(duì)麥胚球蛋白的工藝進(jìn)行優(yōu)化。此工藝大大提高了麥胚球蛋白的商業(yè)及其他應(yīng)用價(jià)值,拓寬了麥胚資源的應(yīng)用領(lǐng)域。(2)試驗(yàn)采用體外細(xì)胞培養(yǎng)研究了麥胚球蛋白對(duì)RAW264.7細(xì)胞的體外生物學(xué)活性,實(shí)驗(yàn)研究顯示麥胚球蛋白有顯著的抗炎作用,各種濃度麥胚球蛋白對(duì)RAW264.7細(xì)胞無毒性,能夠顯著促進(jìn)正常RAW264.7的NO產(chǎn)生量;各濃度的麥胚球蛋白均能顯著抑制LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞NO的產(chǎn)生,且隨著濃度的升高抑制效應(yīng)愈加顯著;對(duì)促炎因子TNF-α有明顯的抑制作用,說明麥胚球蛋白在與促炎因子相關(guān)的炎癥疾病中起到一定的抗擊炎癥的作用。麥胚球蛋白在濃度為500~800μg/mL范圍內(nèi)對(duì)小鼠成纖維細(xì)胞L929具有明顯的增殖作用,且隨著濃度的升高,細(xì)胞增殖指數(shù)明顯升高。從細(xì)胞水平證實(shí)了麥胚球蛋白在與促炎因子相關(guān)的炎癥疾病中起到抗炎癥和組織修復(fù)功能,為進(jìn)一步利用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)評(píng)估麥胚蛋白對(duì)創(chuàng)面組織的修復(fù)作用提供理論基礎(chǔ)。(3)試驗(yàn)建立大鼠Ⅲ度燒傷模型,分析麥胚蛋白對(duì)小鼠創(chuàng)面組織的修復(fù)作用,與模型組比較,麥胚球蛋白對(duì)燒傷大鼠創(chuàng)面愈合效果明顯(P0.01)。通過燒傷創(chuàng)面組織病理學(xué)觀察,表明麥胚球蛋白對(duì)創(chuàng)面組織具有明顯的修復(fù)作用。麥胚球蛋白對(duì)燒傷大鼠創(chuàng)面具有顯著的修復(fù)作用,促進(jìn)了創(chuàng)面的愈合;模型組大鼠創(chuàng)面組織中蛋白含量、SOD活性均明顯低于正常組(P0.01),MDA、HOP與EGF均明顯高于正常組(P0.01),說明模型組大鼠創(chuàng)面組織發(fā)生了顯著變化;麥胚球蛋白作用后,蛋白含量、EGF含量、SOD活性顯著升高(P0.01),HOP含量顯著降低(P0.01)。實(shí)驗(yàn)表明,隨麥胚球蛋白顯著改善了創(chuàng)面組織的各理化指標(biāo),為創(chuàng)面組織的恢復(fù)提供了良好條件;通過對(duì)燒傷大鼠免疫功能研究,燒傷大鼠的免疫功能紊亂,麥胚球蛋白顯著降低了因燒傷引起的免疫器官的腫大,對(duì)免疫器官有一定的保護(hù)作用;對(duì)燒傷的大鼠外周血淋巴細(xì)胞亞群有明顯的調(diào)節(jié)作用。麥胚球蛋白能夠顯著的提高燒傷大鼠的免疫功能�？傊�,本課題研究內(nèi)容為開發(fā)功能性保健品及抗炎藥品原料開發(fā)提供理論參考。
[Abstract]:In this paper , we studied the biological activity of wheat germ globulin in mouse fibroblast cell line L929 . The results showed that wheat germ globulin had obvious anti - inflammatory effect . The experimental results showed that the effect of wheat germ globulin on the wound surface was significantly lower than that in the normal group ( P0.01 ) . The results showed that the content of protein , the content of EGF and the activity of SOD increased significantly ( P0.01 ) , and the content of MDA , HOP and EGF increased significantly ( P0.01 ) .
【學(xué)位授予單位】：河南工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R91

【參考文獻(xiàn)】

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1 田遠(yuǎn)耀;李俊;黃成;孟曉明;程亞卉;;橙皮素衍生物Y12抗炎活性評(píng)價(jià)[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2016年04期

2 朱偉;胡夢梅;熊小晶;張文然;劉良_，

本文編號(hào)：2133519