發(fā)布時間：2018-07-03 09:13

  本文選題：人胚胎干細胞分化的心肌細胞 + 心臟毒性��； 參考：《中國新藥雜志》2017年07期

【摘要】：目的:建立適合于藥物心臟毒性評價的人胚胎干細胞分化的心肌細胞(hESC-CM)模型,并采用此模型評價化合物潛在的心臟毒性。方法:研究選用不同種類的心臟毒性藥物:蒽環(huán)類抗癌藥阿霉素(0.2,1,5,10和20μmol·L~(-1))、酪氨酸激酶抑制劑伊馬替尼(0.2,1,5,10和20μmol·L~(-1))、β受體激動劑異丙腎上腺素(0.001,0.01,0.1,1和10μmol·L~(-1))、鈣離子通道阻滯劑維拉帕米(0.1,0.3,1,3和10μmol·L~(-1)),分別與hESC-CM孵育,采用實時細胞分析法和高內(nèi)涵細胞成像技術(shù)實時監(jiān)測心肌細胞搏動的頻率、振幅、規(guī)則性及線粒體膜電位等指標在給藥前后的變化,建立人胚胎干細胞分化的心肌細胞體外心臟毒性評價模型。應用此模型評價化合物A的心臟毒性。結(jié)果:阿霉素各濃度與hESC-CM共同孵育時,細胞的搏動振幅、搏動頻率、搏動規(guī)則指數(shù)以及線粒體膜電位均降低;20μmol·L~(-1)的伊馬替尼抑制hESC-CM的搏動振幅、搏動頻率、搏動規(guī)則指數(shù)和線粒體膜電位;異丙腎上腺素降低hESC-CM的搏動振幅、升高其搏動頻率,但此作用具可逆性,對搏動規(guī)則指數(shù)、線粒體膜電位無明顯影響;維拉帕米迅速降低hESC-CM的搏動振幅、搏動頻率,但此作用具可逆性,細胞的搏動規(guī)則指數(shù)、線粒體膜電位無明顯變化。測試化合物A和其陽性對照藥托法替尼對hESC-CM的影響類似,對搏動振幅的抑制作用成濃度時間相關(guān)性,對搏動頻率、搏動頻率規(guī)則指數(shù)也有明顯的作用,對線粒體膜電位的影響不顯著。結(jié)論:利用人胚胎干細胞分化的心肌細胞可以建立一種可行的體外心臟毒性評價模型,結(jié)合實時細胞分析法以及高內(nèi)涵細胞成像技術(shù)可快速、靈敏、準確的評價藥物的心臟毒性。
[Abstract]:Aim: to establish a cardiomyocyte model (hESC-CM) suitable for evaluating the cardiotoxicity of human embryonic stem cells and to evaluate the potential cardiac toxicity of the compounds. Methods: different kinds of cardiotoxic drugs were selected: adriamycin (0.2 mol L-1) and imatinib (0.2 渭 mol L ~ (-1), tyrosine kinase inhibitor) and isoprenaline (0.0010.010.1kan1 and 10 渭 mol L-1), calcium channel blockers), 20 渭 mol L ~ (-1), 尾 agonist (0.0010.01) and 10 渭 mol L ~ (-1), calcium channel blockers, respectively. Parmi (0.1 ~ 0.3L ~ (-1),) and 10 渭 mol / L ~ (-1), were incubated with hESC-CM, respectively. The changes of cardiomyocyte pulsation frequency, amplitude, regularity and mitochondrial membrane potential before and after administration were monitored by real-time cell analysis and high intension cell imaging. To establish a cardiotoxicity evaluation model of human embryonic stem cell differentiation in vitro. The cardiac toxicity of compound A was evaluated by this model. Results: when incubated with hESC-CM at various concentrations of doxorubicin, the pulsatile amplitude, pulsatile frequency, pulsatile regular index and mitochondrial membrane potential of hESC-CM were decreased by imatinib at 20 渭 mol L ~ (-1). The pulsatile regular index and mitochondrial membrane potential, isoproterenol decreased the pulsatile amplitude of hESC-CM and increased its pulsatile frequency, but the reversibility of this instrument had no significant effect on the pulsatile regular index and mitochondrial membrane potential. Verapamil decreased the pulsatile amplitude and frequency of hESC-CM rapidly, but the reversibility of the apparatus, the regular index of cell pulsation, and the mitochondrial membrane potential did not change significantly. The effect of Tofatinib on hESC-CM was similar to that of the positive control compound A, the inhibitory effect on the amplitude of pulsation was time-dependent, and it also had a significant effect on pulsatile frequency and regular index of pulsatile frequency. There was no significant effect on mitochondrial membrane potential. Conclusion: a feasible model for evaluating cardiac toxicity in vitro can be established by using human embryonic stem cell differentiation cardiomyocytes. The combination of real-time cell analysis and high intension cell imaging can be rapid and sensitive. Accurately evaluate the cardiac toxicity of the drug.
【作者單位】： 中國食品藥品檢定研究院國家藥物安全評價監(jiān)測中心;中國科學院生物物理研究所;康龍化成(北京)新藥技術(shù)股份有限公司;
【基金】：北京市科技計劃課題資助項目(Z141100000214001)
【分類號】：R96

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本文編號：2093145