本文選題：氧化鋅 + 納米顆粒　； 參考：《中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志》2017年06期

【摘要】：目的觀(guān)察納米氧化鋅暴露對(duì)斑馬魚(yú)胚胎心臟發(fā)育及大鼠心肌細(xì)胞(H9c2)的毒性作用及可能機(jī)制。方法對(duì)納米氧化鋅材料進(jìn)行表征化處理。斑馬魚(yú)胚胎在受精后4 h(4 hpf)暴露納米氧化鋅顆粒0.5,2.5,5.0和10.0 mg·L~(-1)24~96 h,計(jì)算胚胎存活率,并于胚胎17 hpf時(shí)間點(diǎn),收集并用實(shí)時(shí)定量PCR測(cè)定中胚層脊索同源(noto),T盒16(tbx16),過(guò)短同源a(ta)和tbx6 m RNA表達(dá);觀(guān)察斑馬魚(yú)72 hpf心率。將心肌細(xì)胞標(biāo)記紅色熒光蛋白Tg(cmlc2:nuc-ds Red)的斑馬魚(yú)交配取胚胎,染毒納米氧化鋅2.5和5.0 mg·L~(-1),計(jì)數(shù)72 hpf胚胎心肌細(xì)胞數(shù)目。大鼠心肌細(xì)胞(H9c2)與納米氧化鋅0,0.1,0.5,1,5.0和10.0 mg·L~(-1)共培養(yǎng)24 h,Alamar Blue方法檢測(cè)細(xì)胞活力,透射電子顯微鏡觀(guān)察線(xiàn)粒體超微結(jié)構(gòu),化學(xué)發(fā)光法和Seahorse儀分別檢測(cè)細(xì)胞ATP和耗氧率水平。結(jié)果納米氧化鋅在雙蒸水中的粒徑分布為(331±3)nm。48 hpf的斑馬魚(yú)胚胎納米氧化鋅LC50為21.81 mg·L~(-1)。暴露納米氧化鋅2.5 mg·L~(-1)后,17 hpf斑馬魚(yú)胚胎的心臟發(fā)育關(guān)鍵基因noto,ta和tbx6表達(dá)降低(P0.05)。72 hpf斑馬魚(yú)暴露納米氧化鋅5.0 mg·L~(-1),心率為153 min-1,與正常對(duì)照組相比降低12.6%(P0.01),心肌細(xì)胞數(shù)目減少15.5%(P0.01)。納米氧化鋅0.5 mg·L~(-1)可引起大鼠心肌細(xì)胞(H9c2)細(xì)胞活力降低(P0.05)以及線(xiàn)粒體出現(xiàn)空泡化現(xiàn)象。與細(xì)胞對(duì)照組相比,細(xì)胞ATP減少25.7%(P0.05),耗氧率減少27.2%(P0.01)。結(jié)論低劑量納米氧化鋅暴露對(duì)斑馬魚(yú)心臟發(fā)育有一定影響,主要表現(xiàn)為心率降低和心肌細(xì)胞數(shù)目減少,這些變化可能與心臟發(fā)育相關(guān)基因表達(dá)減少以及細(xì)胞線(xiàn)粒體結(jié)構(gòu)和功能損傷有關(guān)。
[Abstract]:Objective to observe the toxic effects of nano-zinc oxide exposure on zebrafish embryonic heart development and rat cardiomyocyte H9c2 and its possible mechanism. Methods the nanometer zinc oxide materials were characterized. Zebrafish embryos were exposed to 0.5 and 10.0 mg / L of zinc oxide particles at 4 h and 4 h after fertilization. The survival rate of the embryos was calculated and the expression of tbx6 m RNA was detected by real-time quantitative PCR at 17 hpf. The heart rate of zebrafish was observed at 72 hpf. Zebrafish (zebrafish) labeled with red fluorescent protein (Tg(cmlc2:nuc-ds Red) were mated to obtain embryos. The embryos were treated with 2.5 and 5.0 mg / L zinc oxide and the number of 72 hpf embryonic cardiomyocytes was counted. Rat cardiomyocytes (H9c2) were co-cultured with zinc oxide (0.1mg / L) for 24 h to detect the viability of the cells. The ultrastructure of mitochondria was observed by transmission electron microscopy (TEM), and the levels of ATP and oxygen consumption were detected by chemiluminescence and Seahorse. Results the nanometer zinc oxide (LC50) of zebrafish embryo was 21.81 mg / L ~ (-1), whose particle size distribution was 31 1 鹵3)nm.48 hpf in double distilled water. After exposure to nano-zinc oxide (2.5 mg / L), the expression of Notota and tbx6 in 17 hpf zebrafish embryos was decreased, and the heart rate was 153 min ~ (-1). The heart rate of zebrafish exposed to nano-zinc oxide 5.0 mg / L ~ (-1) was 15.3 min ~ (-1). Nano-zinc oxide (0.5 mg / L) could reduce the viability of rat cardiomyocytes (H9c2) and induce vacuolation of mitochondria. Compared with the control group, the cell ATP was reduced by 25.7g / L and the oxygen consumption rate was decreased by 27.2% (P0.01g). Conclusion low dose nano-zinc oxide exposure has a certain effect on heart development of zebrafish, mainly manifested by the decrease of heart rate and the number of cardiac myocytes. These changes may be associated with decreased expression of cardiac development-related genes and damage of mitochondrial structure and function.
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81573174) 江蘇省杰出青年基金(SBK2014010296) 環(huán)境化學(xué)與生態(tài)毒理學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放課題(KF2015-01)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R99

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本文編號(hào)：1978274