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硫辛酸抑制帕金森病模型細(xì)胞鐵聚積的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-29 13:53

  本文選題:帕金森病 + 硫辛酸; 參考:《中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志》2015年12期


【摘要】:目的觀察硫辛酸(LA)對(duì)6-羥基多巴胺(6-OHDA)誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞鐵代謝的影響,并探討其作用機(jī)制。方法 MTT法確定6-OHDA最適造模濃度,篩選LA低、高保護(hù)濃度。實(shí)驗(yàn)分為正常對(duì)照組、模型組(6-OHDA 50μmol/L)、LA低劑量(0.001μmol/L)組和LA高劑量(0.1μmol/L)組。比色法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)MDA、鐵含量,Western blot檢測(cè)鐵代謝相關(guān)蛋白DMT1(+IRE)、IRP1、IRP2水平,實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析DMT1(+IRE)、IRP1、IRP2的mRNA表達(dá)。結(jié)果 (1)與對(duì)照組相比,模型組細(xì)胞活力明顯下降(P0.01),MDA、鐵含量顯著增加(P0.01),DMT1(+IRE)、IRP1、IRP2蛋白及mRNA水平明顯上調(diào)(P0.01)。(2)與模型組相比,LA低、高劑量組細(xì)胞活力均上升(P0.05,P0.01),MDA、鐵含量均顯著減少(P0.01),DMT1(+IRE)、IRP1、IRP2蛋白及mRNA水平均下調(diào)(P0.05,P0.01)。(3)與LA低劑量組相比,LA高劑量組MDA、鐵含量減少(P0.05),DMT1(+IRE)、IRP1蛋白及mRNA水平降低(P0.05,P0.01);而LA低劑量組與LA高劑量組相比,兩組的IRP2蛋白及mRNA表達(dá)差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 LA對(duì)6-OHDA誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用,其機(jī)制可能是通過(guò)抑制IRP/IRE途徑下調(diào)6-OHDA誘導(dǎo)的DMT1(+IRE)上升,從而減少細(xì)胞對(duì)鐵離子的吸收,減輕鐵聚集引起的氧化應(yīng)激對(duì)細(xì)胞的損傷。
[Abstract]:Aim to investigate the effect of lipoic acid (LA) on iron metabolism in PC12 cells induced by 6-hydroxydopamine (6-OHDA) and its mechanism. Methods the optimal concentration of 6-OHDA was determined by MTT assay. The experiment was divided into normal control group, model group (6-OHDA 50 渭 mol / L), low dose of LA (0.001 渭 mol / L) and high dose of LA (0.1 渭 mol / L). The intracellular MDAs were determined by colorimetry, and the levels of DMT1 (ire), IRP1nIRP2 were detected by Western blot. The expression of IRP2 mRNA in DMT1 (ire) was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. Results (1) compared with the control group, the cell viability of the model group was significantly decreased (P0.01), and the iron content was significantly increased (P0.01). The protein and mRNA levels of IRP1 and IRP2 were significantly up-regulated (P0.01). (2) in the model group compared with that in the model group. In the high dose group, the cell viability was increased (P0.05, P0.01), and the iron content was significantly decreased (P0.01). The protein and mRNA levels of IRP1-IRP2 were down-regulated (P0.05-P0.01). (_ 3). Compared with the LA low-dose group, the iron content decreased (P0.05) DMT1 (ire) IRP1 protein and mRNA level (P0.05P0.01), and the LA low-dose group was significantly lower than the LA high-dose group (P0.05P0.01). There was no significant difference in the expression of IRP2 protein and mRNA between the two groups (P0.05). Conclusion LA has protective effect on PC12 cells induced by 6-OHDA, and its mechanism may be to decrease the absorption of iron ions by down-regulating the rise of DMT1 (ire) induced by 6-OHDA via the IRP / IRE pathway. Reduce the oxidative stress caused by iron accumulation on the cell damage.
【作者單位】: 貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;貴州醫(yī)科大學(xué)神經(jīng)病學(xué)教研室;貴州醫(yī)科大學(xué)生物學(xué)教研室;貴州醫(yī)科大學(xué)天然藥物資源優(yōu)效利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:貴州省科學(xué)技術(shù)基金黔科合J字(2011)2237號(hào) 貴州省科技合作項(xiàng)目黔科合LH字(2015)7414號(hào)
【分類(lèi)號(hào)】:R96

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本文編號(hào):2082326


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